一种黄曲霉尿酸氧化酶的制备方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，尤其涉及一种黄曲霉尿酸氧化酶的制备方法，其包括如下步骤：（１）、黄曲霉尿酸氧化酶基因的获得；（２）表达载体的构建及转化大肠杆菌工程菌（３）、阳性克隆的筛选、培养、诱导表达（４）、融合蛋白的分离、纯化（５）、融合蛋白的酶切、纯化，其中所述的表达载体质粒是ｐＥＴ系列载体质粒，本发明专利技术一种重组黄曲霉尿酸氧化酶的制备方法，其表达方案简单，表达量高，纯化工艺简单，收率高，表达产物可溶，不需要复性，直接用层析方法进行纯化，纯化收率大大提高，适合大规模制备。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种黄曲霉尿酸氧化酶的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（１）、黄曲霉尿酸氧化酶基因的获得；（２）表达载体的构建及转化大肠杆菌工程菌：将合成的黄曲霉尿酸氧化酶ｃＤＮＡ片段插入到表达载体质粒的酶切位点，然后直接转化大肠杆菌宿主菌；（３）、阳性克隆的筛选、培养、诱导表达：筛选出阳性克隆在培养基上进行培养，经诱导使目标蛋白表达；（４）、融合蛋白的分离、纯化：首先将大肠杆菌工程菌菌体收集、破菌，经离心得到破菌液上清，然后对破菌液上清用层析技术纯化；（５）、融合蛋白的酶切、纯化：将部分纯化的融合蛋白经酶切后用层析技术纯化得到黄曲霉尿酸氧化酶，其中所述的表达载体质粒是ｐＥＴ系列载体质粒。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘国安，方永强，张玉良，
申请(专利权)人：杭州北斗生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]