一种抗胆红素干扰的尿酸酶法测定试剂及其使用方法技术

技术编号:7274469 阅读:454 留言:0更新日期:2012-04-18 15:32
本发明专利技术涉及提供一种抗胆红素干扰的尿酸酶法测定试剂及其使用方法。本发明专利技术的试剂为液体双试剂,具有良好的抗胆红素干扰性能和优良的稳定性。采用两点终点法,可以在半/全自动生化分析仪上使用。本品采用了一种特定的酶,使试剂具有灵敏度高、抗干扰性能强的特点;本品加入选定的稳定剂,使得试剂具有良好的稳定性,在2-8℃下保存(避光密封)12个月不影响其性能。本试剂可以广泛的用于急慢性肾炎、肾结石、痛风等肾脏疾病,以及白血病、多发性骨髓瘤等核酸代谢过盛疾病的诊断、健康体检、肾脏疾病的普查等。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
,涉及。
技术介绍
尿酸(UA)是核酸中嘌呤代谢的最终产物,在人体内,嘌呤核苷酸分解生成嘌呤核苷及嘌呤后,经水解脱氨和氧化,最后生成UA0 UA随尿排出,血中UA全部通过肾小球滤出,在肾小管几乎完全被重吸收,故UA的清除率极低。由肾排出的UA占一日总排出量的 2/3-3/4,其余在胃肠道被微生物的酶分解。GFR减低时UA不能正常排泄,血中UA浓度升高。一些药物也影响UA的排泄,如噻嗪类利尿药盒羟本璜胺可促进UA的排出。水杨酸制剂在高剂量时也增加其排泄。通常UA水平的增加与含氮物质、尿素、肌酐和其他非蛋白因素有关,临床上常用于痛风、肾功能障碍、骨髓疾病以及一些未明原因的高尿酸血症的辅助诊断。临床意义(I)UA在血中含量与体内核酸的代谢速度、肾的排泄功能和食物中核酸的含量有关。UA难以溶解,浓度高时会沉积于组织内,形成结石。(2)血清UA增多主要见于痛风,是临床诊断痛风的主要指标。痛风石嘌呤代谢失调所致,血清UA可明显升高。(3)核酸代谢亢进可引起内源性UA生成增加,血清UA上升。见于白血病,多发性骨髓瘤,真性红细胞增多症等。(4)妊娠高血压,子痫等肾血流量减少的病变,因UA排泄减少而使血清UA升高。 但此时SUR常无变化。(5)血清UA升高还见于慢性铅中毒,氯仿及四氯化碳中毒。(6)低尿酸血症多由于代谢紊乱,如UA生成不足、肾小管对UA的转运异常及尿中 UA排出异常增加所致,亦见于Wilson氏病、Fancoi综合症、严重贫血等。高尿酸血症作为现代文明病的新种类引起了医学界的高度关注,准确地检测UA 在临床应用上愈显得重要。UA测定方法很多,有磷钨酸法、尿酸酶法、干化学方法和HPLC法等。目前最流行的方法是尿酸酶-过氧化物酶反应体系,方法灵敏且不需要去蛋白质,主要的干扰物是抗坏血酸(维生素C,VC)和胆红素。因此,解决抗坏血酸和胆红素对UA测定的干扰问题,具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种抗干扰能力好的抗胆红素干扰的尿酸酶法测定试剂及其使用方法。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案是一种抗胆红素干扰的尿酸酶法测定试剂,所述试剂为液体双试剂,其中一种试剂1的组分及含量为磷酸盐缓冲液(pH6. 0-8. 0)0. 10-100g/L,过氧化物酶0. 10-10KU/L,N-乙基-N-(3-甲苯)N-琥珀酰乙二胺 EMSE 0. 10-10g/L,抗干扰酶0. 10-10KU/L,稳定剂0.10-100g/L;其中第二种试剂2的组分及含量为磷酸盐缓冲液(pH6. 0-8. 0) 0. 10-100g/L,过氧化物酶0. 10-10KU/L,尿酸酶0. 10-10KU/L,4 氨基安替比林 4-AAP0. lO-lOg/L,稳定剂0. 10-100g/L具体说,所述抗干扰酶为抗胆红素氧化酶;所述稳定剂为牛血清白蛋白、亚铁氰化物、曲拉通-100、多元醇、聚乙二醇中的至少一种;其中磷酸盐缓冲液可以采用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾等。一种上述抗胆红素干扰的尿酸酶法测定试剂的使用方法,包括下述步骤(1)样本准备样本为空腹不溶血血清或血浆,样本在低温条件下运输保存;(2)采用全自动生化分析仪对步骤(1)的样本进行检测,具体参数如下反应类型两点终点法,反应方向正反应,主波长600nm,副波长800nm,反应温度37 °C,样本/ 试剂(S/ 3/200,样本量(S):3yl,试剂I(Ri) :150 μ 1,试剂2(R2) :50μ 1,反应时间IOmin。步骤(1)中空腹不溶血血清或血浆采用肝素抗凝,0. Img肝素可抗凝1. Oml血液; 或采用EDTA抗凝1. 8mg EDTA可抗凝1. Oml血液。样本中尿酸在室温条件下可稳定8小时,在2°C 8°C可稳定3天,在_20°C保存可稳定6个月。综上所述,本专利技术的有益效果是本专利技术的试剂为液体双试剂,具有良好的抗胆红素干扰性能和优良的稳定性。采用两点终点法,可以在半/全自动生化分析仪上使用。本品采用了一种特定的酶,使试剂具有灵敏度高、抗干扰性能强的特点;本品加入选定的稳定剂,使得试剂具有良好的稳定性,在2-8°C下保存(避光密封)12个月不影响其性能。本试剂可以广泛的用于急慢性肾炎、肾结石、痛风等肾脏疾病,以及白血病、多发性骨髓瘤等核酸代谢过盛疾病的诊断、健康体检、肾脏疾病的普查等。具体实施方式 实施例1 (1)样本准备样本为空腹不溶血血清或血浆(肝素抗凝,0. Img肝素可抗凝 1. Oml血液;EDTA抗凝1. 8mg EDTA可抗凝1. Oml血液)。样本应在低温条件下运输保存, 样本中尿酸在室温条件下可稳定8小时,在2°C 8°C可稳定3天,在_20°C保存可稳定6个月。(2)按以下成分和用量配制尿酸测定试剂试剂1 磷酸盐缓冲液(pH6. 0-8. 0) 0. 10-100g/L,过氧化物酶0. 10-10KU/L,N-乙基-N-(3-甲苯)-N_ 琥珀酰乙二胺 EMSE 0. 10-10g/L,抗干扰酶0. 10-10KU/L,稳定剂0. 10-100g/L ;试剂2 磷酸盐缓冲液(pH6. 0-8. 0)0. 10-100g/L,过氧化物酶0. 10-10KU/L,尿酸酶0. 10-10KU/L,4-氨基安替比林 4-AAP0. lO-lOg/L,稳定剂0. 10-100g/L。上述各组分及其含量具体为,试剂1中磷酸盐缓冲液为0. 10-100g/L之间的任意值,具体为 0. 1、0· 2,0. 5、l、3、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100g/L 均可,pH 为 6. 0-8. 0之间的任意值,具体为6、6. 2,6. 5,6. 7,7. 0,7. 2,7. 5,7. 7,8. 0均可;过氧化物酶为 0. 10-10KU/L 之间的任意值,具体为 0. 1、0· 2,0. 5,0. 8、1、3、5、7、10KU/L 均可;N-乙基-N-(3-甲苯)-N-琥珀酰乙二胺EMSE为0. 10_10g/L之间的任意值,具体为0. 1,0.3,0.5、l、3、5、10g/L均可;抗干扰酶为0. 10-10KU/L之间的任意值,具体为0. 1,0. 2,0. 5,0. 8、1、3、5、7、10KU/L均可;稳定剂为0.10-100g/L之间的任意值,具体为0. 1,0. 2,0. 5、1、3、5、 10、20、30、40、50、60、70、80、90、100g/L 均可。试剂 2 中磷酸盐缓冲液为 0. 10-100g/L 之间的任意值,具体为 0. 1,0. 2,0. 5、l、3、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100g/L 均可,pH 为6. 0-8. 0之间的任意值,具体为6、6. 2,6. 5,6. 7,7. 0,7. 2,7. 5,7. 7,8. 0均可;过氧化物酶为0. 10-10KU/L之间的任意值,具体为0. 1,0. 2,0. 5、0. 8、1、3、5、7、10KU/L均可;尿酸酶为 0. 10-10KU/L 之间的任意值,具体为 0. 1,0. 2,0. 5,0. 8、1、3、5、7、10KU/L 均可;4-氨基安替比林为0. 1本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王浩余向东程明汪峰
申请(专利权)人:浙江世纪康大医疗科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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