一种牛支原体免疫相关性蛋白、含有该蛋白的检测试剂盒及其在牛支原体抗体检测中的用途制造技术

本发明专利技术公开了一种牛支原体免疫相关性蛋白、含有该蛋白的检测试剂盒及其在牛支原体抗体检测中的用途。所述的牛支原体免疫相关性蛋白，命名为p28蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。敏感性实验证明，本发明专利技术的一种牛支原体血清抗体ELISA检测试剂盒(MbH试剂盒)其最低可以检测出为1：2560稀释倍数的阳性血清，特异性实验证明，该试剂盒的特异性为97.8％，与牛传染性胸膜肺炎(CBPP)阳性血清、口蹄疫(FMD)阳性血清、牛结核(MB)阳性血清、牛病毒性腹泻(BVDV)阳性血清、牛传染性鼻气管炎(IBRV)阳性血清不发生发生特异性反应，并且具有良好的稳定性以及较高的准确性。本发明专利技术的提出为牛支原体抗体的检测提供了一种新的技术手段。

The use of a bovine mycoplasma detection kit immune related protein, the protein contained in detecting mycoplasma antibody in

Use the detection kit of the invention discloses a bovine mycoplasma immune related protein, the protein contained in detecting mycoplasma antibody in. The correlation between Mycoplasma bovis immune protein, named p28 protein, its amino acid sequence is shown as SEQ ID NO.2. The sensitivity experiments show that a box of cattle Mycoplasma serum antibody ELISA kit of the invention (MbH Kit) the minimum can be detected as 1:2560 positive serum dilution, demonstrated the specific experiment, the specificity of the kit was 97.8%, pneumonia and contagious bovine pleuropneumonia (CBPP) positive serum, foot-and-mouth disease (FMD) positive serum, bovine tuberculosis (MB) positive serum, bovine viral diarrhea virus (BVDV) positive serum, bovine rhinotracheitis (IBRV) positive serum no specific reaction, and has good stability and high accuracy. The present invention provides a new technique for the detection of Mycoplasma bovine antibody.

【技术实现步骤摘要】
一种牛支原体免疫相关性蛋白、含有该蛋白的检测试剂盒及其在牛支原体抗体检测中的用途
本专利技术涉及一种牛支原体免疫相关性蛋白、编码其的核苷酸序列及应用，还涉及含有该蛋白的检测试剂盒及其在牛支原体检测中的用途，本专利技术属于生物

技术介绍
牛支原体(Mycoplasmabovis)是感染牛的一种重要致病性病原体，主要引起牛肺炎、关节炎、乳腺炎、角膜结膜炎等疾病，给世界养牛业造成了很严重的经济损失。我国于2008年首次报道了M.bovis肺炎，该病原日益成为危害我国养牛业的重要因素。目前M.bovis无国际公认的特异性诊断方法，这给该疾病的防控带来困难。研究具有自主知识产权的M.bovis血清抗体ELISA试剂盒意义深远。本专利技术建立了M.bovis血清抗体检测ELISA方法并组装为试剂盒，填补了国内M.bovisELISA试剂盒的空白。通过对M.bovisHubei-1分离株全基因组序列分析等前期工作可知，p28基因是一个假定膜蛋白基因。为了获得该基因的重组蛋白，本专利技术以M.bovisHubei-1分离株基因组为材料，对假定膜蛋白基因p28进行PCR扩增、克隆、构建表达载本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种牛支原体免疫相关性蛋白，命名为p28蛋白，其特征在于，所述的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种牛支原体免疫相关性蛋白，命名为p28蛋白，其特征在于，所述的蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。2.编码权利要求1所述的牛支原体免疫相关性蛋白的核苷酸序列。3.如权利要求2所述的核苷酸序列，其特征在于所述的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。4.权利要求1所述的牛支原体免疫相关性蛋白在制备检测牛支原体抗体试剂中的用途。5.一种牛支原体血清抗体ELISA检测试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述的牛支原体免疫相关性蛋白。6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，还含有稀释液、封闭液、洗涤液、酶标二抗、阳性对照血清、阴性对照血清、显色液以及终止液。7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述的酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的兔抗牛IgG抗体。8.如权利要求5-7任一项所述的试剂盒，其特征在于，用于牛支原体抗体检测时，按照以下步骤进行：(1)取出牛支原体免疫相关性蛋白p28蛋白作为包被抗原，用碳酸盐包被液稀释后加入ELISA板中；(2)将加入包被抗原的ELISA板用封口袋封闭，在37℃条件下，孵育2h，PBST洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：辛九庆，李媛，刘洋，
申请(专利权)人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23