一种从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法技术

本发明专利技术提供了一种从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法，包括对刺玫果进行脱脂处理；然后在复合酶及离子液体的辅助下经乙醇水溶液提取。本发明专利技术创造性地在提取步骤前使用适当脱脂等预处理方法；本发明专利技术创造性地在提取步骤中使用了复合酶辅助提取的方法；本发明专利技术创造性地在提取步骤中使用离子液体辅助提取的方法，并获得金丝桃苷及木犀草素二者含量尽可能高的提取浸液，金丝桃苷提取率大于33µg/g，木犀草素提取率大于16µg/g。

A method for the simultaneous extraction of Hyperoside and Luteolin from the fruit of Rosa prickly

The invention provides a method for extracting hypericin and Luteolin from Rosa dahuricus, including degreasing the Rosa chinense fruits, and then extracting with ethanol and aqueous solution under the assistance of compound enzymes and ionic liquids. The invention creatively in the extraction step before using appropriate degreasing and pretreatment method; the invention creatively in the extraction step using the method of enzyme assisted extraction; method of the invention, the creative use of ionic liquid in extraction step extraction, extraction and extract Hyperoside and luteolin content as high as possible two the Hyperoside extraction rate of more than 33 g/g, luteolin extraction rate higher than 16 g/g.

【技术实现步骤摘要】
一种从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法
本专利技术涉及医药
，具体涉及一种从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法。
技术介绍
刺玫果为蔷薇科山刺玫Rosadavuricapall．的干燥成熟果实，秋季果实成熟时采收，晒干，主要产于东北、华北及内蒙古等地，刺玫果中含总黄酮，维生素、果胶、糖及皂苷等化学成份。药理实验表明，刺玫果水提物、醇提物均可降低麻醉大鼠血压和脑血管阻力，可使麻醉猫心率减慢，增加冠脉流量，降低冠脉阻力；还可降低小鼠耗氧量及延长缺氧小鼠存活时间，并能对抗异丙肾上腺素增加心肌耗氧量的作用；刺玫果水提物静脉注射，可抑制大鼠血栓形成。近年来国内的大量研究表明它有抗衰老、增强免疫、抗疲劳，保肝等作用。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供了一种从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法，包括以下步骤：1）对刺玫果进行脱脂处理；2）将脱脂后的刺玫果与提取溶剂混合，加入复合酶，调节体系pH值及水浴温度，进行酶解；3）在刺玫果的酶解液中加入适量的离子液体，调节体系水浴温度，进行提取；4）刺玫果的提取浸液置于容量瓶中定容，采用高效液相色谱法同时测定提取浸液中金丝桃苷、木犀草素的含量。优选地，本专利技术所述从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法中，所述步骤1）中刺玫果的脱脂处理为将刺玫果自然晾干，使含水量低于7%重量，然后以料液比为1:3（质量：体积）的石油醚（沸程为60℃~90℃）回流脱脂，低温干燥，使含水量低于4%重量，得到预处理好的刺玫果；更优选地，所述石油醚回流脱脂次数为2次，脱脂时间分别为1.5、1.0h；更优选地，所述低温干燥的温度为低于60℃。优选地，本专利技术所述从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法中，所述步骤2）中复合酶为纤维素酶与果胶酶按质量比2:1混合而成；所述步骤2）中提取溶剂为70%乙醇水溶液；所述步骤2）中体系pH值为5~6，水浴温度为45℃~50℃。所述步骤3）中离子液体为1-丁基-3-甲基咪唑硝酸盐；所述步骤3）中水浴温度为75℃~80℃。更优选地，所述步骤2）中酶解方法为将70%的乙醇水溶液与预处理好的刺玫果按料液比（质量：体积比）为1:40进行混合，加入相当于刺玫果质量0.05%的复合酶，用20%的乙酸水溶液调至体系pH值为5～6，于水浴温度45℃~50℃条件下酶解3h。更优选地，所述步骤3）中离子液体辅助提取的方法为：在刺玫果的酶解液中，加入离子液体1-丁基-3-甲基咪唑硝酸盐适量，使离子液体摩尔浓度为0.1～0.6mol/L，然后升高水浴温度至75℃~80℃提取5h，过滤，滤液减压浓缩，置于合适的容量瓶中定容，得到刺玫果的提取浸液。优选地，本专利技术所述从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法中，所述步骤4）中高效液相色谱法同时测定提取浸液中金丝桃苷、木犀草素的含量，其流动相为：乙腈为流动相A，0.25%磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱（0min--17%A;22min--20%A;27min--24%A;28min--28%A;36min--32%A;41min--35%A）。本专利技术提供了上述方法获得的含有金丝桃苷和木犀草素的刺玫果提取浸液，其中，所述刺玫果中的金丝桃苷提取率大于33µg/g，木犀草素提取率大于16µg/g。本专利技术与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：本专利技术创造性地在提取步骤前使用适当脱脂等预处理方法；本专利技术创造性地在提取步骤中使用了复合酶辅助提取的方法；本专利技术创造性地在提取步骤中使用离子液体辅助提取的方法，并获得金丝桃苷及木犀草素二者含量尽可能高的提取浸液，金丝桃苷提取率大于33µg/g，木犀草素提取率大于16µg/g。具体实施方式本专利技术的实施例中提供了一种从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法，包括以下步骤：1）对刺玫果进行脱脂处理；2）然后将脱脂后的刺玫果与提取溶剂混合，加入复合酶，调节体系pH值及水浴温度，进行酶解；3）在刺玫果的酶解液中加入适量的离子液体，调节体系水浴温度，进行提取；4）刺玫果的提取浸液置于容量瓶中定容，采用高效液相色谱法同时测定提取浸液中金丝桃苷、木犀草素的含量。优选地，在本专利技术的一个实施例中，所述步骤1）中刺玫果的脱脂处理为将刺玫果自然晾干，使含水量低于7%重量，然后以料液比为1:3（质量：体积）的石油醚（沸程为60℃~90℃）回流脱脂，低温干燥，使含水量低于4%重量，得到预处理好的刺玫果。更优选地，所述石油醚回流脱脂次数为2次，脱脂时间分别为1.5、1.0h。更优选地，所述低温干燥的温度为低于60℃。优选地，本专利技术所述从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法中，所述步骤2）中复合酶为纤维素酶与果胶酶按质量比2:1混合而成；所述步骤2）中提取溶剂为70%乙醇水溶液；所述步骤2）中体系pH值为5~6，水浴温度为45℃~50℃。优选地，本专利技术所述从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法中，所述步骤3）中离子液体为1-丁基-3-甲基咪唑硝酸盐；所述步骤3）中水浴温度为75℃~80℃。更优选地，所述步骤2）中酶解方法为将70%的乙醇水溶液与预处理好的刺玫果按料液比（质量：体积）为1:40进行混合，加入相当于刺玫果质量0.05%的复合酶，用20%的乙酸水溶液调至体系pH值为5～6，于水浴温度45℃~50℃条件下酶解3h。更优选地，所述步骤3）中离子液体辅助提取的方法为：在刺玫果的酶解液中，加入离子液体1-丁基-3-甲基咪唑硝酸盐适量，使离子液体摩尔浓度为0.1～0.5mol/L，然后升高水浴温度至75℃~80℃提取5h，过滤，滤液减压浓缩，置于合适的容量瓶中定容，得到刺玫果的提取浸液。优选地，本专利技术所述从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法中，所述步骤4）中高效液相色谱法同时测定提取浸液中金丝桃苷、木犀草素的含量，其流动相为：乙腈为流动相A，0.25%磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱（0min--17%A;22min--20%A;27min--24%A;28min--28%A;36min--32%A;41min--35%A）。优选地，在本专利技术的一个实施例中，所述步骤4）中高效液相色谱法同时测定提取浸液中金丝桃苷、木犀草素的含量，色谱条件：色谱柱为大连依利特ODS2C18（4.6mm×250mm,5μm）；流动相为乙腈为流动相A，0.25%磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱（0min--17%A;22min--20%A;27min--24%A;28min--28%A;36min--32%A;41min--35%A）；体积流量为1.0mL/min；柱温35℃；检测波长360nm；进样量20µL。在上述色谱条件下，金丝桃苷、木犀草素的色谱峰与相邻峰的分离度均大于1.5。优选地，在本专利技术的一个实施例中，所述步骤4）中高效液相色谱法同时测定提取浸液中金丝桃苷、木犀草素的含量，金丝桃苷在0.19～15.20µg/mL（R=0.9981）范围内色谱峰的峰面积与质量浓度呈良好线性关系、木犀草素在0.19～15.20µg/mL（R=0.9977）范围内色谱峰的峰面积与质量浓度呈良好线性关系；仪器精密度试验中金丝桃苷对照品的RSD为2.40%、刺玫果提取浸液的RSD为2.07%，木犀草素对照品的RSD为2.35%、本文档来自技高网...

【技术保护点】
本专利技术提供了一种从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法，包括以下步骤：1）对刺玫果进行脱脂处理；2）将脱脂后的刺玫果与提取溶剂混合，加入复合酶，调节体系pH值及水浴温度，进行酶解；3）在刺玫果的酶解液中加入适量的离子液体，调节体系水浴温度，进行提取；4）刺玫果的提取浸液定容至容量瓶中，采用高效液相色谱法同时测定提取浸液中金丝桃苷、木犀草素的含量。

【技术特征摘要】
1.本发明提供了一种从刺玫果中同时提取金丝桃苷和木犀草素的方法，包括以下步骤：1）对刺玫果进行脱脂处理；2）将脱脂后的刺玫果与提取溶剂混合，加入复合酶，调节体系pH值及水浴温度，进行酶解；3）在刺玫果的酶解液中加入适量的离子液体，调节体系水浴温度，进行提取；4）刺玫果的提取浸液定容至容量瓶中，采用高效液相色谱法同时测定提取浸液中金丝桃苷、木犀草素的含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中刺玫果的脱脂处理为将刺玫果自然晾干，使含水量低于7%重量，然后以料液比为1:3（质量：体积）的石油醚（沸程为60℃~90℃）回流脱脂，低温干燥，使含水量低于4%重量，得到预处理好的刺玫果。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述石油醚回流脱脂次数为2次，脱脂时间分别为1.5、1.0h；其特征在于，所述低温干燥的温度为低于60℃。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2）中复合酶为纤维素酶与果胶酶按质量比2：1混合而成；其特征在于，所述步骤2）中提取溶剂为70%乙醇水溶液；其特征在于，所述步骤2）中体系pH值为5~6，水浴温度为45℃~50℃。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3）中离子液体为1-丁基-3-甲基咪唑硝酸盐；...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟方丽，王晓林，雷永平，陈铎鑫，陈帅，薛健飞，
申请(专利权)人：吉林化工学院，
类型：发明
国别省市：吉林,22