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基于骨髓间充质干细胞的骨组织分阶段灌流培养方法技术

技术编号:1737283 阅读:161 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供一种基于骨髓间充质干细胞的骨组织分阶段灌流培养方法,采用注射器低速抽取接种方法,具体通过低流速的灌流培养和高流速的灌流培养的前后分阶段实施不同灌流速度的调节方法,提高种子细胞在PLGA支架内的接种效率。本发明专利技术不但增加了细胞在PLGA支架内的粘附和均匀分布,并且有效地提高了种子细胞在PLGA支架内的增殖效率;通过流液对种子细胞产生的剪切力,增加了种子细胞向成骨细胞定向分化的能力;本发明专利技术方法设计合理,达到了种子细胞在PLGA支架内增殖和成骨细胞定向分化的双重目的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属生物技术,涉及一种基于骨髓间充质干细胞的骨组织分阶段灌流培养方法。这种方法能有效地提高骨髓间充质干细胞在聚乳酸-乙醇酸(PLGA)支架内种植、扩增和定向分化成骨细胞的能力。
技术介绍
骨组织工程为大面积的骨损伤提供了一种替代疗法。体外构建组织工程骨 是骨组织工程的重要研究内容之一,其目的是通过体外扩增种子细胞至一定数 量后,复合到支架材料上进行共培养,形成与骨组织形态学和生物学性状相似 的新生组织来修复骨缺损。骨髓间充质干细胞是一种理想的骨组织工程种子细胞。体外培养的骨髓间充质干细胞具有强大的增殖能力,可以扩增109倍;骨髓间充质干细胞在扩增过 程中不会自分化,而且具有多向分化潜能,在一定的条件下可分化为骨,韧带, 脂肪,软骨和肌肉等。鉴于其取材容易、体外扩增能力强、具有多向分化潜能、 植入体内后无免疫排斥,骨髓间充质干细胞被广泛用于与支架材料复合构建组 织工程骨来修复骨缺损。支架为细胞生长提供三维的结构支架和特异性的生长分化信号,使细胞间 形成适宜的空间分布和细胞连接,形成与体内组织相似的生长微环境。聚乳酸 和聚乙醇酸及其共聚物具有良好的组织相容性、可降解性,且材料表本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于骨髓间充质干细胞的骨组织分阶段灌流培养方法,其特征在于通过以下步骤实现: Ⅰ. 构建灌流培养装置:通过硅胶软管(5)连接蠕动泵(1)、气体过滤装置(2)、贮液瓶(3)和样品槽(4)构建灌流培养装置,贮液瓶(3)的出口端通过硅胶 软管(5)与样品槽上槽架(6)进口端相连,贮液瓶(3)进口端通过硅胶软管(5)与样品槽下槽架(7)出口端相连,贮液瓶(3)瓶设有用于进行气体交换的过滤装置(2),样品槽(4)设有通过螺纹(12)卸接的上槽架(6)和下槽架(7),上槽架(6)顶部开有培养液进口,下槽架(7)底部开有培养液出口,下槽架(7)内底部垫有微孔网(9),支架(8)置于样品槽(4)...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王金福杨金凤曹琛
申请(专利权)人:浙江大学
类型:发明
国别省市:86[中国|杭州]

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