本发明专利技术公开了一组用于抑制舌鳞癌中ｍｉＲ－２１表达的反义寡聚核苷酸及其应用。本发明专利技术所述的反义寡聚核苷酸，包括与下述核苷酸序列中至少１２个连续的核苷酸互补的序列：５’－ＵＡＧＣＵＵＡＵＣＡＧＡＣＵＧＡＵＧＵＵＧＡ－３’，上述互补序列可特异性结合于人ｍｉＲ－２１的不同区域。本发明专利技术的反义寡聚核苷酸可以为核糖核苷酸，也可以为脱氧核糖核苷酸，并可以对任一核苷酸进行修饰。本发明专利技术所述的具有抗舌鳞癌作用的ｍｉＲ－２１反义寡核苷酸能够有效抑制舌鳞癌细胞ＳＳＣ－１５和ＣＡＬ－２７中ｍｉＲ－２１的表达，同时抑制上述两种细胞的生长和增殖，促进细胞凋亡，从而能够有效地治疗舌鳞癌及其他ｍｉＲ－２１高表达的肿瘤。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及反义核酸及其应用，尤其涉及miR-21的反义核酸及其在制备治 疗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
研究发现，microRNAs (又称为miRNAs或微小核酸)与多种疾病的发生和 发展密切相关。在众多疾病中，恶性肿瘤的miRNA表达异常最受瞩目。Berezikov 等(Berezikov E, Guryev V, van de Belt J, et al. Phylogenetic shadowing and computational identification of human microRNA genes. Cell, 2005， 120(1) :21-24)通过计算机分析显示30%以上的蛋白编码基因可能成为miRNA 的耙基因。Calin等(Calin GA， Sevignani C，Dumitru CD, et al. Human microRNA genes are frequently located at fragile sites and genomic regions involved in cancers. Proc Natl Acad Sdi USA, 2004, 101(9):2999-3004) 研究显示，50%的miRNAs位于肿瘤相关基因组的区域或者脆弱位点，提示 miRNAs可能在部分肿瘤发生中发挥了人们原来所不了解的重要作用。最早人们 对于miRNAs参与肿瘤发生发展的证据来自'人慢性淋巴细胞白血病(Calin GA，D咖itru CD, Shimizu M， et al. Frequent deletions and down-regulation of micro- RNA genes miR15 and miR16 at 13ql4 in chronic lymphocytic leukemia. Proc Natl Acad Sci USA, 2002, 99(24) : 15524-15529)，研究者 发现定位于13ql4的miR-15a和miR-16a在50%慢性淋巴细胞白血病患者中缺 失或者表达下降。之后Ci咖ino (Cimmino A, Calin GA, Fabbri M, et al. miR-15 and miR_16 induce即optosis by targeting B(X2. Proc Natl Acad Sci U S A， 2005， 102(39) :13944-13949)的研究显示，Bcl_2是miR-15a和miR-16a的 靶基因。miR-15a和miR-16a的表达水平与慢性淋巴细胞白血病中Bcl-2的表达 水平密切相关，这两个miRNAs可以从转录后水平负性调控Bcl-2的表达，这一 研究同时也为白血病的细胞模型il供了依据，提示miR-15a和miR-16a可以被 用来治疗过度表达Bel-2的肿瘤。3根据高通量的miRNA微阵列和QRT-PCR的定量分析，发现在多种人类恶性肿 瘤中，包括结肠癌、乳腺癌、肺癌、肾癌、胃癌、淋巴瘤、白血病等的miRNA表 达谱与它们来源的正常组织存在很大区别，这种区别在低分化和恶性程度高的肿 瘤组织表现得更显著些(Alvarez Garcia I，Miska EA. MicroRNA functions in animal development and human disease.Development, 2005' 132(21) :4653-4662; WakiyamaM' TakimotoK' Ohara 0, et al. Let-7 microRNA-鹏diated mRNA deadenyiation and translational repression in a mammalian celi-free system. Genes Dev, 2007,21(15) :1857-1862; Meng F，Henson R，Lang M，et al. Involvement of human micro-RNA in growth and response to chemotherapy in human cholangiocarcinoma cell lines. Gastroenterology, 2006， 130(7) :2113-2129)。总的来说，恶性肿瘤的miRNA总 体含量比来源的正常组织明显降低，肿瘤分化越差，miRNA的含量也越低。此外， 具体到每一种恶性肿瘤，都发现有几种miRNA的表达明显低于其来源的正常组 织。在乳腺癌组织中，miR-10b、 let-7、 miR-125b和miR-145等miRNA的表达 明显下调。另一方面，某些miRNA在肿瘤组织内的表达却有所上升，如乳腺癌的 miR-155 (Couzin, J. Cancer biology. A new cancer player takes the stage. Science, 2005， 310:766-767)。恶性肿瘤miRNA表达的变化说明肿瘤细胞基因调 控机制发生改变，与cDM微阵列比较，tniRNA表达谱能为癌肿的分子分期和分 型提供更准确的信息(Lu J,Getz G，Miska EA， et al. MicroRNA expression profiles classify hu画cancers. Nature, 2005， 435(7043) :834-838)。那么， 表达水平发生变化的miRNA是否参与了恶性肿瘤的发生和发展？虽然目前对该 问题的研究还'处在初始阶段，但是根据生物信息学的预测和现有的实验研究结 果，发现在癌细胞中表达异常的miRNA的靶基因属于癌基因或者抑癌基因，这些 靶基因都与细胞的增殖、凋亡或分化密切相关。.正是因为miRNA具有调节癌基因 或者抑癌基因表达的功能，故其自身也充当着"抑癌基因"和"癌基因"的角色 (Chen CZ. MicroRNAs as oncogenes and t咖or suppressors. N Engl J Med, 2005, 353(17) :1768-1777; Iorio MV' Ferracin M， Liu CG, et al. MicroRNA g, expression deregulationin human breastcancer.Cancer Res, 2005,65(16):7065-7070; Caldas C，Brenton JD. Sizing up miRNAs as cancer genes. Nat Med， 2005， 11 (7) :712-714; Zhang B, Pan X, Cobb GP， et al. microRNAsas oncogenes and .tumor suppressors. Dev Biol, 2007, 302(1) :1-12; Hammond SM. MicroRNAs as tumor suppressors. Nat Genet, 2007, 39(5) :582-583本文档来自技高网...
【技术保护点】
针对人ｍｉＲ－２１的一组反义寡聚核苷酸，其包括与下述核苷酸序列中至少１２个连续的核苷酸互补的序列：５’－ＵＡＧＣＵＵＡＵＣＡＧＡＣＵＧＡＵＧＵＵＧＡ－３’。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李劲松，宋尔卫，张佩琢，
申请(专利权)人：苏州吉玛基因药物科技有限公司，李劲松，宋尔卫，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]
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