超氧化歧化酶(SOD)的提纯方法技术

本发明专利技术是一种超氧化歧化酶（ＳＯＤ）的提纯方法，将动物肝脏匀浆在二价铜盐的条件下分步加热和透析沉淀除去杂质，提取ＳＯＤ；采用硫酸铵分步盐析，除去杂蛋百，收集含ＳＯＤ的蛋白质，再经透析、浓缩、干燥，可获得比活力为２７８９单位／毫克的ＳＯＤ．（*该技术在2006年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术是一种超氧化歧化酶(SOD)的提纯方法。本专利技术属于酶学，在IPC分类中为C12N9/02。本专利技术与日本专利昭和58-179487相似。将动物肝脏置于0.5M NaCl，10-3M氯化亚铜，PH5.6制成匀浆，温度70℃的条件下加热30分钟，经离心弃去沉淀。将上清液用冰冻干燥浓缩，然后在蒸馏水中透析。在经透析的SOD溶液中加入10-3～5×10-3M的亚铜盐，加热，分离去除杂蛋白，再经DEAE和Sephadex两次层析分离，从而制得纯SOD。本专利技术的目的是向医药工业提供生产成本低廉，操作简便，又适合于大规模制备和纯化SOD的方法。本专利技术的详细内容 本专利技术实施例1.称取1000克新鲜猪肝加入含0.15M NaCl和5mM CuCl2溶液(A液)，A液体积是猪肝重的2.5倍制成肝匀浆。然而用0.2M Tris缓冲液调PH至5.6，于70℃水浴中加热匀浆至65℃，保持15分钟。然后，在水中冷却，经过滤或离心得上清液。用600ml蒸馏水洗沉淀，合并上清液。2.用2M NaOH将上清液调PH至6.7。加入固体(NH4)2SO4使其为50%(NH4)2SO4饱和度，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种超氧化歧化酶（ＳＯＤ）的提纯方法，它以动物肝脏为原料，用氯化铜二次处理提取ＳＯＤ，经离心沉淀、透析、分离去除杂蛋白，获得纯ＳＯＤ。本专利技术的特征在于：ａ）肝脏用０．００５～０．２５ＭＮ↓〔ａ〕Ｃｌ和１．０～８ＭＮ二价铜盐匀浆，硫酸铵盐 析。ｂ）采用１．０～２．５ｍＭ二价铜离子溶液作为ＳＯＤ粗制液的透析液。ｃ）经透析后的ＳＯＤ粗制液直接加热去除残留杂蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种超氧化歧化酶(SOD)的提纯方法，它以动物肝脏为原料，用氯化铜二次处理提取SOD，经离心沉淀、透析、分离去除杂蛋白，获得纯SOD，本发明的特征在于a)肝脏用0.005～0.25MNaCl和1.0～8mM二价铜盐匀浆，硫酸铵盐析。b)采用1.0～2.5mM二价铜离子溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：周殿松，
申请(专利权)人：交通部石油部海洋水下工程科学研究院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]