【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种酶的纯化方法，更具体的说是一种用水溶性聚合物和盐组成的双水相系统直接从细胞破碎物中提取酶的方法。随着酶制剂在医药和其它领域的广泛应用，需要大量纯度高的酶制剂。1977年西德的M.R.Kula等人的西德专利2616584号公开了用聚乙二醇(PEG)，葡聚糖，水组成的双水相系统分离纯化了克雷伯氏肺炎菌(Klebsiella pneumoniae)产生的异淀粉酶和大肠杆菌产生的氨基酰tRNA合成酶，该方法由于使用的葡聚糖价格贵，实际应用受到限制。用聚乙二醇和水组成的双水相系统成本较低，已用于一些酶的纯化，如H.Hustedt等人报道(Precess Biochemistry Ot 129-137，1988)利用PEG/盐双水相系统分离纯化的酶主要有延胡索酸酶，天冬氨酸酶，青霉素酰化酶，苹果酸脱氢酶和甲酸脱氢酶等，所使用的均匀为单一分子量的PEG，对相系统的pH值未加以控制，因此提纯倍数较低。林哲甫等人在中国专利86103207号中公开了“用高聚物盐和水两相系统纯化酶制剂”的方法。该方法亦是使用单一分子量的PEG对系统pH未加控制，且是从工...
【技术保护点】
一种纯化酶，特别是荧光素酶的方法，该法包括用机械或化学的方法将发酵得到的细胞破碎，与水溶性聚合物聚乙二醇（ＰＥＧ）和盐溶液混合，低速离心进行相分离，除去细胞破碎物沉淀再加入ＰＥＧ和盐溶液，反复进行相反离４－６次，最后一次相分离用改变盐种类，盐浓度和ｐＨ值的方法使酶存在于下相水溶液中，经浓缩得到酶制剂，该方法的特征在于：ａ、用一种分子量或两种分子量混合的水溶性聚合物和有机酸盐或无机酸盐组成的双水相系统，ｂ、通过改变ｐＨ值提高相分配系数，ｃ、通过改变盐的种类和浓度提高 相分配系数，ｄ、于室温下直接从细胞破碎物中提取酶。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：孙万儒，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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