作为融合蛋白的异源抗原的表达系统技术方案

本发明专利技术涉及生物技术和遗传工程领域，更具体地说，本发明专利技术涉及使用重组ＤＮＡ技术经与经菌肽融合在微生物宿主中表达异源蛋白质的方法。本发明专利技术提供一种在大肠杆菌中以融合在多肽表达外源蛋白的方法，以获得高纯度、商用量且适用于人类疫苗制剂的蛋白。为此主要使用衍生自脑膜炎奈瑟氏球菌Ｂ∶４∶Ｐ１．１５Ｐ６４Ｋ抗原头４７个氨基酸的稳定化序列。具体讲，使用了含所述序列、大肠杆菌色氨酸启动子控制下和噬菌体Ｔ４转录终止子的质粒，其中含有供同框克隆编码目的多肽之ＤＮＡ片段的限制位点。本发明专利技术方法可应用于药物工业、诊断系统的开发、疫苗制剂、和任何需要在大肠杆菌中获得高产量融合多肽形式的外源蛋白的情形。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物技术和遗传工程领域，更具体地说，本专利技术涉及使用重组DNA技术经与细菌肽融合在微生物宿主中表达异源蛋白质的方法。现有技术用重组DNA技术在大肠杆菌中产生任何来源的蛋白质的有效性已有广泛说明。为此，尽管由于克隆和表达的各种基因通常需要单个对待，需要新的变体，但已开发了大量载体(Denhardt，D.T.和Colasanti，载体杂志，Butterworths，Stoneham，M，pp.179，1987和Lukacsovich，T.等，生物技术杂志，13，243，1990)。由于可以获得高的表达水平，胞内合成已用于在大肠杆菌中获得异源多肽(Goeddel，D.V，酶学方法，185，3-7，1990)。然而，对宿主蛋白酶的敏感性和表达的蛋白质的毒性之类的因素可以明显降低所说的水平，而不依赖于高效调节序列的使用(Reads，C.A.和Saier，M.H.，细菌学杂志，153，685-692；Gwyn，G.W.，膜蛋白表达系统用户指南，波特兰出版社，伦敦，英国，29-82)。在合适的载体中，与编码宿主细胞中稳定多肽的核酸序列同读框克隆编码兴趣蛋白质的核苷酸序列，导致本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有源于脑膜炎奈瑟氏球菌Ｂ∶４∶Ｐ１．１５的Ｐ６４Ｋ抗原Ｎ－末端头４７个氨基酸的稳定子肽和与其融合的异源蛋白的融合蛋白。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：CA杜阿特卡诺，GE奎伦奈托，A阿尔瓦里茨阿克斯塔，EL卡皮奥莫诺茨，D奎恩塔纳瓦茨奎兹，CE格梅茨罗德里奎茨，RC西尔瓦罗德里奎茨，C纳扎贝尔加尔韦茨，MJ里尔安古洛，AM马蒂恩杜恩，
申请(专利权)人：基因工程和生物技术中心，
类型：发明
国别省市：CU[古巴]