一种猴头菌的培养基、生物转化菌丝体、生物转化菌丝体的提取物及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种猴头菌的培养基、生物转化菌丝体、生物转化菌丝体的提取物及其用途。该猴头菌的培养基是在基础培养基中加入中药女贞子，包括基础培养基和女贞子，每100份培养基中包括基础培养基70～50份，女贞子30～50份；所述基础培养基包括如下重量份的各组分：麦麸490～350份，玉米粉140～100份，谷糠70～50份，水400～500份。该生物转化菌丝体是将猴头菌接入上述培养基经菌丝转化培养所得的产物。该生物转化菌丝体的提取物是将猴头菌丝体经水提后再减压浓缩，最后真空冷冻干燥而制备出来的。该生物转化菌丝体的提取物具有降血糖作用，作用明显优于猴头菌丝体或女贞子的降血糖作用，可用于制备降血糖药物。

【技术实现步骤摘要】
一种猴头菌的培养基、生物转化菌丝体、生物转化菌丝体的提取物及其用途
本专利技术涉及生物制药
，特别涉及一种猴头菌的培养基、生物转化菌丝体、生物转化菌丝体的提取物及其用途。
技术介绍
猴头菌是一种猴头菌科蘑菇(真菌)，在中药用于治疗胃肠道疾病已经超过2000年的历史了，一系列小分子化合物如erinacines，被认为具有神经再生，并且可以透过血脑屏障修复受损神经组织。猴头菌还有抗溃疡，抗炎，抗微生物，免疫调节，提高肝功能，抗衰老，降低血糖和血脂，提高抗缺氧能力，增加心脏输出、和改善备注循环等作用，包含猴头菌的医用制剂在中国广泛使用。猴头菌丝体中的活性物质最重要的是多糖及糖蛋白，目前国内外对猴头多糖的研究表明，猴头菌多糖具有多种生物活性和药理作用，能增强巨噬细胞的吞噬功能，促进溶血素的形成，抗白细胞下降，降血糖、抗凝血、抗血栓、抗突变和抗衰老等。因此，猴头菌多糖备受人们关注，成为近年来分子生物学、医药、食品科学等领域研究和开发应用的热点。《中国药典》记载了猴头菌丝体(参见2015年版一部的第1614-1615页)，本专利技术所述的猴头菌丝体就是该标准记载的猴头菌丝体。当前，从高等真菌及其培养物中进行筛选和发现活性成分，应用于抗肿瘤、抗病毒、和治疗糖尿病等，不仅成为国家重点研究新药的发展方向，也是当今世界各国开发生物医药的热点。但是，目前并未见到中药作为猴头菌的培养基经过生物转化后的新型药用菌丝体应用于降血糖的报道。女贞子(学名：FructusLigustriLucidi)，别名：女贞实、冬青子、蜡树、鼠梓子，为木犀科植物女贞LigustrumlucidumAit.的干燥成熟果实，具有滋阴清热、补肝益肾的功效，常用于腰膝酸软、耳鸣目眩、肝肾阴虚等病证的治疗。味甘苦，性凉，归肝肾经。有滋补肝肾、明目乌发的功效，临床主要用于眩晕耳鸣、腰膝酸软、须发早白、目暗不明等症。女贞子含有多种化学成分，最先发现的是女贞子含有较高含量的齐墩果酸，后又发现了乙酰齐墩果酸、熊果酸等。红景天苷、酪醇、羟基酪醇、齐墩果酸、熊果酸和多糖是其主要活性成分。女贞子具有免疫调节、降血糖、降血脂等作用，其提取物乌苏酸、齐墩果酸有明显的降血糖作用。糖尿病是世界范围的最常见的流行性疾病之一，其死亡率在发达国家仅次于心血管疾病、恶性肿瘤，成为第三位的致死病因疾病。糖尿病的治疗手段目前常采用胰岛素和化学合成降糖药物，但存在多种不良反应和毒副作用。由于该病的并发症会导致较高的死亡率，人们迫切需要找到一种有效低毒的治疗药物。国内外学者开始将寻求新的降血糖药物的目光投向中国传统中医药，中药在治疗糖尿病方面不同于化学合成药物，不仅能发挥良好的降血糖等治疗效果，中药及其有效成分由于本身为天然活性物质，还能够较好的克服西药的缺点，许多中药在治疗糖尿病的同时可以起到防治糖尿病并发症的作用。生物转化“菌丝体”是指利用菌丝体(包括真菌)的代谢功能，使有机物分解的生物化学反应过程。以适宜的培养基为营养，通过菌丝体的生长代谢和生命活动产生丰富的次生代谢产物。借鉴中医药组方思想，将单味中药、具有类似或协同作用的中药作为部分培养基进行菌丝体转化，不同菌株诱变“次生”代谢不同的生物活性成分，再实行“定向培养、双向转化”生物转化工艺，可获得不同生物活性物质原料，目的是增强功效或者降低药物毒副作用。
技术实现思路
本专利技术旨在克服现有技术的不足，跨学科创新，结合微生物学、中药学等多学科，提供一种新原料(女贞子)作为猴头菌的培养基成分，即本专利技术的目的在于提供一种猴头菌的培养基、生物转化菌丝体、生物转化菌丝体的提取物及其用途。所述生物转化菌丝体的提取物的制备方法简单，成本较低，提取物用于制备降血糖药物。基于上述目的，本专利技术的内容包括一种猴头菌的培养基，包括基础培养基和女贞子，每100份的培养基中包括基础培养基70～50份，女贞子30～50份；所述基础培养基包括如下重量份的各组分：麦麸490～350份，玉米粉140～100份，谷糠70～50份，水400～500份。优选地，所述基础培养基包括如下重量份的各组分：麦麸420份，玉米粉120份，谷糠60份，水450份。优选地，每100份的培养基中包括基础培养基60份，女贞子40份；所述基础培养基包括如下重量百分数的各组分：麦麸70％、玉米粉20％、谷糠10％。本专利技术还提供一种生物转化菌丝体，将猴头菌类菌株接种至所述的培养基中，在20～27℃下，培育30～40天，取出菌丝体，烘干，即得生物转化菌丝体。优选地，所述猴头菌类菌株为猴头菌科真菌猴头菌Hericiumerinaceum(Bull.exFr.)Pers。优选地，所述生物转化菌丝体为猴头菌科真菌猴头菌Hericiumerinaceum(Bull.exFr.)Pers.的菌丝体与其附生含有女贞子成份的固体培养基的干燥混合物。本专利技术还提供一种生物转化菌丝体的提取物，所述提取物通过以下步骤制备得到：(1)将所述的生物转化菌丝体进行水提，50-70℃下用水浸泡2-3次，每次浸泡2-5小时，水的重量为生物转化菌丝体重量的6～10倍，得到提取液；(2)将步骤(1)中的提取液减压浓缩，将减压浓缩所得的浓缩液在50-70℃条件下抽真空干燥，即得生物转化菌丝体的提取物。优选地，所述用水浸泡的温度为60℃；将减压浓缩所得的浓缩液在60℃条件下抽真空干燥。本专利技术还提供了一种所述的生物转化菌丝体的提取物在制备降血糖药物中的用途。本专利技术的有益效果有：(1)本专利技术的生物转化菌丝体的提取物采用简单的处理工艺制备得到，其抗肿瘤效果就达到预料不到的技术效果，经生物转化的“菌丝体”的抗肿瘤效果好于所有的天然植物来源的中药材，如果进一步分离纯化富集有效成分，其降血糖效果将更好，可用于制备降血糖药物。(2)猴头菌是一种药用真菌，能很好地吸收培养基中营养，彻底转化培养基，产生新的活性物质及代谢物，为此，本专利技术将中药女贞子加入到猴头菌的基础培养基中，作为猴头菌的培养基成分之一，并对中药材女贞子掺入猴头菌的培养基的比率进行调配，最终选择中药材女贞子最佳掺入的比率为40％，女贞子占40％比率时，菌丝体生长情况较好，齐墩果酸、熊果酸含量较高。(3)猴头菌对女贞子进行中药菌丝体转化，得到新的菌丝体，本专利技术对所得的生物转化菌丝体进行提取，得到的生物转化菌丝体的提取物进行了体外降血糖筛选试验，水提样品以IC50值和Emax为评价指标，试验结果表明：生物转化菌丝体的提取物有良好的降血糖作用，体外降血糖作用由强到弱为：生物转化菌丝体＞女贞子药材＞猴头菌丝体≈猴头菌丝体+女贞子药材，该生物转化菌丝体的提取物降血糖作用明显优于猴头菌丝体或女贞子的降血糖作用，而且生物转化菌丝体的IC50值大于单独女贞子药材和单独猴头菌丝体的IC50值之和，Emax大于单独女贞子药材和单独猴头菌丝体的Emax之和，这说明猴头菌中丰富的酶系通过结构修饰或降解作用，把女贞子中的活性成分转化成活性更强的成分，或增强了女贞子中的活性成分(如齐墩果酸、熊果酸)的产量，或把非活性成分转化成活性成分，活性成分相互促进达到增强降血糖功效的目的；同时进行四氧嘧啶性糖尿病小鼠模型试验，试验结果表明：生物转化菌丝体的提取物对四氧嘧啶性糖尿病小鼠具有明显的降血糖作用，因此，生物转化菌丝体的提本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猴头菌的培养基，其特征在于，包括基础培养基和女贞子，每100份的培养基中包括基础培养基70～50份，女贞子30～50份；所述基础培养基包括如下重量份的各组分：麦麸490～350份，玉米粉140～100份，谷糠70～50份，水400～500份。

【技术特征摘要】
1.一种猴头菌的培养基，其特征在于，包括基础培养基和女贞子，每100份的培养基中包括基础培养基70～50份，女贞子30～50份；所述基础培养基包括如下重量份的各组分：麦麸490～350份，玉米粉140～100份，谷糠70～50份，水400～500份。2.根据权利要求1所述的猴头菌的培养基，其特征在于，所述基础培养基包括如下重量份的各组分：麦麸420份，玉米粉120份，谷糠60份，水450份。3.根据权利要求1所述的猴头菌的培养基，其特征在于，每100份的培养基中包括基础培养基60份，女贞子40份；所述基础培养基包括如下重量百分数的各组分：麦麸70％、玉米粉20％、谷糠10％。4.一种生物转化菌丝体，其特征在于，将猴头菌类菌株接种至如权利要求1-3任一项所述的培养基中，在20～27℃下，培育30～40天，取出菌丝体，烘干，即得生物转化菌丝体。5.根据权利要求4所述的生物转化菌丝体，其特征在于，所述猴头菌类菌株为猴头菌科真菌猴头菌Heric...

【专利技术属性】
技术研发人员：何述金，周代俊，刘东艳，
申请(专利权)人：湖南新汇制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43