一种降解有机磷农药的复合微生物制剂及其制备方法技术

本发明专利技术属于微生物技术领域，公开了一种降解有机磷农药的复合微生物制剂，其由复合菌液和载体按照1:1‑3的质量比制备而得。本发明专利技术复合微生物制剂中各菌种之间合理配伍，共生协调，互不拮抗，活性高，能够有效地处理土壤中有机磷农药残留。

【技术实现步骤摘要】
一种降解有机磷农药的复合微生物制剂及其制备方法
本专利技术属于微生物
，具体涉及一种降解有机磷农药的复合微生物制剂及其制备方法。
技术介绍
化学农药以其见效快、防治光谱、性质稳定、便于运输、价格低廉等优点，在防治农作物病虫草害以消灭卫生害虫、疾病等方面发挥着巨大的作用，促进现代农业的发展。有机磷农药以其品种多、药效高、防治范围广谱等特点，至今仍是农药中用量最多的类别，在农业生产中起到了举足轻重的作用，我国有机磷农药的生产和使用量占农药总生产和使用量的一半以上。但是，有机磷农药具有较强的毒性，长期、大量使用后，其在农作物上的残留会引起食品安全问题，也影响了我国农产品出口，而且散落的农药也会使水和土壤受到污染。目前，农药污染土壤的处理方法有物理化学方法，即通过电流的热效应、电化学反应物、脉冲电流的冲击作用来降低有机化学类农药的浓度和将其化学结构转化为无害的分子结构；微生物降解方法，即通过专性的微生物分解有机类化学农药，或者通过微生物的活动改变土壤的化学和物理性质而间接作用于农药，一般有矿化、共代谢、生物浓缩或积累等间接作用。而物理华学方法在应用上因需电流的辅助作用而易受到限制，应用范围小。微生物降解以其高效、廉价、安全等特点，成为处理各类有机污染物的有效措施。近年来，研究利用降解微生物治理农药残留污染已引起广泛关注。但是，利用微生物实现对农药进行降解，专一性高，往往一种微生物不能同时降解多类农药，而且降解速率慢。污染环境通常是多农药残留并存，因此研究开发能同时降解多类农药的复合微生物制剂具有非常重要的应用价值。但是不同的微生物之间极有可能存在拮抗作用，筛选配伍合理的微生物制剂来有效降解有机磷农药是我们需要解决的技术问题。
技术实现思路
为了克服现有技术的缺陷，本专利技术的目的在于提供了一种降解有机磷农药的复合微生物制剂及其制备方法。本专利技术上述目的通过以下技术方案予以实现：一种降解有机磷农药的复合微生物制剂，其由复合菌液和载体按照1:1-3的质量比制备而得。进一步地，所述复合微生物制剂的制备方法包括如下步骤：将复合菌液添加到1-3倍质量的载体中，200rpm搅拌3min，然后进行低温干燥，干燥温度为20℃，干燥后含水量为6wt％，包装，即得。进一步地，所述载体由木薯渣、秸秆粉以及草炭土按照2:2:1的质量比混匀制得。进一步地，所述复合菌液按照如下步骤制备而得：1）取乙酰甲胺磷200mg，蔗糖30g，糖蜜20g，豆粕20g，(NH4)2SO45g，K2HPO41g，KH2PO41g，MgSO40.5g，FeSO40.1g，CaCl20.1g添加到水中，调pH为6.8，定容至1L，制得驯化培养液；2）将醋酸钙不动杆菌、恶臭假单胞菌、乳酸链球菌、产气肠杆菌以及黑曲霉分别按照常规培养获得1×108CFU/ml的种子液，然后按照4-7:3-5:3-5:2-3:2-3的体积比混合得到混合种子液，再按照6-8%的接种量转到驯化培养液中，30℃培养12h，得到复合菌液。进一步地，所述醋酸钙不动杆菌为ATCC33304，所述恶臭假单胞菌为ATCC31800，所述乳酸链球菌为ATCC11454，所述产气肠杆菌为ATCC35028或CGMCCNo.1969，所述黑曲霉为CCTCCNo.M206034或ATCC6275。本专利技术还要求保护上述复合微生物制剂在降解土壤中有机磷农药的用途。优选地，所述有机磷农药选自乙酰甲胺磷、三唑磷或者甲基对硫磷，以及上述任意二者或者三者的混合物。优选地，所述秸秆粉为玉米秸秆粉、高粱秸秆粉或者水稻秸秆粉。进一步地，上述只是本专利技术的优选方案。作为次优选的技术方案，本专利技术对加入的种子液中菌株的数量也没有特别的限制，这可以根据所述环境需要来决定。本专利技术所述的菌种属于已知菌株，均可以从CGMCC、CCTCC、ATCC等商业途径购买得到。本专利技术的各菌种的种子培养和发酵罐培养为本领域的常规培养方式，不是本专利技术创新点，此处不详述。本专利技术所用的原料或试剂除特别说明之外，均市售可得。与现有技术相比较，本专利技术取得的有益效果主要包括但是并不限于以下几个方面：本专利技术复合微生物制剂中各菌种之间合理配伍，共生协调，互不拮抗，活性高，能够有效地处理土壤中有机磷农药残留；本专利技术利用复合微生物制剂的修复方法操作简单易行，显著降低了用药量、施药次数以及用药成本，成本低，环保无污染，应用前景广阔；本专利技术菌株首先经过驯化培养，使其能够更快速适应环境，提高了降解有机磷农药的效率；本专利技术在制备载体时使用了大量农业废弃物，不仅增强菌株的存活时间及在土壤中的定植能力，对农药也有一定的吸附性，节省了成本，并且还可作为有机质来改良土壤；其中，秸秆可以提供碳源和氮源；木薯渣可以调节土壤的含水量和透气性，草炭土保水通气，可以增加土壤中腐殖酸含量；本专利技术复合菌剂可降解高浓度的有机磷农药残留，降解速度快，48h之内基本实现了完全降解，还具备一定的降解有机氯农药的能力，应用前景广阔。附图说明图1：复合微生物制剂对乙酰甲胺磷、三唑磷以及甲基对硫磷土壤样品的处理。具体实施方式为了使本
的人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合本申请具体实施例，对本申请的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。实施例1一种降解有机磷农药的复合微生物制剂，其由复合菌液和载体按照1:1.5的质量比制备而得；具体地，所述复合微生物制剂的制备方法包括如下步骤：将复合菌液添加到1.5倍质量的载体中，200rpm搅拌3min，然后进行低温干燥，干燥温度为20℃，干燥后含水量为6wt％，包装，即得。所述载体由木薯渣、秸秆粉以及草炭土按照2:2:1的质量比混匀制得；所述复合菌液按照如下步骤制备而得：取乙酰甲胺磷200mg，蔗糖30g，糖蜜20g，豆粕20g，(NH4)2SO45g，K2HPO41g，KH2PO41g，MgSO40.5g，FeSO40.1g，CaCl20.1g添加到水中，调pH为6.8，定容至1L制得驯化培养液；将醋酸钙不动杆菌、恶臭假单胞菌、乳酸链球菌、产气肠杆菌以及黑曲霉分别按照常规培养获得1×108CFU/ml的种子液，然后按照4:3:3:2:2的体积比混合得到混合种子液，再按照8%（体积比）的接种量转到驯化培养液中，30℃培养12h，得到复合菌液。所述醋酸钙不动杆菌为ATCC33304，所述恶臭假单胞菌为ATCC31800，所述乳酸链球菌为ATCC11454，所述产气肠杆菌为ATCC35028，所述黑曲霉为CCTCCNo.M206034。实施例2一种降解有机磷农药的复合微生物制剂，其由复合菌液和载体按照1:2的质量比制备而得；具体地，所述复合微生物制剂的制备方法包括如下步骤：将复合菌液添加到2倍质量的载体中，200rpm搅拌3min，然后进行低温干燥，干燥温度为20℃，干燥后含水量为6wt％，包装，即得。所述载体由木薯渣、秸秆粉以及草炭土按照2:2:1的质量比混匀制得；所述复合菌液按照如下步骤制备而得：取乙酰甲胺磷200mg，蔗糖30g，糖蜜20g，豆粕20g，(NH4)2SO45g，K2H本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种降解有机磷农药的复合微生物制剂，其由复合菌液和载体按照1:1‑3的质量比制备而得。

【技术特征摘要】
1.一种降解有机磷农药的复合微生物制剂，其由复合菌液和载体按照1:1-3的质量比制备而得。2.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述复合微生物制剂的制备方法包括如下步骤：将复合菌液添加到1-3倍质量的载体中，200rpm搅拌3min，然后进行低温干燥，干燥温度为20℃，干燥后含水量为6wt％，包装，即得。3.根据权利要求1或2所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述载体由木薯渣、秸秆粉以及草炭土按照2:2:1的质量比混匀制得。4.根据权利要求1或2所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述复合菌液按照如下步骤制备而得：1）取乙酰甲胺磷200mg，蔗糖30g，糖蜜20g，豆粕20g，(NH4)2SO45g，K2HPO41g，KH2PO41g，MgSO40.5g，FeSO40.1g，CaCl20.1g添加到水中，调pH为6.8，定容至1L，制得驯化培...

【专利技术属性】
技术研发人员：李萍，王国民，朱连军，
申请(专利权)人：李萍，
类型：发明
国别省市：浙江,33