抗白斑症病毒受体的单克隆抗体及其制备方法技术

本发明专利技术是由杂交瘤细胞分泌的抗白斑症病毒受体的单抗Ⅱ，该瘤细胞保藏号：ＣＣＴＣＣ－Ｃ２００４１８，其分泌的单抗Ⅱ具有与对虾血细胞的细胞膜上的该病毒受体特异性结合，从而封闭该受体，阻断该病毒进入细胞，使该病毒不能感染对虾血细胞的功能；该杂交瘤细胞在常规培养２－３天的培养液内显示由桃红色变为黄色，此时该培养液中含有大量该瘤细胞分泌的单抗Ⅱ；经间接免疫荧光方法检测，该单抗Ⅱ与血细胞的细胞膜上的受体特异性结合，在荧光显微镜下观察，血细胞膜呈现黄绿色荧光；经酶联免疫吸附方法检测，酶标仪测ＯＤ值，其ＯＤ值与阴性对照ＯＤ值的比值不小于２。该单抗Ⅱ可大批量工业生产，为预防或治疗对虾白斑症病毒病起积极作用。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抗体的应用技术的改进，具体讲是一种由杂交瘤细胞分泌的抗白斑症病毒(White Spot Syndrome Virus，WSSV)受体的单克隆抗体及其制备方法，其属于分子免疫学和病毒学交叉

技术介绍
目前，白斑症病毒病是对虾养殖中危害严重的疾病之一，引起很高的对虾死亡率，给对虾养殖业造成了巨大的损失。引起该病的白斑症病毒可广泛感染对虾的皮下组织、造血组织、结缔组织、淋巴器官等，血细胞是该病毒侵染的主要靶细胞，因此对虾血细胞上存在白斑症病毒的受体。病毒受体的筛选较多采用病毒重叠蛋白印迹测定(virusoverlay protein blot assay)技术。使用该技术筛选病毒受体的前提条件受体活性必须由单个多肽表达，同时该多肽能够在没有其它细胞膜成分帮助下与病毒结合，并在去垢剂中不失去其活性。但是有些病毒的受体经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、转印后，受体蛋白的空间结构被破坏并且失去了其它细胞膜成分的帮助，丧失了与病毒的结合活性，用病毒重叠蛋白印迹测定技术无法筛选到该类受体。单克隆抗体技术的应用为病毒受体的筛选、鉴别提供了新的技术手段。首先制备出抗细本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种由杂交瘤细胞分泌的抗白斑症病毒受体的单克隆抗体，其特征在于：该杂交瘤细胞的保藏号：ＣＣＴＣＣ－Ｃ２００４１８其分泌的特异性抗白斑症病毒受体的单克隆抗体（以下简称：单抗Ⅱ）具有与对虾血细胞的细胞膜上的白斑症病毒受体特异性结合，从而封闭该受体，阻断病毒进入细胞，使病毒不能感染对虾血细胞的功能；长势良好的该杂交瘤细胞在其培养液内常规培养２－３天，养液即由桃红色转变为黄色，该培养液中含有大量杂交瘤细胞分泌出的单克隆抗体－单抗Ⅱ；经间接免疫荧光方法检测，该单抗Ⅱ与血细胞的细胞膜上的受体特异性结合，在荧光显微镜下观察，血细胞膜呈现明亮的黄绿色荧光，血细胞内的细胞核区域无荧光；经酶联免疫吸附方法检测，酶...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：战文斌，张志栋，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：95[中国|青岛]