【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种骨髓间充质干细胞分离、培养方法，其特征在于它包括：１）原代培养：ａ）取经水囊法引产后死亡的四个月胎儿股骨组织，用Ｄ－Ｈａｎｋ’ｓ液冲洗骨髓腔中的细胞，收集后１２００ｒｐｍ离心７～８分钟；离心后弃上清，用混和培养液Ⅰ吹打细 胞沉淀，使之形成细胞悬液并进行细胞计数；取含有细胞的混合培养液Ⅰ按细胞培养密度１～１．５×１０↑［８］个细胞／瓶接种于细胞培养瓶中，并用混合培养液Ⅰ补足至培养液总量为８～１０ｍｌ，培养两天；ｂ）弃去培养液的一半，再加入４～５ｍｌ新鲜 的混和培养液Ⅰ，置于二氧化碳孵箱继续培养使细胞生长至对数生长期，即完成原代细胞培养；２）传代培养：待细胞生长至对数生长期后，移去原代培养瓶内的细胞培养液，用ＰＢＳ溶液清洗细胞２～３次，然后向培养瓶中加入１～２ｍｌ０．１２５％ （质量体积百分比）的胰蛋白酶酶溶液（含０．１％ＥＤＴＡ），在二氧化碳孵箱中放置２～３分钟，观察，当细胞出现回缩、细胞间隙增大时，吸除胰蛋白酶溶液；加入５～７ｍｌ混和培养液Ⅱ，吹打瓶壁上的细胞，使之形成细胞悬液，经１２００ｒｐｍ离心７～８分钟...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张晓东，叶丽虹，徐治立，赵铁军，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]
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