新生猪胰岛细胞分离、纯化和培养方法技术

本发明专利技术公开了一种新生猪胰岛细胞分离、纯化和培养方法，其方法是从生长２～５天的新生猪供体中无菌剖腹取出胰腺，去除胰腺周边组织，注入消化液，其消化温度是３７～３９℃，消化ｐＨ值是６．０～８．０，其终止消化溶液包括小牛血清和Ｈａｎｋ’ｓ液；接着进行猪胰岛细胞的纯化和７～１０天的细胞培养。通过本发明专利技术可获得供胰岛细胞分化与发育以及异种移植治疗糖尿病研究的猪胰岛供体，可达到通过异种胰岛细胞移植治疗糖尿病的目的，并为猪胰岛供体的产业化及异种胰岛细胞移植治疗技术的推广打下了基础。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种新生猪胰岛细胞分离、纯化和培养方法，依次包括如下步骤：１）分离猪胰岛细胞，从生长２～５天的新生猪体内无菌剖腹取出胰腺，去除胰腺周边组织，注入消化液，其消化温度是３７～３９℃，消化液ＰＨ值是６．０～８．０，加入含有效量小牛血清的冷Ｈａｎｋ’ｓ液终止消化；２）纯化步骤１）得到的猪胰岛细胞，配置比重液，于０．５～１．０ｍｌ的消化清液中，加入０．３～１．０ｍｌ的含有效量小牛血清的冷Ｈａｎｋ’ｓ液，再依次取１０～１５ｍｌ的比重液注入，摇荡混匀，静置３～５ｍｉｎ，低速离心沉淀细胞；３）将步骤２）得到的猪胰岛细胞加培养基进行７～１０天的细胞培养；４）形成猪胰岛细胞团。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：牛申，
申请(专利权)人：牛申，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]