用于治疗HIV感染患者的亚型匹配的灭活全病毒疫苗制造技术

将灭活的特定亚型的全ＨＩＶ用于制备疫苗和含有该疫苗的药物组合物。该疫苗可通过诱导抗用以制备该疫苗的相同ＨＩＶ亚型的保护性细胞免疫应答治疗慢性ＨＩＶ感染个体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于治疗病毒感染的疫苗，尤其是用于治疗人类HIV感染的疫苗。
技术介绍
在发现人类免疫缺陷性病毒(HIV)二十年后，迄今为止还没有可利用的有效的预防性或治疗性疫苗。来自世界卫生组织和联合国艾滋病毒/艾滋病项目的最新预测表明，如果按照目前艾滋病的流行趋势，到2010年将出现4,500万新感染者1。尽管通过抗逆转录病毒治疗在延长HIV感染者的存活时间和减少母婴HIV传播方面取得了重大进展，但在长期抗逆转录病毒治疗的情况下出现药物抗性和/或与药物相关的严重副作用的患者的数目不断增加。因此急需其他的替代治疗策略以保护HIV感染个体使其免于疾病发展。在一个大规模的人类III期试验中，一种用以诱发体液免疫以中和HIV的候选疫苗最近被证明是无效的2。这种保护作用的缺乏与已知的现有疫苗不能在体内诱发有效的抗HIV中和抗体(Nab)是一致的3。这种诱发有效的Nab的能力的缺失可能是由感染原的性质决定的。例如，迄今为止还没有用于慢性感染(例如结核、麻风和丙型肝炎病毒感染)的成功的预防性疫苗。相反，成功的疫苗可以通过诱导Nab预防急性传染病(例如脊髓灰质炎、麻疹、白喉、破伤风或天花)，其中Nab也可经胎盘或经乳汁传递以保护胎儿或新生儿免遭感染。众所皆知，持久性细胞免疫可潜在地控制处于感染原未被清除的状态的疾病，例如结核、麻风、乙型或丙型肝炎病毒和HIV慢性感染。在这点上，已表明强烈的病毒特异性CD4+辅助性T细胞1(Th1)和效应物(穿孔素+)细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答与慢性HIV-1感染个体中病毒血症的控制和长期不进展有关4-10。此外，在急性感染期或急性感染后不久采用高活性抗逆转录病毒治疗(HAART)早期介入可增强HIV-1特异性CD4+Th1细胞应答11，12。相反，HAART在之后的阶段导致HIV-1特异性CD4+Th1细胞和CTL应答的降低5，13，14，这表明捕获HIV-1的抗原呈递细胞(APC)的功能活性(这是诱导免疫应答必需的)随感染进程逐渐丧失15-18。由此可见，用于诱发HIV特异性持久性细胞免疫应答的治疗性疫苗在以下两个先决条件下是可行的1)发现能够诱发强烈、广泛和持续的保护性细胞免疫的合适的免疫原；和2)通过离体激活的APC的过继转移(即，替代策略)，或通过所述免疫原与合适的细胞因子或佐剂同时联用在体内直接激活损伤较小的树突细胞(例如郎格汉斯细胞)，重建体内损伤的APC的功能。成功的治疗性疫苗的最终目标是持续地将HIV-1感染患者的病毒载量降低至尽可能低的水平。这将阻止他们的疾病进展，并因此可以减少对有害的和昂贵的抗逆转录病毒药物的需求。此外，持续地降低HIV病毒载量可以将该病毒性传播给健康人的风险降至最小19。根据免疫原的性质，疫苗诱导的保护性免疫应答可以完全不同。减毒活疫苗诱发体液和细胞免疫应答，而灭活病毒疫苗和纯化的合成蛋白质更倾向于诱发体液(抗体)应答。在一个旨在激发免疫系统的细胞免疫方面的多中心临床试验中，研究人员失望地发现，用含HIV基因的细菌DNA制备的实验性疫苗免疫的205个志愿者中，只有20％具有显著的HIV特异性细胞免疫应答(尽管该DNA初始免疫(DNA prime)在小鼠实验中确实表现良好)20。本申请专利技术人(以及其他人)最近发现其中保留了包膜蛋白gp120的构象结构的灭活的全HIV-1(例如在通过Aldrithiol-2处理病毒的情形)可被树突细胞(DC，最有效的APC)加工和呈递，用于体外诱导有效的HLA-I限制性CTL应答21，22。几项研究还证明灭活的全HIV-1体外负载的自体树突细胞的过继转移能够在hu-PBL-SCID小鼠中诱导保护性抗病毒免疫23，24。本申请专利技术人先前已证明在没有任何其他抗病毒治疗的情况下，由灭活的全猿猴免疫缺陷性病毒(SIV)株mac251(SIVmac251)负载的树突细胞制备的治疗性疫苗对已感染SIVmac251的中国恒河猴免疫两个月后，可导致显著的病毒抑制25。综上所述，这些发现表明AT灭活的全病毒可用作有效的疫苗免疫原，在慢性HIV-1感染人群中诱发保护性HIV-1特异性CTL应答。但是，HIV-1在全球范围的广泛的变异性表明将GMP级的灭活全病毒制品用作HIV-1的通用型治疗性疫苗的观念是行不通的。专利技术概述本专利技术提供一种疫苗，其包含灭活的特定亚型的灭活的全HIV，任选地还包含佐剂。该疫苗可通过诱导抗用以制备该疫苗的相同HIV亚型的保护性细胞免疫应答治疗慢性HIV感染个体。本专利技术还提供一种药物组合物，其包含疫苗和药学上可接受的载体的，所述疫苗包含灭活的特定亚型的全HIV。本专利技术还提供灭活的特定亚型的全HIV在制备用于治疗慢性HIV感染个体的药物中的用途。所述药物可通过诱导抗用以制备该疫苗的相同HIV亚型的保护性细胞免疫应答治疗慢性HIV感染个体。本专利技术还提供一种治疗慢性HIV感染个体的方法，包括给个体施用包含灭活的特定亚型的全HIV的疫苗，任选地还包括施用一种佐剂，以在该个体中诱导抗用以制备该疫苗的相同HIV亚型的保护性细胞免疫应答。在一个实施方式中，灭活的HIV被离体负载于抗原呈递免疫细胞(APC)，然后将其施用给个体。附图说明图1显示本专利技术疫苗的细胞毒性T-淋巴细胞(CTL)的杀伤活性。图2显示用AT-2灭活的SIVmac251皮内免疫对慢性SIVmac251感染的恒河猴的血浆病毒载量的影响。数据表示免疫前后每毫升血浆中SIVRNA拷贝数的几何平均数。P值代表Wilcoxon检验对免疫前、和免疫后第3或第6个月的配对数据的统计分析。专利技术详述由于HIV基因组经常发生突变，存在两个主要的HIV群(HIV-1和HIV-2)和许多亚群。群和亚群间的主要区别在于病毒包膜。HIV-1被分入主要亚群(M)和第十局外亚群(10thoutlier subgroup)(O)，其中M亚群被分为9个亚型(分化单位)，命名为A到J28-29。HIV基因组中出现的遗传变异是突变、重组、插入和缺失的结果29。本专利技术的抗HIV、优选地抗HIV-1亚型(例如亚型A、B、C或E)的疫苗显示出对亚型匹配的病毒株具有高CTL杀伤活性，但只显示出低的亚型间杀伤活性。尽管在个别情况中观察到了亚型间杀伤活性，但与亚型匹配的病毒株相比，在亚型不匹配的病毒株中CTL杀伤效力差异很大(参见下面实施例1和图1)。因此，本专利技术提供了由灭活的特定亚型的全HIV制品制备的抗HIV的亚型特异性治疗性疫苗。本专利技术的疫苗可用于治疗慢性HIV感染个体，其中所述疫苗诱导抗用以制备该疫苗的相同HIV亚型的保护性细胞免疫应答。本申请所用术语“疫苗”指被施用以产生或者人为增加对特殊疾病的免疫性的组合物。优选地，用不是受治疗个体自体的HIV亚型制备疫苗。事实上，专利技术人已证明，不是受治疗个体自体的HIV亚型疫苗能够出乎意料地显著降低所述个体的病毒载量。根据本专利技术，可以治疗任何HIV亚型的慢性感染，例如选自M群的A、B、C或E(和其他)亚型以及HIV-2群和HIV O亚群的HIV病毒的慢性感染。在一个实施方式中，本专利技术的组合物可包含几种灭活的HIV亚型，例如两种、三种、四种或更多种不同的灭活HIV亚型。在本申请中，“治疗”慢性HIV感染个体意指预防、减轻或抑制HIV感染的症本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种组合物，其包含灭活的特定亚型的全ＨＩＶ。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：J安德里厄，L魏卢，
申请(专利权)人：拜欧瓦克西姆有限公司，
类型：发明
国别省市：GB[英国]