一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂，按质量百分比由以下原料的有效组分组成：泊洛沙姆为25～36％，U0126为8～12％，冻干保护剂为50‑70％，以上各组分的质量百分比之和为100％，本发明专利技术还公开了一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法，利用能够与水任意比例混溶的二甲基亚砜将U0126与包裹材料泊洛沙姆共同溶，之后通过超声处理使其直接生理盐水中获得稳定的纳米药载颗粒分散液，之后除去分散液中的二甲基亚砜和可溶性杂质，然后加入保护剂，最后通过冷冻干燥法将溶液中的水分去除，从而获得纳米制剂干粉，本发明专利技术解决了现有技术中存在的纳米制剂粒径达不到要求且载药性能比较差的问题。

A nanoscale preparation for the treatment of coronary artery spasm and its preparation

The invention discloses a method for preparation of nano coronary artery spasm treatment, according to the mass percentage of effective group consists of the following raw material composition: Bo Losham for 25 ~ 36%, 8 ~ 12% U0126, cryoprotector 50 70% mass percent of each component is the sum of the 100%, the invention also discloses a method for preparing nano preparation for treatment of coronary artery spasm, using any ratio with water mixed with two DMSO soluble U0126 and soluble material package Bo Losham, after the drug loaded nano particle dispersion stability of direct saline by ultrasonic treatment, after removing the dispersion the two dimethyl sulfoxide and soluble impurities, and then adding protective agent, the solution of water removal by freeze drying method, so as to obtain the preparation of nanometer powder, the invention solves The particle size of the nanoscale agent in the technology can not meet the requirement and the drug carrying performance is poor.

【技术实现步骤摘要】
一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂及其制备方法
本专利技术属于纳米生物
，具体涉及一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂，本专利技术还涉及用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法。
技术介绍
冠状动脉痉挛(coronaryarteryspasm，CAS)是多种缺血性心脏病的共同病理基础，可导致心绞痛、心律失常、心肌梗死及猝死等严重后果。其临床治疗上以药物缓解为主，无法“治本”，还会产生耐药等问题。纠正血管平滑肌细胞高反应性，使其恢复正常的功能是有效控制冠状动脉痉挛发生的关键。细胞外信号调节激酶1和2(ERK1/2)通路的激活，可介导内皮素受体表达上调，是引起血管平滑肌高反应性重要因素。U0126是ERK1/2通路的高效抑制剂，研究发现其具有非常好的抗动脉血管收缩效果。但该小分子化合物几乎不溶于水，导致其生物利用度低，此外还存在较大的毒副作用，会对其他脏器造成损伤。经过数十年的探索和发展，纳米材料和技术取得了长足的进步，进入临床试验和应用的纳米药物载体不断增多，根据统计，经美国FDA批准上市的纳米药物就已超过20种，还有150余种纳米药物和纳米载体系统处于临床或商业化发展阶段。纳米药物载体可有效增加非水溶性化合物在水溶液中的分散度，一方面可提高其体内稳定性，增加生物利用度，还可降低毒副作用的发生。两亲性材料可通过自组装形成核壳式结构的纳米胶束，内核是疏水性超微结构，疏水性药物可被牢固的包裹在其中，而外壳则是由亲水骨架而构成，使得整个体系具有非常好的水溶液分散度。泊洛沙姆(Poloxamer)为聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，是一种非离子型两亲性高分子化合物，具有非常好的生物相容性，是已被批准的常规药物辅料，可用于多种剂型的制备，尤其适用于各种难溶性药物或化合物的药剂制备。泊洛沙姆用于药物载体的专利已有报道，有部分方法将其制备成水凝胶，如专利号：CN105596367A，CN104903373A及CN102989036A等；也有将其制备成油质注射剂的作法，如CN103705454A，CN103705455A和CN103768014A等。研究发现U0126是非常具有潜力的抗冠状动脉痉挛治疗分子。然而，U0126水溶性极差，且ERK1/2通路与很多正常生理功能有关，完全抑制后会产生毒副作用，单独使用U0126存在一定局限性。可通过泊洛沙姆所制备的纳米药物而解决。虽然泊洛沙姆可用于非水溶性药物的包裹，但是需要保证所制备的载药颗粒在体内能循环保持一定的稳定性，且能缓慢有效的释放包裹药物分子，还要具备长期保存能力。要同时满足上述条件十分困难，其他相关技术方法无法直接起到参考作用。例如，申请人前期公开了一种棉酚纳米制剂的制备方法(公开号：CN104523606A)，但是更换药物之后所制备的纳米药物颗粒完全无法达到理想粒径，且载药性能也比较差，无法用于进一步应用。所以需要在新的构建工艺中结合实际经验不断探索测试，对关键节点进行优化和变革。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂，解决了现有技术中存在的纳米制剂粒径达不到要求且载药性能比较差的问题。本专利技术的另一目的是提供一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法。本专利技术所采用的第一技术方案是，一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂，按质量百分比由以下原料的有效组分组成：泊洛沙姆为25～36％，U0126为8～12％，冻干保护剂为50-70％，以上各组分的质量百分比之和为100％。本专利技术第一技术方案的特点还在于，泊洛沙姆规格为118、237、338、407中的一种。冻干保护剂包括甘露醇、羟乙基淀粉中的一种或者两种的混合物。本专利技术所采用的第二技术方案是，一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法，具体按照以下步骤实施：步骤1、称量原料：按质量百分比称取泊洛沙姆25～36％，U0126为8～12％，冻干保护剂50-70％，以上各组分的质量百分比之和为100％；步骤2、将U0126和泊洛沙姆按照比例1:3混合，再将混合物与二甲基亚砜按照10mg:1ml的比例进行混合，并过滤除去杂质，制成混合溶液；步骤3、将步骤2得到的U0126和泊洛沙姆的混合溶液缓慢加入到10倍体积的生理盐水内，期间液体保持分层，之后对整个液体体系进行超声处理，处理过程中一直保持冰浴，获得纳米药载颗粒分散液；步骤4、将纳米药载颗粒分散液进行透析，除去分散液中的二甲基亚砜溶剂和其他可溶性杂质；步骤5、将称取的冻干保护剂，缓慢加入快速搅拌状态下的纳米药载颗粒分散液中，待完全溶解之后除去其他非可溶性杂质及微生物，使用生理盐水定容，获得U0126浓度为0.1mg/ml的纳米制剂溶液；步骤6、将纳米制剂溶液等量分装，然后预冻、干燥、去除水分获得最终纳米制剂干粉。本专利技术第二技术方案的特点还在于，步骤2中过滤时用孔径为0.22微米的脂溶性滤膜进行过滤。步骤3中对整个液体体系进行超声处理利用探头式超声破碎仪，功率为400～800W，每次循环超声处理时间6～8秒，间隔时间3～4秒，总循环数100～120次。步骤4中透析具体为：将纳米药载颗粒分散液装入截留分子量为3.5kDa的透析袋内，以生理盐水为外液，透析时间为12～24小时，期间更换外液3～5次。步骤5中纳米药载颗粒分散液的搅拌速度为200～400r/min。步骤5中除去其他非可溶性杂质及微生物利用孔径为0.22微米的无菌水溶性滤膜去除。步骤6中预冻是在-70至-80℃超低温度下进行，预冻时间为12～24小时，干燥利用冷冻干燥机，控制压力低于0.1帕斯卡。本专利技术的有益效果是，一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂，粒径小于100纳米，包裹效率高，稳定性好，具有缓释效果等优势，能有效保证药物在体内的长效循环，可显著降低用药剂量，用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法，直接通过自组织工艺在水环境下构建中可高度分散的U0126纳米制剂，所建立的工艺体系简单实用，各步骤均可进行精密的质量控制，获得的纳米药载颗粒具有非常高的包裹率和载药量，冻干后的制剂干粉可以稳定存放一年以上。附图说明图1是本专利技术一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法的流程示意图；图2是本专利技术一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法中实施例1所制备泊洛沙姆包裹U0126纳米制剂分散度情况比较图；图3是本专利技术一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法中实施例1泊洛沙姆包裹U0126纳米制剂重溶后透射电子显微镜照片；图4是本专利技术一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法中实施例1泊洛沙姆包裹U0126纳米制剂重溶后粒径分析结果图；图5是本专利技术一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法中实施例1所制备泊洛沙姆包裹U0126纳米制剂溶液粒径稳定性测试结果图；图6是本专利技术一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法中实施例1所制备泊洛沙姆包裹U0126纳米制剂溶液体外释放结果图；图7(a)～图7(b)是本专利技术一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法中实施例1所制备U0126纳米制剂体外抗血管收缩对影响的实验结果对比图；图8(a)～图8(b)是本专利技术一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法中实施例1制备的U0126纳米制剂对高血压大鼠模型干预实验结果对比图。具体实施方式下面结合附本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂，其特征在于，按质量百分比由以下原料的有效组分组成：泊洛沙姆为25～36％，U0126为8～12％，冻干保护剂为50‑70％，以上各组分的质量百分比之和为100％。

【技术特征摘要】
1.一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂，其特征在于，按质量百分比由以下原料的有效组分组成：泊洛沙姆为25～36％，U0126为8～12％，冻干保护剂为50-70％，以上各组分的质量百分比之和为100％。2.根据权利要求1所述的一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂，其特征在于，所述泊洛沙姆规格为118、237、338、407中的一种。3.根据权利要求1所述的一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂，其特征在于，所述冻干保护剂包括甘露醇、羟乙基淀粉中的一种或者两种的混合物。4.一种用于冠状动脉痉挛治疗的纳米制剂的制备方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：步骤1、称量原料：按质量百分比称取泊洛沙姆25～36％，U0126为8～12％，冻干保护剂50-70％，以上各组分的质量百分比之和为100％；步骤2、将U0126和泊洛沙姆按照比例1:3混合，再将混合物与二甲基亚砜按照10mg:1ml的比例进行混合，并过滤除去杂质，制成混合溶液；步骤3、将步骤2得到的U0126和泊洛沙姆的混合溶液缓慢加入到10倍体积的生理盐水内，期间液体保持分层，之后对整个液体体系进行超声处理，处理过程中一直保持冰浴，获得纳米药载颗粒分散液；步骤4、将纳米药载颗粒分散液进行透析，除去分散液中的二甲基亚砜溶剂和其他可溶性杂质；步骤5、将称取的冻干保护剂，缓慢加入快速搅拌状态下的纳米药载颗粒分散液中，待完全溶解之后除去其他非可溶性杂质及微生物，使用生理盐水定容，获得U0126浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：李科，徐仓宝，陈玉龙，张亚萍，杨颖，贾敏，岳波，
申请(专利权)人：西安医学院，
类型：发明
国别省市：陕西,61