一种用于乙型肝炎病毒检测的核酸序列及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种用于检测乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)的核酸序列及试剂盒，属于分子诊断技术领域。本发明专利技术提供的检测HBV的引物及探针能特异地扩增并检测A‑I 9个HBV基因型的病毒DNA。本发明专利技术还公开了用于检测乙型肝炎病毒的试剂盒，能实现快速、灵敏、准确的检测HBV病毒各种亚型的准确拷贝数。本发明专利技术具有操作简便、特异性强、敏感性高、成本低廉及高通量等优点，可用于临床HBV病毒DNA的快速超敏检测，为临床慢性乙型肝炎(Chronic Hepatitis B,CHB)的诊断和治疗提供参考依据。

【技术实现步骤摘要】
一种用于乙型肝炎病毒检测的核酸序列及试剂盒
本专利技术属于分子诊断
，具体涉及一种用于乙型肝炎病毒检测的核酸序列及试剂盒。
技术介绍
乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus，简称乙肝病毒或HBV)是一种DNA病毒，属于嗜肝DNA病毒科(hepadnaviridae)。根据目前所知，HBV就只对人和猩猩有易感性，引发乙型病毒性肝炎疾病。慢性乙型肝炎(ChronicHepatitisB,CHB)是由于HBV在人肝细胞中慢性感染所致的一种肝脏炎症疾病，并可引起多器官损害的一种疾病。主要侵犯儿童及青壮年，其持续进展可导致肝硬化、肝功能衰竭及肝癌。CHB广泛流行于世界各国，据估计，全球有超过2.4亿人慢性感染乙型肝炎(乙肝表面抗原阳性持续至少6个月)。每年有超过68.6万人死于乙型肝炎并发症，包括肝硬化和肝癌。乙型肝炎是影响卫生工作者的一大职业危害。因此，它已成为严重威胁人类健康的世界性疾病，也是我国当前流行最为广泛、危害性最严重的一种疾病。乙型病毒性肝炎无一定的流行期，一年四季均可发病，但多属散发。近年来乙肝发病率呈明显增高的趋势。中国HBV感染人数超过7亿，其中有约1.2亿携带本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于乙型肝炎病毒检测的核酸序列，其特征在于，包括用于特异检测A‑I 9个基因型的HBV病毒DNA的两重引物和探针，具体包括如下：(1)扩增HBV病毒各基因型的引物序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～4所示；(2)扩增HBV病毒各基因型的探针序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示；(3)扩增人内参基因ERG基因的引物序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：6～7所示；(4)扩增人内参基因ERG基因的探针序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示；其中，HBV探针SEQ ID NO：5序列的5’端标记FAM荧光基团，3’端标记MGB淬灭基团，人ERG基因探针SEQ ID N...

【技术特征摘要】
1.一种用于乙型肝炎病毒检测的核酸序列，其特征在于，包括用于特异检测A-I9个基因型的HBV病毒DNA的两重引物和探针，具体包括如下：(1)扩增HBV病毒各基因型的引物序列，其核苷酸序列如SEQIDNO：1～4所示；(2)扩增HBV病毒各基因型的探针序列，其核苷酸序列如SEQIDNO：5所示；(3)扩增人内参基因ERG基因的引物序列，其核苷酸序列如SEQIDNO：6～7所示；(4)扩增人内参基因ERG基因的探针序列，其核苷酸序列如SEQIDNO：8所示；其中，HBV探针SEQIDNO：5序列的5’端标记FAM荧光基团，3’端标记MGB淬灭基团，人ERG基因探针SEQIDNO：8序列的5’端标记VIC荧光基团，3’端标记MGB淬灭基团，上述8条核酸序列在一次检测中共同使用。2.一种用于乙型肝炎病毒检测的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括如下试剂：(1)2*supermix：该PCR反应液中含有DNA聚合酶、Mg2+、PCR反应缓冲液、dATP、dCTP、dTTP和dGTP等；(2)引物探针预混合液：将SEQIDNO：1～8所示的引物及探针各自用双蒸水溶解，每条引物的浓度为100μM，每条探针的浓度为10μM；1～8各核酸序列的母液以9:9:9:9:25:9:9:25的比例混合。(3)阳性对照：含有HBVC基因型质粒和人ERG基因质...

【专利技术属性】
技术研发人员：任绪义，虞闰六，罗英，宣文静，
申请(专利权)人：杭州迪安医学检验中心有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33