The invention relates to a nitrile hydratase producing strain and strain for the production of p-hydroxyphenylacetamide method, belongs to the field of biotechnology, the classification of strains named Agassiz Bacillus Jn 102, in September 26, 2017 China preserved in general microbiological culture collection center for the preservation, the preservation number is CGMCC No.14668. Jn Agassiz Bacillus producing nitrile hydratase 102 provided by the invention has good genetic stability, low culture cost, nitrile hydratase activity has high applicable substrate spectrum is wide, can directly use the strain into the direct synthesis of p-hydroxyphenylacet amide p-hydroxyphenylacetonitrile, catalytic synthesis without adding surfactant and organic solvent through the membrane, avoid introducing exogenous impurities, is conducive to the extraction and separation operation, has the advantages of industrial application.
【技术实现步骤摘要】
一株产腈水合酶的菌株及用于生产对羟基苯乙酰胺的方法
本专利技术属于生物
,特别涉及一株生产腈水合酶的菌株,以及利用该菌株生产的腈水合酶催化制备对羟基苯乙酰胺的方法。
技术介绍
腈是一类重要的化合物,它广泛存在于自然界的植物中,它的水解反应被广泛应用于氨基酸、酰胺、羧酸及其衍生物的合成,在有机合成中占有极其重要的地位。腈水解的方法主要有化学水解法和生物转化法。腈的化学水解因其需要强酸或强碱、高温、高压等反应条件,而且副产物多、产量低、环境污染严重,而大大地限制了它在工业上的应用。相反,生物转化法具有条件温和、环境污染小,并能实现化学选择性、区域选择性和对映选择性等优点。生物转化法涉及的酶系主要有腈水合酶、酰胺酶和腈水解酶。腈水合酶(Nitrilehydratase)是由α-亚基和β-亚基构成的多亚基金属酶,可以催化腈类物质转化成相应的酰胺类物质,在有机合成工业具有较大的应用潜力。腈水合酶广泛存在于微生物群体内,在红球菌(Rhodococcus)、假单胞菌(Pseudomonas)、假诺卡氏菌(Pseudonocardia)、节杆菌(Arthrobacter)、芽孢杆菌(Bacillus)、棒杆菌(Corynebacterium)及短杆菌(Brevibacterium)等微生物中均有发现,研究较为广泛。Nitto公司先后分别用产NHase的微生物菌株Rhodococcussp.N-771、PseudomonaschlororaphisB23、RhodococcusrhodochrousJ1来生产丙烯酰胺,其产量不断提高。但在生产过程中,微生物NHase受 ...
【技术保护点】
一株产腈水合酶的菌株,其特征在于所述菌株保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏日期为2017年9月26日,分类命名为阿氏芽孢杆菌Jn‑102,保藏编号为:CGMCC No.14668。
【技术特征摘要】
1.一株产腈水合酶的菌株,其特征在于所述菌株保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏日期为2017年9月26日,分类命名为阿氏芽孢杆菌Jn-102,保藏编号为:CGMCCNo.14668。2.根据权利要求1所述的菌株,其特征在于所述菌株的16SrRNA基因序列如SEQ.NO.1。3.利用权利要求1所述菌株发酵生产的腈水合酶催化制备对羟基苯乙酰胺的方法如下:1)菌株活化:挑取菌种划线接种至固体保藏培养基,于恒温培养箱28~30℃培养14~20h;2)液体种子制备:挑取活化菌株接种于装有种子培养基的容器中,纱布封口,于26-37℃,160~200r/min摇床振荡培养12~24h,得液体种子;3)液体发酵:按体积比5~10%接种量向发酵培养基接入步骤2)制备的液体种子,转速200~700r/min,溶氧控制20~50%,pH7.0~7.5,温度26~37℃,通气培养24~48h,得到腈水合酶的发酵液,8000r/min离心20min收集菌体细胞;4)催化制备对羟基苯乙酰胺:将...
【专利技术属性】
技术研发人员:王东阳,冯志彬,张娟,刘树立,
申请(专利权)人:山东阳成生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:山东,37
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