一种硝酸盐依赖亚铁氧化菌群富集培养基及制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种硝酸盐依赖亚铁氧化菌群富集培养基及制备方法和应用，它由一定比例的氯化钙、氯化钾、氯化镁、氯化铵、磷酸二氢钾、乙酸钠、SL‑10、哌嗪‑1,4‑二乙磺酸、硫酸亚铁、硝酸钠、维生素B1组成，步骤是：（1）培养基的配置：A液；B液；C液；（2）培养基的灭菌：A液和C液的灭菌方法为：无菌条件下用聚醚砜膜进行抽滤除菌，备用；（3）B液的灭菌，依次将灭菌后的A液、B液和C液倒入培养瓶中分装，获得无菌培养液。经三代及以上富集传代培养，高通量测序后获得的微生物遗传信息具有通量高、专一性强，摒除了传统筛选培养方法的不足，全面准确地揭示了土壤、沉积物和地下水等环境中硝酸盐依赖性亚铁氧化菌群信息。

Enrichment medium and preparation methods and applications of a nitrate dependent ferrous oxidizing bacteria group

The invention discloses a nitrate dependent ferrous oxidizing bacteria enrichment culture medium and preparation method and application, which is composed of a certain proportion of the calcium chloride, potassium chloride, magnesium chloride, ammonium chloride, potassium dihydrogen phosphate, sodium acetate, SL 10, 1,4 piperazine two ethylene sulfonic acid, ferrous sulfate, sodium nitrate, vitamin B1 which steps are: (1) medium configuration: A solution; B solution; C solution; (2) sterilization medium sterilization method: A solution and C solution for PES membrane filtration sterilization, sterile conditions for standby; (3) sterilization of B liquid, followed by A solution, B solution and C solution after sterilization poured into the flask filling, obtaining sterile culture medium. By the three generation and enrichment subculture, microbial obtain high-throughput sequencing of genetic information with high flux and high specificity, the exclusion of the traditional screening culture method, comprehensively and accurately reveal the nitrate in soil, sediment and groundwater environment dependent ferrous oxidizing bacteria information.

【技术实现步骤摘要】
一种硝酸盐依赖亚铁氧化菌群富集培养基及制备方法和应用
：本专利技术涉及土壤生态环境领域，更具体涉及一种硝酸盐依赖亚铁氧化菌群富集培养基，还涉及可用于沉积物、水体中硝酸盐依赖亚铁氧化菌群富集培养基的制备方法，还涉及一种硝酸盐依赖亚铁氧化菌群富集培养基的用途。
技术介绍
铁是地壳中的第四大元素，也是土壤中活泼的变价元素。铁氧化物的存在对土壤、沉积物等环境中的微生物参与生物地球化学循环过程具有着重要影响。厌氧条件下，土壤铁氧化可为某些化能自养型(Chemolithotrophic)微生物提供电子供体；同样在厌氧环境下，甲酸根、乙酸根、丙酸根等短链脂肪酸可被铁还原菌氧化，而铁氧化物再次被还原。此外，土壤铁循环还与土壤中N和S等矿质元素循环以及污染物迁移密切相关。硝酸盐依赖型铁氧化细菌是目前已知的几种铁氧化细菌中最为重要的一类功能微生物，在农田C、N循环过程中扮演着重要角色；该类微生物能在厌氧条件下利用硝酸根为电子受体，同时将土壤中的二价铁氧化；厌氧铁氧化与土壤氮循环中的反硝化、厌氧氨氧化和硝酸盐还原等过程密切相关，直接影响到作物对土壤氮素的利用以及土壤氧化亚氮(N2O)等温室气体的排放效应。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于富集培养土壤中硝酸盐依赖亚铁氧化菌群培养基，其特征在于，它由以下重量份的原料制成1L培养液：原料                         重量份氯化钙                       0.2－1.0 mM氯化钾                       0.06－0.3 mM氯化镁                       0.2－1.0 mM氯化铵                       0.5－2.0 mM磷酸二氢钾                   0.05－0.2 mM乙酸钠                       0.5－10.0 mM微量元...

【技术特征摘要】
1.一种用于富集培养土壤中硝酸盐依赖亚铁氧化菌群培养基，其特征在于，它由以下重量份的原料制成1L培养液：原料重量份氯化钙0.2－1.0mM氯化钾0.06－0.3mM氯化镁0.2－1.0mM氯化铵0.5－2.0mM磷酸二氢钾0.05－0.2mM乙酸钠0.5－10.0mM微量元素溶液1－5ml哌嗪-1,4-二乙磺酸2.0－10.0mM硫酸亚铁5.0－20.0mM硝酸钠5.0－20.0mM维生素B1溶液2.0－10.0mlpH6.8－7.2，所述的微量元素溶液，它由以下成分构成：四水氯化亚铁1.5g，7.7M盐酸10ml，六水氯化钴0.006g，四水氯化锰0.036g，氯化锌0.024g，硼酸0.002g，二水钼酸钠0.19g，六水氯化镍0.1g，二水氯化铜0.07g，去离子水定容至1L，调pH6.0；所述的维生素B1溶液为维生素B1配制成含量为1.0%的母液。2.根据权利要求1所述的一种用于富集培养土壤中硝酸盐依赖亚铁氧化菌群培养基，其特征在于：原料重量份氯化钙0.3－0.9mM氯化钾0.08－0.3mM氯化镁0.3－0.8mM氯化铵0.6－1.8mM磷酸二氢钾0.06－0.18mM乙酸钠2.0－8.0mM微量元素溶液1.5－4.5ml哌嗪-1,4-二乙磺酸3.0－9.0mM硫酸亚铁6.0－16.0mM硝酸钠8.0－18.0mM维生素B1溶液3.0－9.0mL。3.根据权利要求1所述的一种用于富集培养土壤中硝酸盐依赖亚铁氧化菌群培养基，其特征在于：原料重量份氯化钙0.4－0.8mM氯化钾0.1－0.3mM氯化镁0.4－0.7mM氯化铵0.8－1.6mM磷酸二氢钾0.08－0.16mM乙酸钠3.0－7.0mM微量元素溶液2.0－4.0ml哌嗪-1,4-二乙磺酸4.0－8.0mM硫酸亚铁7.0－14.0mM硝酸钠9.0－16.0mM维生素B1溶液4.0－8.0mlpH6.8－7.2。4.根据权利要求1所述的一种用于富集培养土壤中硝酸盐依赖亚铁氧化菌群培养基，其特征在于：原料重量份氯化钙0.5－0.7mM氯化钾0.15－0.25mM氯化镁0.45－0.65mM氯化铵0.9－1.5mM磷酸二氢钾0.1－0.15mM乙酸钠4.0－6.0mM微量元素溶液2.5－3.5ml哌嗪-1,4-二乙磺酸5.0－7.0mM硫酸亚铁8.0－12.0mM硝酸钠10.0－14.0mM维生素B1溶液5.0－7.0mlpH6.8－7.2。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭其安，胡荣桂，伍玉鹏，陈凌玉，赵晖，王布匀，
申请(专利权)人：武汉纺织大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42