一种药食真菌菌丝多糖多肽免疫增强剂的制备方法技术

一种药食真菌菌丝多糖多肽免疫增强剂的制备方法，该方法包括菌丝多糖多肽的物理方法与酶解相结合的高效提取、乙醇沉淀分离、左旋咪唑和高浓度乙醇分别沉淀纯化、复合免疫增强注射剂的配伍制剂等步骤。可与疫苗混合或配合注射剂提高动物免疫，生产效率高，相对生产成本低。本发明专利技术开发的松乳菇菌丝多糖基于其组成单糖较简单，可以进一步分解制备稀有功能性单糖，工艺简单。

Preparation of a drug - eating fungal mycelial polysaccharide polypeptide immunization agent

Preparation method of reinforced agent is a kind of edible and medicinal fungi mycelium polysaccharide peptide and enzyme physical immunity, this method including the mycelia polysaccharide peptide solution extraction, ethanol precipitation separation, combination of levamisole and high concentration ethanol precipitation and purification, respectively enhanced compatibility preparation steps such as injection of immune complexes. It can be mixed with vaccines or combined with injections to improve animal immunity, with high production efficiency and relatively low production cost. The mycelium polysaccharide of Lactobacillus Pleurotus developed by the invention is simple, and can be further decomposed and prepared to prepare rare functional monosaccharides.

【技术实现步骤摘要】
一种药食真菌菌丝多糖多肽免疫增强剂的制备方法
本专利技术涉及一种药食真菌菌丝多糖多肽免疫增强剂的制备方法。
技术介绍
食药真菌功能物质：食药真菌中富含蛋白质、氨基酸、脂肪、维生素及微量元素等营养物质外,还含有大量多糖、多肽、核苷、萜类等活性物质，其中分离和纯化产物,表现出很强的抗肿瘤、抗氧化、免疫调节、抗病毒、抗细菌和抗其它寄生虫功能,还有治疗糖尿病、心血管病和高胆固醇症的作用，具有防病、治病和调节人体生理机能的功效。近年来国内外学者们对食用菌中的活性物质的研究十分火爆，尤其对食用菌中的生物活性多糖、活性蛋白多肽的研究越来越多，食用菌作为保健食品进入了人民大众的生活中。随着大型真菌发酵工艺的成熟，对药食真菌活性物质的提取从子实体转向发酵菌丝体。多糖：多糖又称聚多糖(polysaccharidc),由单糖聚合成，聚合度大于10的极性大分子，分子量为数万至数百万，是构成生命活动的4大基本物质之一，是自然界含量最丰富的生物聚合物，几乎存在于所有生物体中。多糖与生命的多种生理功能密切相关，不仅为生物提供骨架结构和能量来源，还参与细胞各种生理过程的调节。许多功能性多糖具有降血糖、降血脂、抗氧化本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药食真菌菌丝多糖多肽免疫增强剂的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)菌丝发酵物的制备：以液态深层发酵方法培养松乳菇、金针菇、香菇、猴头菇、松茸等食药真菌菌丝，25‑30℃，100‑180r/min培养2‑4d，制备食药真菌菌丝发酵物，包括菌丝与发酵液。(2)多糖多肽提取：菌丝发酵物→研磨或高压均浆破碎菌丝→加0.05‑0.2％(w/v)的复合酶(纤维素酶：果胶酶＝1.5：2‑3)进行第一次酶解(PH5,50℃,2‑3h),80‑90℃灭活10‑20min；用中性蛋白酶(木瓜蛋白酶等)第二次酶解(pH7.0，50℃，2‑3h，用酶量32万U/100ml),→微波(120S～18...

【技术特征摘要】
1.一种药食真菌菌丝多糖多肽免疫增强剂的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)菌丝发酵物的制备：以液态深层发酵方法培养松乳菇、金针菇、香菇、猴头菇、松茸等食药真菌菌丝，25-30℃，100-180r/min培养2-4d，制备食药真菌菌丝发酵物，包括菌丝与发酵液。(2)多糖多肽提取：菌丝发酵物→研磨或高压均浆破碎菌丝→加0.05-0.2％(w/v)的复合酶(纤维素酶：果胶酶＝1.5：2-3)进行第一次酶解(PH5,50℃,2-3h),80-90℃灭活10-20min；用中性蛋白酶(木瓜蛋白酶等)第二次酶解(pH7.0，50℃，2-3h，用酶量32万U/100ml),→微波(120S～180S)或超声波(400W，50-60℃,40-60min)处理→过滤→4000-5000rpm离心10-20min,得多糖与多肽粗提取液；(3)多糖多肽分离：粗提液减压浓缩，加乙醇至乙醇体积百分比浓度为70—75％，搅匀，静止沉淀过夜，使提取液中的多糖和多肽初步分离，得作为沉淀物的粗多糖和作为上清液的粗多肽；(4)粗多糖多肽纯化：1)粗多糖的纯化：将乙醇沉淀物水溶解，4号垂溶漏斗过滤后取滤液；加盐酸左旋咪唑使其体积百分比浓度为0.1—0.5％，煮沸15min，静置过夜，使蛋白与盐酸左旋咪唑结合沉淀，取上清液，280nm处测定无蛋白，离心；将上清液用碱调PH至7—8，按体积加入2—8％过氧化氢(w/v),于50—70℃脱色2—3h；加石油醚和氯仿分次萃取脱脂、脱色和残存左旋咪唑；超滤除菌和大分子物...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘莹莹，肖毅，肖兵南，蒋小文，
申请(专利权)人：湖南民康生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：湖南,43