一种促进丛枝菌根真菌孢子萌发及菌丝衍生方法技术

技术编号:10309814 阅读:282 留言:0更新日期:2014-08-13 13:25
本发明专利技术公开了一种促进丛枝菌根真菌孢子萌发及菌丝衍生方法,丛枝菌根真菌孢子的筛选,丛枝菌根真菌孢子的消毒,消过毒的孢子在显微镜下用无菌的枪头吸取转移到置于培养皿中的培养基上,每个培养皿接种50个孢子,置暗箱中培养,26℃条件下,培养20d完成培养过程。本发明专利技术的有益之处是采用RiT-DNA转基因胡萝卜根的根分泌液(50ml/L),外加葡萄糖和适当的氮源促进Glomus intraradices孢子萌发和菌丝生长。本方法操作简便,材料廉价,环境友好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于真菌萌发及菌丝衍生促进剂
,涉及。
技术介绍
丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi, AMF)是在陆地上栖息的最普遍的、具有与最广泛植物种类存在地下共生关系的真菌。在土壤中和一个宿主植物形成共生关系之前,丛枝菌根真菌经历一个前共生阶段,包含孢子萌发、菌丝生长和形成分枝;当存在寄主根时,随着附着泡的形成,再入侵到根内并在细胞间延伸,形成丛枝状结构,然后外生菌丝生长,最后形成孢子。AM真菌的孢子是非常大的,并且包括许多细胞核,储存了大量的脂肪和糖类。储存如此大容量的基因信息和能量是该物种的选择优势,但是很清楚AM真菌的孢子不含有支持持续生长和完成生命循环的生物学因素,除非它们成为与寄主共生的一部分。这是因为在前共生阶段缺乏一种或者多种营养元素,包括缺乏合成脂肪酸的能力。于是,AM真菌必须依赖由萌发孢子或根外菌丝生成的萌发管侵染到植物根中,从而完成AM真菌的生命循环过程。显然,AM真菌的孢子可以在不含任何矿质营养物质的水中萌发,AM真菌的孢子在萌发早期的一些生化反应,例如在Glomus mosseae的孢子中存在萘酹磷酸酯本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种促进丛枝菌根真菌孢子萌发及菌丝衍生方法,其特征在于按照以下步骤进行:步骤1:丛枝菌根真菌孢子的筛选,称取含丛枝菌根真菌的沙子菌剂倒入杯中加水搅拌、用400目孔径的双层筛网筛洗,直到搪瓷杯中水清澈为止,随后自来水不断清洗筛网,收集下层400目筛网的孢子,筛出物放入培养皿中,用移液枪吸取孢子于干净的锥形瓶中备用;步骤2:丛枝菌根真菌孢子的消毒,将上一步锥形瓶中收集的孢子倒入无菌的纱网中,用无菌水在超净台上先冲数遍,然后放于漏斗中,倒入配好消毒液冲洗1‑2遍,用无菌皮塞塞住漏斗的低部,继续添加消毒液,震荡之后,去掉皮塞,用无菌水冲洗;步骤3:将消过毒的孢子在显微镜下用无菌的枪头吸取转移到置于培养...

【技术特征摘要】
1.一种促进丛枝菌根真菌孢子萌发及菌丝衍生方法,其特征在于按照以下步骤进行: 步骤1:丛枝菌根真菌孢子的筛选,称取含丛枝菌根真菌的沙子菌剂倒入杯中加水搅拌、用400目孔径的双层筛网筛洗,直到搪瓷杯中水清澈为止,随后自来水不断清洗筛网,收集下层400目筛网的孢子,筛出物放入培养皿中,用移液枪吸取孢子于干净的锥形瓶中备用; 步骤2:丛枝菌根真菌孢子的消毒,将上一步锥形瓶中收集的孢子倒入无菌的纱网中,用无菌水在超净台上先冲数遍,然后放于漏斗中,倒入配好消毒液冲洗1-2遍,用无菌皮塞塞住漏斗的低部,继续添加消毒液,震荡之后,去掉皮塞,用无菌水冲洗; 步骤3:将消过毒的孢子在显微镜下用无菌的枪头吸取转移到置于培养皿中的培养基上,每个培养皿接种50个孢子,置暗箱中培养,26°C条件下,培养20d完成培养过程。2.按照权利要求1所述一种促进丛枝菌根真菌孢子萌发及菌丝衍生方法,其特征在于:所述步骤I中丛枝菌根真菌...

【专利技术属性】
技术研发人员:金海如赵腊梅
申请(专利权)人:浙江师范大学
类型:发明
国别省市:浙江;33

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