高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂制造技术

本发明专利技术公开了高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂，通过构建真菌特异性表达植酸酶phyA基因的安全表达载体pCB130NG-phyA，并转入蛹虫草原生质体，再生获得转基因蛹虫草子实体后，以子实体为母种，培养制得转基因蛹虫草菌丝，PDA液体培养基培养，离心收集菌体，烘干粉碎制得高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂，可直接添加于饲料中饲喂动物，不仅能增加动物对磷的利用率，能大大提高养殖动物各期平均日增重和料肉比，促进动物生长，增强动物免疫能力，而且具有无耐药性、改善动物产品品质等优点，而且使磷的排泄量降低了32.14-56.14％，从而有利于增加养殖效益，降低对环境的污染，应用前景十分诱人。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程
和饲料添加剂
，更具体设及一种高表达植 酸酶的蛹虫草菌丝饲料添加剂及其制备方法和作为动物饲料添加剂的应用。
技术介绍
磯是畜禽营养物质中功能最多的营养素之一。畜禽必须从饲料中得到充足的磯才 能维持正常生命和生产活动，单胃动物（猪、鸡）饲料中植物性饲料所占比例很大，虽然 饲料中总磯含量较高，但可被单胃动物利用的有效磯却不足。谷物饲料中磯的主要W植酸 和植酸盐的形式存在，绝大多数单胃动物不能充分消化、利用植酸和植酸盐中的磯，该不 仅增加了饲养成本，而且，未被动物消化吸收的磯还会对环境造成污染。此外，植酸盐能 络合某些营养物质，降低其在动物体内的消化吸收率，是一种抗营养因子。动物进食的磯 只有少部分作为体成分沉积；大部分在参与完体内新陈代谢后随粪便排出体外，因此磯需 不断供应，若饲料中磯含量不足，极易造成磯缺乏。动物缺乏巧、磯、维生素D，导致骨骼牙齿 异常、生长缓慢、生产性能下降、食欲减退和饲料报酬降低等。 因此，就需要在畜禽的饲料中添加一种易于被肠道消化的磯饲料。通常添加无机 态的磯酸氨巧。但是磯酸氨巧是不可再生的矿物资源，并且在市场上的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种表达载体pCB130NG‑ phyA，它是：    1）用HindIII和EcoRI双酶切pCAMBIA1300载体，去除MCS区，经DNA聚合酶Klenow酶补平后，用T4连接酶连接形成中间载体pCB130‑1；    2）在pCB130‑1的SphI位点处引入SEQ ID NO.1所示的基因，包含左右边界序列和多克隆位点，构建成中间载体pCB130‑2；    3）pCB130‑2分别在PstI酶切位点处引入真菌特异性启动子GPD，在SacI与EcoRI酶切位点之间引入Nos终止子，构建成真菌特异性双T‑DNA表达载体，命名为pCB130NG；    4）经XbaI酶切，在pCB130...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李海燕，陈欢，李晓薇，李玉，王法微，李晰亮，刘秀明，姚娜，董园园，王南，王琦，王秀然，卢天成，王岩，孙喆，孙天旭，
申请(专利权)人：吉林农业大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22