The present invention provides a culture platform, a cell culture medium and a method for differentiating pluripotent cells into hematopoietic cells. The invention further provides hematopoietic cells derived from pluripotent stem cells derived from the culture platform and method disclosed in this paper, which can be cultured without feeding, monolayer culture and no EB formation. In particular, the hematopoietic cells derived from pluripotent stem cells include, and are not limited to, iHSC, permanent hematopoietic endothelial cells, hematopoietic progenitor cells, T progenitor cells, NK progenitor cells, T cells and NK cells.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于诱导造血细胞分化的方法和组合物关联申请本申请要求2015年1月26日提交的美国临时申请号62/107,517和2015年11月4日提交的美国临时专利申请号62/251,016的优先权,其在此全文引入作为参考。
本专利技术一般涉及用于从多能干细胞生产所有造血谱系细胞的组合物和方法。特别的,本专利技术涉及从多能干细胞,包括人诱导性多能干细胞生产所有造血谱系细胞的改进的培养平台。背景人诱导性多能干细胞(hiPSC)技术代表了用于治疗包括癌症在内的许多血液学和非血液学恶性肿瘤的治疗上可行的造血细胞的非常有希望和可能无限的来源。为了推进hiPSC和基因工程改造的hiPSC技术作为造血细胞治疗的同种异体来源的前景,必须能够不仅有效和可重复地产生造血干细胞和祖细胞(HSC),而且还产生免疫效应物种群,包括T、B、NKT和NK淋巴样细胞及其祖细胞的多样性子集。由于在胚胎发育期间存在至少两个在时间和空间上不同的血液形成阶段(waves)——原始(primitive)造血和永久(definitive)造血——的原因,具有产生淋巴细胞潜能的HSC的体外衍生是复杂的。原始造血发生在胚外卵黄囊中,并产生主要包括原始红细胞和骨髓细胞而不是HSC的瞬时和限制性造血细胞。最初的HSC仅在来自称为永久造血内皮(HE)的动脉血管内的特异性内皮祖细胞的最终阶段中才出现。然后永久HE经历内皮细胞-造血过渡以产生HSC,然后HSC在整个成年期间最终迁移到骨髓,在那里它们维持多系血细胞生成,包括T、B、NKT和NK淋巴样细胞。因此,来自多能干细胞的HSC和淋巴样效应细胞的产生取决于通过精心设 ...
【技术保护点】
一种用于引导多能干细胞向造血细胞系分化的方法,包含:(i)使多能干细胞接触包含BMP途径激活剂以及可选的bFGF的组合物,以获得中胚层细胞;以及(ii)使中胚层细胞接触包含BMP途径激活剂、bFGF和WNT途径激活剂的组合物,以获得具有永久造血内皮(HE)潜能的中胚层细胞,其中具有永久造血内皮(HE)潜能的中胚层细胞能够提供造血细胞系,包括造血干和祖细胞(HSC)、造血专能祖细胞(MPP)、前‑T祖细胞、前‑NK祖细胞、T祖细胞、NK祖细胞、T细胞、NK细胞、NKT细胞或B细胞;且其中中胚层细胞和具有永久HE潜能的中胚层细胞在步骤(i)和(ii)中获得,而不形成拟胚体。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.01.26 US 62/107,517;2015.11.04 US 62/251,0161.一种用于引导多能干细胞向造血细胞系分化的方法,包含:(i)使多能干细胞接触包含BMP途径激活剂以及可选的bFGF的组合物,以获得中胚层细胞;以及(ii)使中胚层细胞接触包含BMP途径激活剂、bFGF和WNT途径激活剂的组合物,以获得具有永久造血内皮(HE)潜能的中胚层细胞,其中具有永久造血内皮(HE)潜能的中胚层细胞能够提供造血细胞系,包括造血干和祖细胞(HSC)、造血专能祖细胞(MPP)、前-T祖细胞、前-NK祖细胞、T祖细胞、NK祖细胞、T细胞、NK细胞、NKT细胞或B细胞;且其中中胚层细胞和具有永久HE潜能的中胚层细胞在步骤(i)和(ii)中获得,而不形成拟胚体。2.权利要求1的方法,进一步包括:使具有永久HE潜能的中胚层细胞接触包含bFGF和ROCK抑制剂的组合物,以获得永久HE细胞。3.权利要求2的方法,进一步包括:使永久HE细胞接触包含BMP激活剂,以及可选的ROCK抑制剂,以及一种或多种选自TPO、IL3、GMCSF、EPO、bFGF、VEGF、SCF、IL6和IL11的生长因子和细胞因子的组合物,以获得造血专能祖细胞(MPP)。4.权利要求2的方法,进一步包括:使永久HE细胞接触包含一种或多种选自SCF、Flt3L和IL7的生长因子和细胞因子;以及可选的一种或多种BMP激活剂、ROCK抑制剂、VEGF和bFGF的组合物,以获得前-T祖细胞、T祖细胞和/或T细胞。5.权利要求2的方法,进一步包括:使永久HE细胞接触包含一种或多种选自SCF、Flt3L、IL7和IL15的生长因子和细胞因子以及可选的一种或多种BMP激活剂、ROCK抑制剂、VEGF和bFGF的组合物,以获得前-NK祖细胞、NK祖细胞和/或NK细胞。6.权利要求1的方法,进一步包括:使多能干细胞接触包含MEK抑制剂、GSK3抑制剂和ROCK抑制剂的组合物,以接种和扩增细胞。7.权利要求1的方法,进一步包括:使多能干细胞、中胚层细胞和/或具有永久造血内皮潜能的中胚层细胞处于约2%至约10%的低氧张力下。8.权利要求1的方法,其中多能干细胞向造血细胞系的分化不含或基本上不含TGFβ受体/ALK抑制剂。9.权利要求1的方法,其中多能干细胞向造血细胞系的分化处于无饲养条件下。10.权利要求1的方法,其中多能干细胞向造血细胞系的分化处于无基质条件下。11.权利要求1的方法,其中多能干细胞包括诱导性多能干细胞(iPSC)。12.权利要求11的方法,其中iPSC是初始iPSC。13.权利要求1的方法,其中WNT途径激活剂是GSK3抑制剂。14.权利要求13的方法,其中GSK3抑制剂是CHIR99021。15.权利要求1的方法,其中BMP途径激活剂是BMP4。16.权利要求2的方法,其中ROCK抑制剂是Thiazovivin或Y-27632。17.权利要求2的方法,其中ROCK抑制剂是Y-27632。18.一种用于引导多能干细胞向造血谱系细胞分化的方法,包括:(i)使多能干细胞接触包含GSK3抑制剂和BMP激活剂的组合物,以获得中胚层细胞;(ii)使中胚层细胞接触包含GSK3抑制剂、BMP激活剂以及可选的TGFβ受体/ALK抑制剂的组合物,以获得造血内皮;以及(iii)使造血内皮接触包含一种或多种选自VEGF、SCF、Flt3L、IL15、IL3、IL6、IGF和TPO的生长因子和细胞因子;以及BMP激活剂的组合物,以获得永久HSC,其中组合物可选的不含Wnt途径激活剂和TGFβ受体/ALK抑制剂。19.权利要求18的方法,进一步包括:(iv)使永久HSC接触包含一种或多种选自SCF、Flt3L、IL7、IL2、IL3和IL6的生长因子和细胞因子;BMP激活剂,以及一种或多种Notch途径激活剂的组合物,以获得T祖细胞,以及可选的(v)使T祖细胞接触包含一种或多种选自SCF、Flt3L、IL7、IGF、IL2、IL3和IL6的生长因子和细胞因子;以及一种或多种Notch途径激活剂的组合物,以获得T细胞;或(vi)使永久HSC接触包含一种或多种选自SCF、Flt3L、VEGF、IL2、IL3、IL6和IL15的生长因子和细胞因子;以及BMP激活剂的组合物,以获得NK祖细胞;以及可选的,(vii)使NK祖细胞接触包含一种或多种选自SCF、Flt3L、IGF、IL7、IL2、IL3、IL6和IL15的生长因子和细胞因子的组合物,以获得NK细胞,其中组合物不含BMP激活剂。20.权利要求18的方法,其中永久HSC是CD34+CD45+。21.权利要求20的方法,其中永久HSC适于长期移植。22.权利要求19的方法,其中T祖细胞是CD34+CD7+。23.权利要求19的方法,其中NK祖细胞是CD56+CD7+CD161+。24.权利要求18的方法,其中引导多能干细胞向造血谱系细胞的分化不产生拟胚体。25.权利要求18的方法,其中于单层培养下引导多能干细胞向造血谱系细胞的分化。26.权利要求18的方法,其中于无饲养条件下引导多能干细胞向造血谱系细胞的分化。27.权利要求18的方法,其中于无基质条件下引导多能干细胞向造血谱系细胞的分化。28.权利要求18的方法,其中多能干细胞是iPSC。29.权利要求28的方法,其中iPSC是初始iPSC。30.一种用于产生多能干细胞来源的T细胞系的方法,包括:(I)使多能干细胞来源的T祖细胞接触包含一种或多种选自SCF、Flt3L、IL7、IGF、IL2、IL3和IL6的生长因子和细胞因子;以及一种或多种Notch途径激活剂的组合物,以获得T细胞;其中组合物不含BMP激活剂;其中多能干细胞来源的T祖细胞获得自使多能干细胞来源的永久HSC接触包含BMP激活剂,一种或多种选自SCF、Flt3L、IL7、IL2、IL3和IL6的生长因子和细胞因子;以及一种或多种Notch途径激活剂的组合物,以允许分化和扩增;其中多能干细胞来源的永久HSC获得自使多能干细胞来源的造血内皮接触包含BMP激活剂;以及一种或多种选自VEGF、SCF、Flt3L、IL15、IL3、IL6、IGF和TPO的生长因子和细胞因子的组合物,以允许分化和扩增,其中组合物可选的不含Wnt途径激活剂和TGFβ受体/ALK抑制剂;其中多能干细胞来源的永久造血内皮获得自使多能干细胞来源的中胚层细胞接触包含GSK3抑制剂、BMP激活剂以及可选的TGFβ受体/ALK抑制剂的组合物,以允许分化和扩增;且其中多能干细胞来源的中胚层细胞获得自使多能干细胞接触包含GSK3抑制剂、BMP激活剂的组合物,以允许分化和扩增;或,(II)使多能干细胞来源的前-T祖细胞接触包含一种或多种选自SCF、Flt3L和IL7的生长因子和细胞因子的组合物,以获得多能干细胞来源的T祖细胞或T细胞,其中组合物不含VEGF、bFGF、BMP激活剂和ROCK抑制剂中的一种或多种;其中多能干细胞来源的前-T祖细胞获得自使多能干细胞来源的永久造血内皮接触包含BMP激活剂、ROCK抑制剂,以及一种或多种选自VEGF、bFGF、SCF、Flt3L和IL7的生长因子和细胞因子的组合物,以允许细胞分化和扩增;其中多能干细胞来源的永久造血内皮获得自使多能干细胞来源的具有永久HE潜能的中胚层细胞接触包含ROCK抑制剂,以及一种或多种选自bFGF、VEGF、SCF、IL6和IL11的生长因子和细胞因子的组合物,以允许细胞分化和扩增;其中组合物不含TGFβ受体/ALK抑制剂;其中多能干细胞来源的具有永久HE潜能的中胚层细胞获得自使多能干细胞来源的中胚层细胞接触包含BMP激活剂、bFGF和GSK3抑制剂的组合物以允许细胞分化和扩增,其中组合物不含TGFβ受体/ALK抑制剂,且其中多能干细胞来源的中胚层细胞获得自使多能干细胞接触包含BMP激活剂以及可选的bFGF的组合物,以允许细胞分化和扩增。31.权利要求30的方法,进一步包括:使多能干细胞接触包含MEK抑制剂、GSK3抑制剂和ROCK抑制剂的组合物以接种和扩增多能干细胞,其中组合物不含TGFβ受体/ALK抑制剂。32.权利要求30的方法,其中产生多能干细胞来源的T细胞系不产生拟胚体。33.权利要求30的方法,其中于单层培养下产生多能干细胞来源的T细胞系。34.权利要求30的方法,其中于无饲养条件下产生多能干细胞来源的T细胞系。35.权利要求30的方法,其中于无基质条件下产生多能干细胞来源的T细胞系。36.权利要求30的方法,其中多能干细胞是iPSC。37.权利要求36的方法,其中iPSC是初始iPSC。38.一种用于产生多能干细胞来源的NK细胞系的方法,包括:(I)使多能干细胞来源的NK祖细胞接触包含一种或多种选自SCF、Flt3L、IGF、IL7、IL2、IL3、IL6和IL15的生长因子和细胞因子的组合物,以获得多能干细胞来源的NK细胞,其中组合物不含BMP激活剂;其中多能干细胞来源的NK祖细胞获得自使多能干细胞来源的永久HSC接触包含BMP激活剂,以及一种或多种选自SCF、Flt3L、VEGF、IL2、IL3、IL6和IL15的生长因子和细胞因子的组合物,以允许细胞分化和扩增;其中多能干细胞来源的永久HSC获得自使多能干细胞来源的造血内皮接触包含BMP激活剂,以及一种或多种选自VEGF、SCF、Flt3L、IL15、IL3、IL6、IGF和TPO的生长因子和细胞因子的组合物,以允许细胞分化和扩增,其中组合物不含Wnt途径激活剂和TGFβ受体/ALK抑制剂;其中多能干细胞来源的造血内皮获得自使多能干细胞来源的中胚层细胞接触包含GSK3抑制剂、BMP激活剂以及可选的TGFβ受体/ALK抑制剂的组合物,以启动多能干细胞来源的中胚层细胞的分化,以允许细胞分化和扩增;且其中多能干细胞来源的中胚层细胞获得自使多能干细胞接触包含GSK3抑制剂、BMP激活剂的组合物,以允许细胞分化和扩增;或(II)使多能干细胞来源的前-NK祖细胞接触包含一种或多种选自SCF、Flt3L、IL3、IL7和IL15的生长因子和细胞因子的组合物,以获得多能干细胞来源的NK祖细胞或NK细胞,其中组合物不含VEGF、bFGF、BMP激活剂和ROCK抑制剂中的一种或多种;其中多能干细胞来源的前-NK祖细胞获得自使多能干细胞来源的永久造血内皮接触包含BMP激活剂、ROCK抑制剂,以及一种或多种选自VEGF、bFGF、SCF、Flt3L、IL3、IL7和IL15的生长因子和细胞因子的组合物,以允许细胞分化和扩增;其中多能干细胞来源的永久造血内皮获得自使多能干细胞来源的具有永久HE潜能的中胚层细胞接触包含ROCK抑制剂,以及一种或多种选自bFGF、VEGF、SCF、IL6和IL11的生长因子和细胞因子的组合物,以允许细胞分化和扩增,其中组合物可选的不含TGFβ受体/ALK抑制剂;其中多能干细胞来源的具有永久HE潜能的中胚层细胞获得自使多能干细胞来源的中胚层细胞接触包含BMP激活剂、bFGF和GSK3抑制剂的组合物,以允许细胞分化和扩增,其中组合物可选的不含TGFβ受体/ALK抑制剂;且其中多能干细胞来源的中胚层细胞获得自使多能干细胞接触包含BMP激活剂以及可选的bFGF的组合物,以允许细胞分化和扩增。39.权利要求38的方法,进一步包括使接种的多能干细胞、多能干细胞来源的中胚层细胞、具有造血内皮潜能的中胚层细胞和/或永久造血内皮处于约2%至约10%的低氧张力下。40.权利要求38的方法,进一步包括使多能干细胞接触包含MEK抑制剂、GSK3抑制剂和ROCK抑制剂的组合物,以接种和扩增细胞,其中组合物不含TGFβ受体/ALK抑制剂。41.权利要求38的方法,其中产生多能干细胞来源的NK细胞系不产生拟胚体。42.权利要求38的方法,其中在单层培养下产生多能干细胞来源的NK细胞系。43.权利要求38的方法,其中于无饲养条件下产生多能干细胞来源的NK细胞系。44.权利要求38的方法,其中于无基质条件下产生多能干细胞来源的NK细胞系。45.权利要求38的方法,其中多能干细胞是iPSC。46.权利要求45的方法,其中iPSC是初始iPSC。47.一种用于产生多能干细胞来源的永久造血内皮的方法,包括:使多能干细胞来源的具有永久HE潜能的中胚层细胞接触包含ROCK抑制剂,以及一种或多种选自bFGF、VEGF、SCF、IL6和IL11的生长因子和细胞因子的组合物,以获得多能干细胞来源的永久造血内皮,其中组合物可选的不含TGFβ受体/ALK抑制剂;其中多能干细胞来源的具有永久HE潜能的中胚层细胞获得自使多能干细胞来源的中胚层细胞接触包含BMP激活剂、bFGF和GSK3抑制剂的组合物,以允许细胞分化和扩增,其中组合物可选的不含TGFβ受体/ALK抑制剂;且其中多能干细胞来源的中胚层细胞获得自使多能干细胞接触包含BMP激活剂以及可选的bFGF的组合物,以允许细胞分化和扩增。48.权利要求47的方法,进一步包括:使多能干细胞接触包含MEK抑制剂、GSK3抑制剂和ROCK抑制剂的组合物,以接种和扩增多能干细胞,其中组合物不含TGFβ受体/ALK抑制剂。49.权利要求47和48的方法,进一步包括使接种的多能干细胞、多能干细胞来源的中胚层细胞、具有永久造血内皮潜能的中胚层细胞和/或永久造血内皮处于约2%至约10%的低氧张力下。50.权利要求47的方法,其中产生多能干细胞来源的永久造血内皮不产生拟胚体。51.权利要求47的方法,其中于单层培养下产生多能干细胞来源的永久造血内皮。52.权利要求47的方法,其中于无饲养条件下产生多能干细胞来源的永久造血内皮。53.权利要求47的方法,其中于无基质条件下产生多能干细胞来源的永久造血内皮。54.权利要求47的方法,其中多能干细胞是iPSC。55.权利要求54的方法,其中iPSC是初始iPSC。56.一种用于产生多能干细胞来源的专能造血谱系祖细胞的方法,包括:使多能干细胞来源的前-HSC接触包含BMP激活剂,以及一种或多种选自TPO、IL3、GMCSF、EPO、bFGF、VEGF、SCF、IL6和IL11的生长因子和细胞因子的组合物,以获得多能干细胞来源的专能祖细胞,其中组合物不含ROCK抑制剂;其中多能干细胞来源的前-HSC获得自使多能干细胞来源的永久造血内皮接触包含BMP激活剂、ROCK抑制剂,以及一种或多种选自TPO、IL3、GMCSF、EPO、bFGF、VEGF、SCF、IL6和IL11的生长因子和细胞因子的组合物,以允许细胞分化和扩增;其中多能干细胞来源的永久造血内皮获得自使多能干细胞来源的具有永久HE潜能的中胚层细胞接触包含ROCK抑制剂,以及一种或多种选自bFGF、VEGF、SCF、IL6和IL11的生长因子和细胞因子的组合物,以允许细胞分化和扩增,其中组合物不含TGFβ受体/ALK抑制剂;其中多能干细胞来源的具有永久HE潜能的中胚层细胞获得自使多能干细胞来源的中胚层细胞接触包含BMP激活剂、bFGF和GSK3抑制剂的组合物,以允许细胞分化和扩增,其中组合物不含TGFβ受体/ALK抑制剂;其中多能干细胞来源的中胚层细胞获得自使多能干细胞来源的中胚层细胞接触包含BMP激活剂、bFGF和GSK3抑制剂的组合物,以允许细胞分化和扩增,其中组合物不含TGFβ受体/ALK抑制剂;以及其中接触多能干细胞来源的中胚层细胞获得自使多能干细胞接触包含BMP激活剂以及可选的bFGF的组合物,以允许细胞分化和扩增。57.权利要求56的方法,进一步包括:使多能干细胞接触包含MEK抑制剂、GSK3抑制剂和ROCK抑制剂的组合物,以接种和扩增多能干细胞,其中组合物不含TGFβ受体/ALK抑制剂。58.权利要求56和57的方法,进一步包括使接种的多能干细胞、多能干细胞来源的中胚层细胞、具有永久造血内皮潜能的中胚层细胞和/或永久造血内皮处于约2%至约10%的低氧张力下。59.权利要求58的方法,其中多能干细胞来源的专能造血谱系祖细胞不产生拟胚体。60.权利要求58的方法,其中多能干细胞来源的专能造血谱系祖细胞进行单层培养。61.权利要求58的方法,其中多能干细胞来源的专能造血谱系祖细胞处于无饲养条件下。62.权利要求58的方法,其中多能干细胞来源的专能造血谱系祖细胞处于无基质条件下。63.权利要求58的方法,其中多能干细胞是iPSC。64.权利要求63的方法,其中iPSC是初始iPSC。65.一种促进造血自我更新、重建或移植的方法,其使用包含一种或多种使用权利要求1-64的方法产生的细胞群、细胞系或克隆细胞的组合物,其中细胞群、细胞系或克隆细胞选自:(i)多能干细胞来源的CD34+永久造血内皮(iCD34HE),其中iCD34细胞能够分化为专能祖细胞、T祖细胞、NK祖细胞、T细胞和NK细胞且其中iCD34细胞是CD34+CD43-;(ii)多能干细胞来源的永久造血内皮(iHE),其中iHE细胞系或克隆细胞是CD34+;(iii)多能干细胞来源的永久HSC,其中iHSC是CD34+CD45+;(iv)多能干细胞来源的专能祖细胞,其中iMPP细胞是CD34+CD45+;(v)多能干细胞来源的T祖细胞,其中T祖细胞是CD34+CD7+;(vi)多能干细胞来源的T细胞,其中T细胞是CD4+或CD8+;(vii)多能干细胞来源的NK祖细胞,其中NK祖细胞是CD56+CD7+CD161+;和(viii)多能干细胞来源的NK细胞,其中NK细胞是CD56+CD57+CD16+CD94-。66.一种用于获得多能干细胞来源的造血细胞系的培养平台,包含:I:(i)培养基,其包含BMP激活剂,以及一种或多种选自VEGF、SCF、Flt3L、IL15、IL3、IL6、IGF和TPO的生长因子和细胞因子,其中该培养基可选的不含Wnt途径激活剂和TGFβ受体/ALK抑制剂,并适于从多能干细胞来源的永久造血内皮分化和扩增多能干细胞来源的永久HSC;(ii)培养基,其包含GSK3抑制剂、BMP激活剂以及可选的TGFβ受体/ALK抑制剂,其中该培养基适于从多能干细胞来源的中胚层细胞分化和扩增多能干细胞来源的永久造血内皮;和(iii)培养基,其包含GSK3抑制剂、BMP激活剂,其中该培养基适于从多能干细胞分化和扩增多能干细胞来源的中胚层细胞;或,II:(i)培养基,其包含ROCK抑制剂,以及一种或多种选自bFGF、VEGF、SCF、IL6和IL11的生长因子和细胞因子,其中该培养基可选的不含TGFβ受体/ALK抑制剂且其中该培养基适于从多能干细胞来源的具有永久造血内皮潜能的中胚层细胞分化和扩增多能干细胞来源的永久造血内皮;(ii)培养基,其包含BMP激活剂、bFGF和GSK3抑制剂,其中培养基可选的不含TGFβ受体/ALK抑制剂且其中该培养基适于在多能干细胞来源的中胚层细胞中获得永久造血内皮潜能;和(iii)培养基,其包含BMP激活剂,以及可选的bFGF,其中该培养基适于从多能干细胞分化和扩增多能干细胞来源的中胚层细胞。67.权利要求66的培养平台,其中第II组进一步包括:(iv)培养基,其包含MEK抑制剂、GSK3抑制剂和ROCK抑制剂,其中该培养基不含TGFβ受体/ALK抑制剂且其中该培养基适于接种和扩增多能干细胞。68.权利要求66的培养平台,进一步包括:I:(i)培养基,其包含一种或多种选自SCF、Flt3L、IL7、IGF、IL2、IL3和IL6的生长因子和细胞因子;以及一种或多种Notch途径激活剂;其中该培养基不含BMP激活剂,并适于将多能干细胞来源的T祖细胞分化为多能干细胞来源的T细胞,或(ii)培养基,其包含BMP激活剂,一种或多种选自SCF、Flt3L、IL7、IL2、IL3和IL6的生长因子和细胞因子;以及一种或多种Notch途径激活剂,其中该培养基适于将多能干细胞来源的永久HSC分化为多能干细胞来源的T祖细胞;以及其中培养基适于产生多能干细胞来源的T细胞系;或II:(i)培养基,其包含一种或多种选自SCF、Flt3L和IL7的生长因子和细胞因子,其中该培养基不含VEGF、bFGF、BMP激活剂和ROCK抑制剂中的一种或多种且其中该培养基适于将多能干细胞来源的前-T祖细胞分化为多能干细胞来源的T祖细胞或T细胞;或(ii)培养基,其包含BMP激活剂、ROCK抑制剂,以及一种或多种选自VEGF、bFGF、SCF、Flt3L和IL7的生长因子和细胞因子,其中该培养基适于将多能干细胞来源的永久造血内皮分化为多能干细胞来源的前-T祖细胞;以及其中培养基适于产生多能干细胞来源的T细胞系。69.权利要求66的培养平台,进一步包括:I:(i)培养基,其包含一种或多种选自SCF、Flt3L、IGF、IL7、IL2、IL3、IL6和IL15的生长因子和细胞因子,其中该培养基不含BMP激活剂,并适于将多能干细胞来源的NK祖细胞分化为多能干细胞来源的NK细胞;或(ii)培养基,其包含BMP激活剂,以及一种或多种选自SCF、Flt3L、VEGF、IL2、IL3、IL6和IL15的生长因子和细胞因子,其中该培养基适于将多能干细胞来源的永久HSC分化为多能干细胞来源的NK祖细胞;...
【专利技术属性】
技术研发人员:巴莱姆·瓦拉莫河,莱顿·克拉克,
申请(专利权)人:菲特治疗公司,
类型:发明
国别省市:美国,US
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