用于产生免疫球蛋白样分子的方法和手段技术

本发明专利技术提供了用于在单个宿主细胞中产生一种或更多种免疫球蛋白样分子的手段和方法。也提供了能够产生目的单特异性和/或双特异性免疫球蛋白样分子的新的CH3突变。

Methods and means for the production of immunoglobulin like molecules

The present invention provides means and methods for producing one or more immunoglobulin like molecules in a single host cell. It provides the ability to generate objective monospecific and / or bispecific immunoglobulin like molecules of new CH3 mutation.

【技术实现步骤摘要】
用于产生免疫球蛋白样分子的方法和手段本申请是申请号为201380032190.9的中国专利申请的分案申请，原申请是2013年04月19日提交的PCT国际申请PCT/NL2013/050293于2014年12月18日进入中国国家阶段的申请。
本专利技术涉及分子生物学、医学和生物治疗剂领域。尤其涉及用于治疗多种疾病的治疗性抗体领域。
技术介绍
许多目前使用的生物治疗剂是分离的重组人或人源化单克隆抗体，其增强机体免疫系统中和或消除参与疾病过程的细胞和/或分子或者消灭侵入的病原体或感染原的能力。单克隆抗体与抗原的单个特定区域或表位结合，并且对于治疗中的使用，通常根据期望的功能性质进行选择，例如杀死肿瘤细胞，阻断受体-配体相互作用或病毒中和。目前，大约有30种经FDA批准的单克隆抗体，这些单克隆抗体通常被大量生产，并且可详细分析其生物物理和生物化学特性以确保批与批之间的一致性，这有助于控制合格率(regulatoryacceptability)。尽管具有这些有利的特性，但是单克隆抗体也有许多缺点，其中一些涉及到其单特异性的性质和疾病的复杂性。疾病过程在性质上常常是多因素的，并且涉及疾病调节因素本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于从单个宿主细胞产生至少两种不同的免疫球蛋白样分子的方法，其中所述两种免疫球蛋白样分子各自包含能够形成界面的两个CH3结构域，所述方法包括在所述细胞中提供：a.编码第一含CH3结构域之多肽链的第一核酸分子，b.编码第二含CH3结构域之多肽链的第二核酸分子，c.编码第三含CH3结构域之多肽链的第三核酸分子，和d.编码第四含CH3结构域之多肽链的第四核酸分子，其中，所述核酸分子中的至少两种具有用于使所述第一含CH3结构域之多肽与所述第二含CH3结构域之多肽以及使所述第三含CH3结构域之多肽与所述第四含CH3结构之多肽链优先配对的手段，所述方法还包括培养所述宿主细胞并且使所述至少四种核酸分子能...

【技术特征摘要】
2012.04.20 US 61/635,9351.一种用于从单个宿主细胞产生至少两种不同的免疫球蛋白样分子的方法，其中所述两种免疫球蛋白样分子各自包含能够形成界面的两个CH3结构域，所述方法包括在所述细胞中提供：a.编码第一含CH3结构域之多肽链的第一核酸分子，b.编码第二含CH3结构域之多肽链的第二核酸分子，c.编码第三含CH3结构域之多肽链的第三核酸分子，和d.编码第四含CH3结构域之多肽链的第四核酸分子，其中，所述核酸分子中的至少两种具有用于使所述第一含CH3结构域之多肽与所述第二含CH3结构域之多肽以及使所述第三含CH3结构域之多肽与所述第四含CH3结构之多肽链优先配对的手段，所述方法还包括培养所述宿主细胞并且使所述至少四种核酸分子能够表达以及从培养物中收获所述至少两种不同的免疫球蛋白样分子的步骤。2.权利要求1所述的方法，其还包括为所述宿主细胞提供编码共同轻链的核酸分子。3.权利要求1或2所述的方法，其中所述第一含CH3结构域之多肽链包含氨基酸替换T366K，并且所述第二含CH3结构域之多肽链包含氨基酸替换L351D。4.权利要求3所述的方法，其中所述第一含CH3结构域之多肽链还包含氨基酸替换L351K。5.权利要求3或4所述的方法，其中所述第二含CH3结构域之多肽链还包含选自Y349E、Y349D和L368E的氨基酸替换。6.权利要求5所述的方法，其中所述第二含CH3结构域之多肽链还包含氨基酸替换L368E。7.权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述第三含CH3结构域之多肽链包含氨基酸替换E356K和D399K，并且所述第四含CH3结构域之多肽链包含氨基酸替换K392D和K409D。8.权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述含CH3结构域之多肽链各自还包含识别靶表位的可变区。9.权利要求8所述的方法，其中4个所述含CH3结构域之多肽链的4个可变区各自识别不同的靶表位。10.权利要求8所述的方法，其中所述第一含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第二含CH3结构域之多肽链的可变区识别不同的靶表位，而所述第三含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第四含CH3结构域之多肽链的可变区识别相同的靶表位。11.权利要求10所述的方法，其中所述第三含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第四含CH3结构域之多肽链的可变区识别的靶表位与所述第一含CH3结构域之多肽链的可变区或所述第二含CH3结构域之多肽链的可变区识别的靶表位相同。12.权利要求10所述的方法，其中所述第三含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第四含CH3结构域之多肽链的可变区识别的靶表位与所述第一含CH3结构域之多肽链的可变区或所述第二含CH3结构域之多肽链的可变区识别的靶表位不同。13.权利要求8所述的方法，其中所述第一含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第二含CH3结构域之多肽链的可变区识别相同的靶表位，而所述第三含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第四含CH3结构域之多肽链的可变区识别不同于所述第一可变区和所述第二可变区识别之靶表位的第二靶表位。14.权利要求8至13中任一项所述的方法，其中所述靶表位位于相同的靶分子上。15.权利要求14所述的方法，其中所述靶分子是可溶性分子。16.权利要求14所述的方法，其中所述靶分子是膜结合分子。17.权利要求8至13中任一项所述的方法，其中所述靶表位位于不同的靶分子上。18.权利要求17所述的方法，其中所述不同的靶分子在相同细胞上表达。19.权利要求17所述的方法，其中所述不同的靶分子在不同细胞上表达。20.权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：科内利斯·阿德里安·德克吕夫，林达·约翰娜·阿莱达·亨德里克斯，敦·洛格滕伯格，
申请(专利权)人：美勒斯公司，
类型：发明
国别省市：荷兰,NL