一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属生物制药技术领域，目的是提供一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物，提供该化合物在制备靶向抑制自分泌运动因子活性的药物中的用途，制备治疗和预防由溶血磷脂酸和自分泌运动因子升高引起的疾病或病症的药物中的用途，制备抗肿瘤药物中的用途。化合物为2,7位取代的咔唑衍生物，具体为5‑[7‑（4‑R2‑苄氧基）‑9H‑咔唑‑2亚甲基]‑2‑R1苯酚，简称R1‑SWS‑R2；R1为甲基或乙基；R2为卤素、硼酸、磺酰基、磷酸基、羧基、氨基酸中的任意一种。化合物对自分泌高表达细胞株具有很好的抗肿瘤活性，对低表达细胞株影响不明显。可制备相应的抗肿瘤药物，为设计新型自分泌运动因子抑制剂提供可能。

Carbazole compound as an autocrine motility factor inhibitor and its preparation method and Application

The invention belongs to the technical field of biological pharmacy, the purpose is to provide a carbazole compounds as inhibitors of autocrine motility factor, provides the use of compounds in the preparation of drugs targeting inhibition of autocrine motility factor activity in the preparation of treatment and prevention by lysophosphatidic acid and drug autocrine motility factor diseases or disorders caused by the increase in the use and preparation of anti tumor drugs in use. Compound 2,7 substituted carbazole derivatives, in particular to 5 [7 (4 R2 benzyloxyl) 9H carbazole 2 methylene] 2 R1 phenol, R1 SWS R2; R1 is methyl or ethyl; R2 is any halogen, boric acid, sulfonyl, phosphate, in a carboxyl group, amino acid. Compounds have good antitumor activity against autocrine and highly expressed cell lines, but have little effect on low expression cell lines. The preparation of corresponding antitumor drugs may provide the possibility of designing new autocrine motility factor inhibitors.

【技术实现步骤摘要】
一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物及其制备方法和应用
本专利技术属于生物制药
，具体涉及一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物及其制备方法和应用。所述化合物通过抑制自分泌运动因子的生理活性，实现治疗和预防不同肿瘤的作用。
技术介绍
自分泌运动因子（Autotaxin，ATX）属于核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶家族(nucleotidepyrophosphatase/phosphodiesterase，NPP）成员，又称ENPP2，是一个分子量为125kDa的糖蛋白，具有一个N-端疏水结构域、一个PDE催化区域、两个类生长素B结构域和一个C端核酸酶类似区，ATX不仅具有5'核苷磷酸二酯酶活性（phosphodiesterase，PDE），同时也是该家族中唯一具有溶血磷脂酶D（LysophospholipaseD,lysoPLD）的活性，它能将溶血磷脂酰胆碱（lysophosphatidylcholine，LPC）水解成溶血磷脂酸（lysophosphatidicacid，LPA）。ATX的多种生物学功能是通过其具有的溶血磷脂酸酶D活性生成LPA发挥作用的。LPA是细胞内第二信使和细胞外信号传递的重要磷脂信号分子，具有促进细胞增殖、加速伤口愈合、影响细胞形态等作用。在病理状态下，LPA的浓度明显升高与多种重大疾病如肿瘤、血栓、肾病的恶化密切相关，LPA与细胞膜上的受体结合从而启动细胞内信号通路，促进肿瘤细胞的增殖、迁移及血管生成因子的分泌。由此可见，LPA在肿瘤转移侵袭及肿瘤相关性血栓中发挥极其重要的作用，降低LPA水平可实现治疗肿瘤的效果。ATX为LPA体内合成的关键蛋白，抑制ATX的活性可有效降低LPA体内的合成，并且在肿瘤患者体内中LPA最主要的来源就是ATX水解LPC生成的。因此，开发靶向ATX酶活性的抑制剂，阻断LPA合成的通路，降低肿瘤患者LPA引起的生理性疾病，是一条有效的途径。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物，本专利技术的另一目的是提供该化合物在抗肿瘤领域的应用。本专利技术由以下技术方案实现的：一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物，所述化合物为2,7位取代的咔唑衍生物，具体为5-[7-（4-R2-苄氧基）-9H-咔唑-2亚甲基]-2-R1苯酚，简称为R1-SWS-R2，结构式为；其中所述R1为烷基，优选甲基或乙基；R2为：卤素、硼酸、磷酸基、羧基中的任意一种。但不只仅限于上述基团。所述卤素为氟、氯、溴、碘中的任意一种。制备作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物的方法为：对二溴苯与金属镁在无水四氢呋喃THF中发生反应合成SWS-1，在氩气保护下SWS-1与R1-异香兰素反应生成SWS-2，SWS-2溶解于二氯甲烷DCM中，与三乙基硅烷反应脱除-OH，获得SWS-3，在SWS-3的二氯甲烷溶液中溶解咪唑，与叔丁基二甲基氯硅烷TBSCl反应生成SWS-4，将SWS-4溶解于无水四氢呋喃中加入1,2-二溴乙烷再与金属镁发生反应，反应液滴加到硼酸三甲酯的THF溶液中进行反应，获得的溶液用乙酸乙酯和水进行分液，有机相饱和盐水清洗、无水硫酸钠干燥获得中间体A；中间体A与4-溴-3-硝基苯酚、化合物X1、四（三苯基膦）钯即Pd(PPh3)4进行反应，生成中间体B，中间体B与三苯基膦PPh3、邻二氯苯混合，氩气保护下反应获得中间体C，中间体C与化合物X2反应生成R1-SWS-R2；所述化合物X1为4-氯苄氯、4-氯甲基苯甲酸甲酯、4-甲基苄氯中的任意一种；所述化合物X2为氢氧化钠、4-溴甲基苯硼酸频哪醇酯、4-溴苄基亚磷酸二乙酯中的任意一种。中间体A的具体制备方法为：（1）将337mmol对二溴苯溶解于350ml的无水四氢呋喃THF中，滴加到氩气保护的三口反应瓶中，三口反应瓶中含有346mmol金属镁，滴加方法为：先加入30ml的对二溴苯的THF溶液，再加入50mg-300mg碘作为催化剂，进行回流反应，回流状态下滴加剩余的对二溴苯的THF溶液，1小时加入完毕，继续回流搅拌2小时，生成SWS-1，反应液直接投入下一步反应；（２）氩气保护的三口瓶中，52.6mmolR1-异香兰素溶解于150ml干燥的THF中的，步骤（１）获得的反应液直接滴加到上述R1-异香兰素的THF溶液中，温度为3-7℃，1h滴加完毕，自然升温到室温反应，过夜；反应完全，冰水浴下滴加50ml的甲醇进行淬灭反应，再加入150ml水，然后乙酸调节pH值为6－7，加入500ml的甲基叔丁醚搅拌分液，有机相采用无水硫酸钠干燥，然后硅胶柱纯化得白色固体SWS-2；（３）将步骤（２）获得的白色固体SWS-2溶解在450ml的二氯甲烷DCM中，加入194mmol三氟乙酸，反应液变为深红色，冰浴下滴加97mmol三乙基硅烷，30分钟滴加完毕，颜色退去，自然升到室温搅拌2小时；水洗分液，有机相无水硫酸钠干燥，硅胶柱纯化，得到11g无色油状物SWS-3；（４）将步骤（３）制备的无色油状物SWS-3和2.0eq咪唑溶解于180ml的二氯甲烷中，1.5eq叔丁基二甲基氯硅烷TBSCl溶解在20ml二氯甲烷中，然后在冰浴下将TBSCl的二氯甲烷溶液滴加入SWS-3和咪唑的二氯甲烷溶液中，30min滴加完毕，自然升到室温反应过夜，过滤，滤液水洗分液，有机相无水硫酸钠干燥，硅胶柱纯化，得到无色油状物SWS-4；（５）将无色油状物SWS-4溶解于160ml的无水四氢呋喃中，80mlSWS-4的无水四氢呋喃溶液滴加到含有54mmol金属镁的三口反应瓶中，加入0.5ml的1,2-二溴乙烷，加热回流反应，继续滴加剩余的SWS-4的四氢呋喃溶液，50分钟滴加完毕，备用；（６）81mmol硼酸三甲酯溶解于120ml的THF中，冰浴下，将步骤（５）的反应液直接滴加到硼酸三甲酯的THF溶液中，30分钟滴加完毕，自然升到室温反应过夜，加热，用2N的盐酸调pH值为6，再加入250ml的乙酸乙酯和250ml的水搅拌分液，有机相饱和盐水清洗，无水硫酸钠干燥，得浅黄色固体中间体A。中间体B的具体制备方法为：（1）将4-溴-3-硝基苯酚、物质的量为4-溴-3-硝基苯酚的2倍的碳酸钾溶解于干燥的二甲基甲酰胺DMF中，分别加入到单口反应瓶中，氩气保护，再加入化合物X1，油浴搅拌升温到90℃，反应液由红色变为黄色，3h后反应完全，冷却反应液，加水搅拌，析出浅黄色固体；（2）将等物质的量的中间体A和步骤（1）所得浅黄色固体，2N碳酸钾、30ml甲苯分别加入到单口反应瓶中，氩气保护，再加入200mg四（三苯基膦）钯即Pd(PPh3)4，加热搅拌回流过夜，反应完全，有机相硅胶柱纯化，得到黄色固体中间体B。中间体C的具体制备方法为：所获得的黄色固体中间体B、等物质的量的三苯基磷即PPh3，５0ml邻二氯苯分别加入到单口反应瓶中，氩气保护，加热搅拌回流17小时，反应完全，有机相硅胶柱纯化，得到白色固体中间体C。所述化合物X2为氢氧化钠，R2为卤素或羧基，中间体C合成R1-SWS-R2的具体制备方法为：获得的中间体C0.2g，5ml甲醇、2.5ml浓度为10%的氢氧化钠，分别加入到单口反应瓶中，加热搅拌回流2小时，反应完全，冷却反应液，加入5ml水，用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物，其特征在在于：所述化合物为2,7位取代的咔唑衍生物，具体为5‑[7‑（4‑R2‑苄氧基）‑9H‑咔唑‑2亚甲基]‑2‑R1苯酚，简称为R1‑SWS‑R2，结构式为

【技术特征摘要】
1.一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物，其特征在在于：所述化合物为2,7位取代的咔唑衍生物，具体为5-[7-（4-R2-苄氧基）-9H-咔唑-2亚甲基]-2-R1苯酚，简称为R1-SWS-R2，结构式为；其中所述R1为烷基；R2为：卤素、硼酸、磷酸基、羧基中的任意一种。2.根据权利要求1所述的一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物，其特征在于：所述烷基为甲基或乙基；所述卤素为氯、氟、溴、碘中的任意一种。3.制备权利要求1-2所述的一种作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物的方法，其特征在于：对二溴苯与金属镁在无水四氢呋喃THF中发生反应合成SWS-1，在氩气保护下SWS-1与R1-异香兰素反应生成SWS-2，SWS-2溶解于二氯甲烷DCM中，与三乙基硅烷反应脱除-OH，获得SWS-3，在SWS-3的二氯甲烷溶液中溶解咪唑，与叔丁基二甲基氯硅烷TBSCl反应生成SWS-4，将SWS-4溶解于无水四氢呋喃中加入1,2-二溴乙烷再与金属镁发生反应，反应液滴加到硼酸三甲酯的THF溶液中进行反应，获得的溶液用乙酸乙酯和水进行分液，有机相饱和盐水清洗、无水硫酸钠干燥获得中间体A；中间体A与4-溴-3-硝基苯酚、化合物X1、四（三苯基膦）钯即Pd(PPh3)4进行反应，生成中间体B，中间体B与三苯基膦PPh3、邻二氯苯混合，氩气保护下反应获得中间体C，中间体C与化合物X2反应生成R1-SWS-R2；所述化合物X1为4-氯苄氯、4-氯甲基苯甲酸甲酯、4-甲基苄氯中的任意一种；所述化合物X2为氢氧化钠、4-溴甲基苯硼酸频哪醇酯、4-溴苄基亚磷酸二乙酯中的任意一种。4.根据权利要求3所述的一种制备作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物的方法，其特征在于：中间体A的具体制备方法为：（1）将337mmol对二溴苯溶解于350ml的无水四氢呋喃THF中，滴加到氩气保护的三口反应瓶中，三口反应瓶中含有346mmol金属镁，滴加方法为：先加入30ml的对二溴苯的THF溶液，再加入50mg-300mg碘作为催化剂，进行回流反应，回流状态下滴加剩余的对二溴苯的THF溶液，1小时加入完毕，继续回流搅拌2小时，生成SWS-1，反应液直接投入下一步反应；（２）氩气保护的三口瓶中，52.6mmolR1-异香兰素溶解于150ml干燥的THF中的，步骤（１）获得的反应液直接滴加到上述R1-异香兰素的THF溶液中，温度为3-7℃，1h滴加完毕，自然升温到室温反应，过夜；反应完全，冰水浴下滴加50ml的甲醇进行淬灭反应，再加入150ml水，然后乙酸调节pH值为6－7，加入500ml的甲基叔丁醚搅拌分液，有机相采用无水硫酸钠干燥，然后硅胶柱纯化得白色固体SWS-2；（３）将步骤（２）获得的白色固体SWS-2溶解在450ml的二氯甲烷DCM中，加入194mmol三氟乙酸，反应液变为深红色，冰浴下滴加97mmol三乙基硅烷，30分钟滴加完毕，颜色退去，自然升到室温搅拌2小时；水洗分液，有机相无水硫酸钠干燥，硅胶柱纯化，得到11g无色油状物SWS-3；（４）将步骤（３）制备的无色油状物SWS-3和2.0eq咪唑溶解于180ml的二氯甲烷中，1.5eq叔丁基二甲基氯硅烷TBSCl溶解在20ml二氯甲烷中，然后在冰浴下将TBSCl的二氯甲烷溶液滴加入SWS-3和咪唑的二氯甲烷溶液中，30min滴加完毕，自然升到室温反应过夜，过滤，滤液水洗分液，有机相无水硫酸钠干燥，硅胶柱纯化，得到无色油状物SWS-4；（５）将无色油状物SWS-4溶解于160ml的无水四氢呋喃中，80mlSWS-4的无水四氢呋喃溶液滴加到含有54mmol金属镁的三口反应瓶中，加入0.5ml的1,2-二溴乙烷，加热回流反应，继续滴加剩余的SWS-4的四氢呋喃溶液，50分钟滴加完毕，备用；（６）81mmol硼酸三甲酯溶解于120ml的THF中，冰浴下，将步骤（５）的反应液直接滴加到硼酸三甲酯的THF溶液中，30分钟滴加完毕，自然升到室温反应过夜，加热，用2N的盐酸调pH值为6，再加入250ml的乙酸乙酯和250ml的水搅拌分液，有机相饱和盐水清洗，无水硫酸钠干燥，得浅黄色固体中间体A。5.根据权利要求3所述的一种制备作为自分泌运动因子抑制剂的咔唑类化合物的方法，其特征在于：中间体B的具体制备方法为：（1）将4-溴-3-硝基苯酚、物质的量为4-溴-3-硝基苯酚的2倍的碳酸钾溶解...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵邑，李荣宝，赵峰梅，赵亚蕊，孙勇，潘薇薇，梁雅丽，王伟霞，张全爱，曹鹏程，
申请(专利权)人：山西省生物研究所，
类型：发明
国别省市：山西,14