由核苷酸活化的糖产生游离形式的单糖的发酵方法技术
Fermentation method for producing free form monosaccharides from nucleotides activated sugars
The present invention relates to a method of monosaccharide fermentation to produce free forms such as L fucose. The microorganisms used showed hydrolytic activity for nucleotides activated sugars and released unmodified free form monosaccharides. Free monosaccharides were recovered from the supernatant of cultured microorganisms.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及由核苷酸活化的糖产生游离形式的目的单糖的微生物发酵方法。碳水化合物通过在能量储存、结构功能、信号传导、信息存储等中发挥重要作用而在所有的生命形式中起作用。为了该任务，自然界合成若干种主要的单糖如葡萄糖、N-乙酰基-葡糖胺、甘露糖、N-乙酰基-甘露糖胺、果糖、岩藻糖、核糖、唾液酸、木糖等，以及用于更专门的应用的若干次要单糖，例如D-阿洛糖。L-岩藻糖(6-脱氧-L-半乳糖)和岩藻糖基化的寡糖和多糖对化学、化妆品和制药工业来说很有用，因为它们具有高的营养和生物医学应用的潜力(Hauber,H.-P.,Schuiz,M.,Pforte,A.,Mack,P.,Zabel,P.&Schumacher,U.(2008)InhalationwithfucoseandgalactosefortreatmentofPseudomonasaeroginosaincyctricfibrosispatients.Int.J.Med.Sci.5,371-376.；Isnard,N.,Bourles-DagonetF.,Robert,L.&Renard,G.(20...
【技术保护点】
用于使用微生物产生游离形式的目的单糖的方法，所述方法包括以下步骤：a.)提供用于合成所述单糖的微生物，所述微生物包含能够催化核苷酸活化的单糖的水解以从所述核苷酸活化的单糖释放目的单糖的酶，以及b.)在适于该微生物生长的培养基中培养所述微生物，其中所述微生物不能显著程度地代谢所述单糖，以便所述目的单糖在培养步骤期间累积。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.01.30 EP 15153383.31.用于使用微生物产生游离形式的目的单糖的方法，所述方法包括以下步骤：a.)提供用于合成所述单糖的微生物，所述微生物包含能够催化核苷酸活化的单糖的水解以从所述核苷酸活化的单糖释放目的单糖的酶，以及b.)在适于该微生物生长的培养基中培养所述微生物，其中所述微生物不能显著程度地代谢所述单糖，以便所述目的单糖在培养步骤期间累积。2.权利要求1的方法，其特征在于使用重组微生物，其中所述重组微生物包含编码能够催化核苷酸活化的单糖的水解的酶的异源核酸。3.权利要求1或2的方法，其特征在于所述酶为糖基转移酶，优选岩藻糖基转移酶，所述酶能够在不存在受体分子的情况下催化核苷酸活化的单糖GDP-岩藻糖的水解。4.前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述酶为由来自大肠杆菌(Escherichiacoli)的wbgL基因编码的2-岩藻糖基转移酶的变体或由来自幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori)的futC基因编码的1,2-岩藻糖基转移酶的变体；分别与由wbgL基因编码的野生型2-岩藻糖基转移酶或由futC基因编码的野生型1,2-岩藻糖基转移酶相比，所述变体携带至少一个、优选地至少两个以及更优选地多于两个修饰，所述修饰导致所述酶的水解活性提高。5.权利要求4的方法，其特征在于所述至少一个修饰为氨基酸置换。6.前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述微生物被进一步修饰以具有失活的或严重减少的或者缺乏导致所产生的单糖降解的分解代谢途径。7.前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述微生物被进一步修饰以具有失活的或严重减少的或者缺乏涉及L-岩藻糖分解代谢的基因。8.前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述微生物被进一步修饰以过表达至少一个涉及核苷酸活化的单糖的生物合成的基因以提高所述单糖的核苷酸活化的单糖的供应。9.前述权利要求中任一项的方法，其特征在于至少一个涉及GDP-岩藻糖、GDP-甘露糖或GDP-鼠李糖的生物合成的基因被过表达以分别提高GDP-岩藻糖、G...
【专利技术属性】
技术研发人员：S·詹尼温，K·帕沙特，
申请(专利权)人：詹尼温生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE
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