The invention discloses a method for quantitative detection of human parathyroid hormone (PTH) by fluorescence immunochromatographic strip and preparation method of parathyroid tissue were evaluated in the paper through the detection of double antibody sandwich method and fluorescence immunochromatographic technique PTH, the antibody is using specific epitope peptide preparation obtained. The method can detect human PTH quickly and accurately, and has the advantages of simple and fast operation, wide detection range, high specificity and good sensitivity.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫检测领域,具体涉及一种用于定量检测人甲状旁腺激素的荧光免疫层析试纸及其制备方法。
技术介绍
甲状腺癌是头颈部最常见的恶性肿瘤,也是近年来发病率增长速度最快的恶性肿瘤之一,甲状腺癌已经成为女性第五大常见恶性肿瘤。甲状腺癌的治疗主要以外科手术治疗为主,行甲状腺全切术后应尽快确定甲状旁腺功能情况,采取针对性措施进行防治甲状旁腺功能减退。手术时如果意外切除了甲状旁腺,患者的血钙浓度会明显降低,引发手足抽搐,甚至危及生命。文献报道甲状腺术后暂时性低钙血症的发生率为0.3~86%,永久性的低钙血症为0~13%。PTH是由甲状旁腺主细胞分泌,具有调节和保持血清钙在正常水平的作用。如何在手术过程中有效避免损伤甲状旁腺是一大难题。甲状旁腺术中保护技术包括甲状旁腺的识别、精细化甲状旁腺保护操作技术、补救性甲状旁腺自体移植技术三方面。甲状旁腺的识别是术中甲状旁腺保护最关键的一步。由于甲状旁腺体体积小,其周围有甲状腺、脂肪、淋巴结、胸腺、肌肉等组织,在术中辨认存在困难。即使有经验的外科医生肉眼识别的准确率也只有近70%,甲状腺术中存在高达9~19%的甲状旁腺意外切除率。目前冰冻病理仍是鉴别甲状旁腺的金标准。但这需要切除部分甲状旁腺组织,术中等待时间长,费用贵,还存在1.3%错误率,细针穿刺组织洗脱液的甲状旁腺激素(PTH)检测,用于术前和术中鉴别甲状旁腺的方法,已有文献报道。多项研究表明甲状旁腺穿刺组织洗脱液的PTH值明显高于非甲状旁腺组织,通过细针穿刺组织洗脱液的PTH检测在术中鉴别甲状旁腺组织,操作简单,敏感性和特异性高,并十分安全。目前PTH的检测一般是 ...
【技术保护点】
一种用于定量检测待测物中人甲状旁腺激素(PTH)的荧光免疫层析试纸,其特征在于,该试纸通过双抗体夹心法和荧光免疫层析技术检测人PTH,其中:所述双抗体夹心法采用标记有荧光微球的第一PTH单克隆抗体作为检测抗体,所述第一PTH单克隆抗体利用人PTH抗原表位肽(1)和(2)中的一个作为抗原制备获得;并且所述双抗体夹心法采用第二PTH单克隆抗体作为捕获抗体,所述第二单克隆抗体利用人PTH抗原表位肽(1)和(2)中的另一个作为抗原制备获得;所述人PTH抗原表位肽(1)和(2)分别为:(1):ERVEWLRKKLQ(SEQ ID NO:2)(2):RKKEDNVLVESHEKSLGEAD(SEQ ID NO:3)。
【技术特征摘要】
1.一种用于定量检测待测物中人甲状旁腺激素(PTH)的荧光免疫层析试纸,其特征在于,该试纸通过双抗体夹心法和荧光免疫层析技术检测人PTH,其中:所述双抗体夹心法采用标记有荧光微球的第一PTH单克隆抗体作为检测抗体,所述第一PTH单克隆抗体利用人PTH抗原表位肽(1)和(2)中的一个作为抗原制备获得;并且所述双抗体夹心法采用第二PTH单克隆抗体作为捕获抗体,所述第二单克隆抗体利用人PTH抗原表位肽(1)和(2)中的另一个作为抗原制备获得;所述人PTH抗原表位肽(1)和(2)分别为:(1):ERVEWLRKKLQ(SEQIDNO:2)(2):RKKEDNVLVESHEKSLGEAD(SEQIDNO:3)。2.根据权利要求1所述的荧光免疫层析试纸,其特征在于,所述单克隆抗体是由PTH抗原表位肽与载体蛋白偶联制备而成的抗原制备而得。3.根据权利要求1所述的荧光免疫层析试纸,其特征在于,所述荧光微球上的荧光物质为稀土离子铕;所述荧光微球的微球材料为聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯或甲基丙烯酸甲酯的共聚物。4.根据权利要求1所述的荧光免疫层析试纸,其特征在于,所述试纸具有底板(1),并且在该底板(1)上沿使用时的层析方向依次以接触方式设置有:样品垫(4)、结合垫(5)、硝酸纤维素膜(2)、吸水纸(3),所述结合垫(5)设置有所述标记有荧光微球的第一PTH单克隆抗体,所述硝酸纤维素膜(2)包括检测带(7)和质控带(6),所述检测带(7)固定有所述第二PTH单克隆抗体,所述质控带(6)包被有能与所述标记有荧光微球的第一PTH单克隆抗体特异性结合的抗抗体。5.根据权利要求4所述的荧光免疫层析试纸,其特征在于,所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:范俊,黄飚,戴军,邹贤,朱利国,周彬,张珏,张艺,谢敏浩,施龙顺,
申请(专利权)人:江苏省原子医学研究所,无锡市江原实业技贸总公司,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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