一种叶酸功能化二氧化硅靶向纳米药物载体的定量检测方法技术

本发明专利技术提供了一种叶酸功能化二氧化硅靶向纳米药物载体的定量检测方法，基于抗原和抗体的特异性结合采用间接竞争酶联免疫法达到检测抗原或抗体的目的；且利用酶标二抗放大检测信号的作用，从而提高了实验分析的灵敏度。步骤包括：制备SiO2‑FO包被抗原和免疫原，将免疫原注射到动物体内得到高特异性抗体，然后建立间接竞争酶联免疫法对SiO2‑FO的含量进行了检测分析。本发明专利技术检测方法快速准确、操作简单、检测限低、可进行高通量测定。

【技术实现步骤摘要】
一种叶酸功能化二氧化硅靶向纳米药物载体的定量检测方法
本专利技术涉及纳米材料的定量检测，具体涉及一种叶酸功能化二氧化硅(SiO2-FO)靶向纳米药物载体的定量检测方法。
技术介绍
恶性肿瘤严重威胁着人类的健康。在癌症的治疗中，药物治疗是一个很重要的环节，抗癌药物的有效使用可以帮助患者获得更长的生存时间。抗癌药物的研发一直是科学家关注的焦点之一，但是许多抗癌药物的溶解性低、稳定性差、易被快速代谢和清除、有副作用、缺少靶向功能等，在治疗的过程中很难充分发挥药效，已逐渐不能满足临床用药的需求。因此，无论是从人类健康，还是从社会发展的角度，发展新的技术和手段实现肿瘤有效治疗具有十分重要的意义。随着纳米技术的发展，以及各学科间的交叉融合，具有特殊物理化学性质的纳米材料在肿瘤的治疗方面显示出广阔的应用前景。近年来，肿瘤靶向药物载体系统成为众多学者研究的热点。靶向纳米药物载体的突出优点在于：①控制药物进入特定的靶器官或靶细胞，靶向输送药物；②缓释药物，延长药物作用时间；③提高制剂的稳定性及口服生物利用度；④载体材料可生物降解，无毒或毒性较低。理想的药物载体还应具有载药量大、在体内有一定的循环时间等本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种叶酸功能化二氧化硅靶向纳米药物载体的定量检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：a、SiO2‑FO包被抗原和免疫原的制备；b、抗SiO2‑FO抗体的制备；c、将SiO2‑FO包被抗原经包被液稀释后包被于酶标板中，封闭、加入不同浓度的SiO2‑FO标准品，以抗SiO2‑FO抗体作为一抗，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体作为二抗，建立间接竞争酶联免疫分析法定量检测SiO2‑FO；d、以SiO2‑FO标准品浓度的对数为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，从而定量检测出SiO2‑FO的浓度。

【技术特征摘要】
1.一种叶酸功能化二氧化硅靶向纳米药物载体的定量检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：a、SiO2-FO包被抗原和免疫原的制备；b、抗SiO2-FO抗体的制备；c、将SiO2-FO包被抗原经包被液稀释后包被于酶标板中，封闭、加入不同浓度的SiO2-FO标准品，以抗SiO2-FO抗体作为一抗，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体作为二抗，建立间接竞争酶联免疫分析法定量检测SiO2-FO；d、以SiO2-FO标准品浓度的对数为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，从而定量检测出SiO2-FO的浓度。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准曲线的线性方程为A＝0.8535-0.1083logC，其中A为490nm处的吸光度值，C为SiO2-FO浓度。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述过程a具体包括以下步骤：a-1、将SiO2-FO溶于PBS溶液中，得到水溶性的SiO2-FO溶液；a-2、将OVA溶于PBS溶液中，然后加入步骤a-1得到的SiO2-FO溶液和戊二醛溶液，25～28℃下避光搅拌2～5h；将反应液置于透析袋中透析24h即可得到SiO2-FO包被抗原；a-3、将BSA溶于PBS溶液中，然后加入步骤a-1得到的SiO2-FO溶液和戊二醛溶液，25～28℃下避光搅拌2～5h；将反应液置于透析袋中透析24h即可得到SiO2-FO免疫原。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤a具体包括以下步骤：a-1、称取10～20mgSiO2-FO溶于1～2mLPBS溶液中，磁力搅拌1～2h即得到水溶性的SiO2-FO溶液；a-2、称取10～20mgOVA溶于2～4mLPBS溶液中,并在搅拌下加入步骤a-1得到的SiO2-FO溶液，混合均匀后再滴加80～200μL25％戊二醛溶液，25～28℃下避光搅拌2～5h；将反应液置于透析袋中，用PBS透析24h后收集即可得到SiO2-FO包被抗原，其浓度为2～4mg/mL；a-3、称取10～20mgBSA溶于2～4mLPBS溶液中，并在搅拌下加入步骤a-1得到的SiO2-FO溶液，混合均匀后再滴加80～200μL25％戊二醛溶液，25～28℃下避光搅拌2～5h；将反应液置于透析袋中，用PBS透...

【专利技术属性】
技术研发人员：张明翠，夏濛，
申请(专利权)人：安徽师范大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34