一种荧光定量检测INHB的免疫层析试剂条及其制备方法技术

一种荧光定量检测INHB的免疫层析试纸条及其制备方法，本发明专利技术属于免疫诊断技术领域，本发明专利技术的目的在于针对现有技术中存在的不足，本发明专利技术采用以下技术方案：一种荧光定量检测INHB的免疫层析试纸条，由样品垫、标记垫、包被膜、吸水纸顺次搭接在PVC底板上构成，标记垫上喷涂有亲和素；质控线包被有特异性识别亲和素的兔抗亲和素抗体。本发明专利技术有如下优点：检测线和质控线采用独立的反应系统，互不干扰和影响，采用T/C值的方式进行定标，保证了测试结果的准确度。采用荧光免疫层析法，该检测方法灵敏度高、操作简单、成本低。可检测血液样本中浓度低至10 pg/mL的抑制素B，使用的检测仪无需专业操作人员，15分钟即可得到检测结果。

Immune chromatography reagent strip for fluorescent quantitative detection of INHB and preparation method thereof

Immunochromatographic test strip and preparation method of a fluorescent quantitative INHB detection, the invention belongs to the technical field of immunological diagnosis, the aim of the invention is to solve the problems existing in the existing technology, the invention adopts the following technical scheme: the immunochromatographic strip for detection of a fluorescent quantitative INHB, consists of a sample pad, pad, marker a coating film, absorbent paper sequentially overlap in PVC bottom plate, coated with streptavidin labeled pad; the control line is coated with specific recognition of avidin Rabbit anti avidin antibody. The invention has the advantages that the detecting line and the quality control line adopt an independent reaction system without interference and influence, and the calibration is carried out in the manner of T/C value, thereby ensuring the accuracy of the test result. This method has high sensitivity, simple operation and low cost. Can be detected in blood samples of low concentration to 10 pg/mL inhibin B detector without the need for professional staff, 15 minutes to get test results.

【技术实现步骤摘要】
一种荧光定量检测INHB的免疫层析试剂条及其制备方法
本专利技术属于免疫诊断
，具体涉及一种荧光定量检测抑制素B（INHB）的免疫层析试纸条及其制备方法。
技术介绍
抑制素B(inhibinB,INH-B)是睾丸来源的糖蛋白激素，成年男性体内血清抑制素B水平与FSH呈显著负相关，对FSH起负反馈作用。男性出生后不久，血清抑制素B水平逐渐上升，抑制素B与FSH之间一直维持负相关关系。20~30岁时，抑制素B水平到达高峰，此后抑制素B水平随年龄增加逐渐降低。生精功能低下与生精阻滞男性血清抑制素B水平显著低于正常生精功能男性，唯支持细胞综合征（SCO）男性血清抑制素B水平极低，SCO的发生与血清抑制素B的水平显著相关，血清抑制素B的水平还与睾丸体积、精子总数显著相关。抑制素B水平反映了整个睾丸组织的功能，是输精管道的直接产物，成年男性血清中维持可检测的抑制素B水平需要生精细胞的存在，因此抑制素B被认为是男性精子发生的血清标志物。血清抑制素B测定可用于评价男性不育病人的生精功能，儿童隐睾、性早熟的诊断，对非阻塞性无精子症病人睾丸精子抽吸的预测，监测放、化疗对男性生精功能的损伤等。目前临本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种荧光定量检测INHB的免疫层析试纸条,其特征在于，所述的免疫层析试纸条包括有PVC底板，其特征在于，所述的PCV底板上依次设有样品垫、标记垫、包被膜、吸水纸，所述的标记垫和所述的样品垫相接，所述的包被膜和所述的标记垫相接，所述的吸水纸和所述的包被膜相接，所述包被膜包含检测线和质控线，检测线和质控线间隔4~8 mm；所述标记垫上喷涂有荧光微球标记的INHB单克隆抗体和荧光微球标记的亲和素，所述检测线包被有与所述荧光微球标记的INHB单克隆抗体处于不同表位的另一种INHB单克隆抗体，所述质控线包被有特异性识别亲和素的兔抗亲和素抗体。

【技术特征摘要】
1.一种荧光定量检测INHB的免疫层析试纸条,其特征在于，所述的免疫层析试纸条包括有PVC底板，其特征在于，所述的PCV底板上依次设有样品垫、标记垫、包被膜、吸水纸，所述的标记垫和所述的样品垫相接，所述的包被膜和所述的标记垫相接，所述的吸水纸和所述的包被膜相接，所述包被膜包含检测线和质控线，检测线和质控线间隔4~8mm；所述标记垫上喷涂有荧光微球标记的INHB单克隆抗体和荧光微球标记的亲和素，所述检测线包被有与所述荧光微球标记的INHB单克隆抗体处于不同表位的另一种INHB单克隆抗体，所述质控线包被有特异性识别亲和素的兔抗亲和素抗体。2.如权利要求1所述的免疫层析试纸条,其特征在于，所述荧光微球的粒径为100~500nm。3.如权利要求1所述的免疫层析试纸条,其特征在于，所述荧光微球的激发波长为310~550nm，发射波长为340~620nm。4.一种荧光定量检测INHB的免疫层析试纸条的制备方法,其特征在于，所述的制备方法包括如下步骤：(1)荧光微球标记蛋白的制备取荧光微球，10000~15000rpm第一次离心5~15分钟，第一次离心分离得到的沉淀物用10~100mM、pH6.0~7.0磷酸盐缓冲液调节浓度为0.1%~1%，并超声分散；加入终浓度为0.1~5mg/mL的碳二亚胺，混匀，再加入终浓度为0.1~5mg/mL的N-羟基琥珀酰亚胺，混匀；室温孵育20~40分钟后10000~15000rpm第二次离心5~15分钟，第二次分离得到的沉淀物用10~100mMpH6.0~7.0磷酸盐缓冲液溶解，将复溶后的荧光微球超声分散，按照0.1~1.0mg/mL荧光微球的比例分别加入INHB单克隆抗体和亲和素，混匀后室温旋转混合反应1.5~3小时，10000~15000rpm第三次离心离心5~15分钟，第三次离心分离得到的沉淀物用10~40mM、pH7.0-8.0含10~40mM乙醇胺和0.05%-1%酪蛋白的Tris-HCl复溶，超声分散后旋转混合反应0.5~1小时;10000~15000rpm第四次离心5~15分钟，第四次离心分离得到沉淀物用微球保存液复...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡鹍辉，钱纯亘，夏福臻，张赛，宋永波，
申请(专利权)人：深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44