转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测引物、探针、方法和试剂盒技术

本发明专利技术公开了转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测引物、探针、方法和试剂盒。本发明专利技术针对转基因甜菜GTSB77品系转入的基因盒3’端gox区域与甜菜基因组邻接区序列设计引物和探针，建立转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测方法，具有特异性好、灵敏度高、可重复性良好等优点，扩增效率为101％，最低定量检测下限为16copies。有效的解决了现有技术中无转基因甜菜GTSB77品系特异性精准定量检测技术的问题，该方法可应用于进出境口岸检验检疫、国内农业产品食品监管的转基因甜菜GTSB77及其产品的检测。

【技术实现步骤摘要】
转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测引物、探针、方法和试剂盒
：本专利技术属于转基因产品检测领域，具体涉及转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测引物、探针、方法和试剂盒。
技术介绍
：目前上市的转基因甜菜品系共有三个：GTSB77、T120-7和H7-1，其中H7-1已获得我国农业部批准用于饲料。转基因甜菜GTSB77是由诺华公司和孟山都公司通过农杆菌介导法将导入甜菜，研发出具抗草甘膦除草剂抗性的甜菜品系，商品名为：InVigorTMsugarbeet。1998年-2004年间，美国、日本、加拿大、澳大利亚、菲律宾相继批准甜菜GTSB77品系作为食品或饲料用途，中国尚未批准转基因甜菜GTSB77批准用于食品和饲料。目前美国和加拿大95％以上种植的甜菜均为转基因甜菜。GTSB77(Glyphosate-tolerantsugarbeetline77)由转入三个基因研发而成：cp4-epsps基因、uidA基因和修饰过的gox基因。cp4-epsps基因和gox基因均为草甘膦除草剂耐受基因(cp4-epsps基因编码5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶对草甘膦本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测引物，其特征在于，所述的检测引物如下所示：GTSB77‑F：5’‑AACGTGGATACCACATCGTGATC‑3’；GTSB77‑R：5’‑GAAGTCCAAATCAGCCGAAATTT‑3’。

【技术特征摘要】
1.一种转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测引物，其特征在于，所述的检测引物如下所示：GTSB77-F：5’-AACGTGGATACCACATCGTGATC-3’；GTSB77-R：5’-GAAGTCCAAATCAGCCGAAATTT-3’。2.一种转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测探针，其特征在于，所述的检测探针如下所示：GTSB77-P：5’-CCCAGAAGCTGCTCCACGTATTCCAA-3’，探针的5’端标记有荧光报告基团，3'端标记有荧光淬灭基团。3.根据权利要求2所述的转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测探针，其特征在于，所述的荧光报告基团为FAM，所述的荧光淬灭基团为BHQ1。4.一种转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测试剂盒，包括实时荧光定量PCR反应液、耐热DNA聚合酶、检测引物和检测探针，其特征在于，所述的检测引物如下所示：GTSB77-F：5’-AACGTGGATACCACATCGTGATC-3’；GTSB77-R：5’-GAAGTCCAAATCAGCCGAAATTT-3’；所述的检测探针如下所示：GTSB77-P：5’-CCCAGAAGCTGCTCCACGTATTCCAA-3’，探针的5’端标记有荧光报告基团，3'端标记有荧光淬灭基团。5.一种转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取样品的基因组DNA作为模板；(2)加入权利要求1所述的检测引物和权利要求2所述的检测探针，与实时荧光定量PCR反应液及耐热DNA聚合酶混合形成扩增反应体系；(3)将扩增反应体系在荧光PCP仪上进行实时荧光PCR反应，反应结束后，根据扩增曲线判断样品是否为转基因甜菜GTSB77品系。6.根据权利要求5所述的转基因甜菜GTSB77品系特异性实时荧光PCR检测方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘二龙，卢丽，吕英姿，袁慕云，蒋湘，苏彩珠，李嘉琪，樊武疆，林先准，李培深，吴险峰，陈毅锋，
申请(专利权)人：中华人民共和国黄埔出入境检验检疫局，
类型：发明
国别省市：广东,44