一种MDA‑MB‑231乳腺癌细胞的复苏方法技术

技术编号:16211793 阅读:117 留言:0更新日期:2017-09-15 17:41
本发明专利技术提供了一种MDA‑MB‑231乳腺癌细胞的复苏方法,将冻存的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞冻存管从液氮或者‑80℃冰箱中取出,在取出后1min内于37℃摇晃至含有冻存液的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞液完全融化,将MDA‑MB‑231乳腺癌细胞液加入到盛有2‑3ml新鲜培养基的离心管中,用移液枪上下吹打20‑30次,于1000‑1500g/min的转速下离心3‑10min;移去上清液,加入1‑2ml的新鲜培养基,用移液枪上下吹打40‑50次,然后均匀的加入到盛有7‑9ml的细胞培养皿中,于37℃,5%CO2培养箱中培养。

【技术实现步骤摘要】
一种MDA-MB-231乳腺癌细胞的复苏方法
本专利技术属于生物技术应用领域,具体地,涉及一种MDA-MB-231乳腺癌细胞的复苏方法。
技术介绍
乳腺癌是女性最常见的癌症,主要包括导管癌和小叶癌。2016年美国CA(ACancerJournalforClinicians)公布的最新统计数据显示,美国2016年预计将有420840例女性患乳腺癌,占女性新发恶性肿瘤的38%,居女性恶性肿瘤发病率第一位,并且死亡人数将达52930例。更为严重的是全球的乳腺癌发病率正在逐年增长。细胞培养是生物与健康相关研究领域的一项重要技术。随着生命科学的迅速发展,目前细胞培养已成为细胞生物学、分子生物学、遗传学和免疫学等学科研究的重要基础。为了深入探讨细胞的生长活动规律、有关疾病的病理和药物的药理(毒理)机制,开发具有不同针对性的细胞培养方法具有重要意义。其中,MDA-MB-231乳腺癌细胞作为人源性高转移乳腺癌细胞,常用于乳腺癌的体内外研究。细胞复苏是培养细胞的一种,是生命及再生医学领域中广泛应用的关键技术,在研究中往往需要对冻存的细胞进行复苏,从而进行乳腺癌转移的相关研究。本专利技术所述的MDA-M本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种MDA‑MB‑231乳腺癌细胞的复苏方法,其特征在于:包括以下步骤:将冻存的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞冻存管从液氮或者‑80℃冰箱中取出,在取出后1min内于37℃摇晃至含有MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用冻存液的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞液完全融化,将MDA‑MB‑231乳腺癌细胞液加入到盛有2‑3ml新鲜MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用培养基的离心管中,用移液枪上下吹打20‑30次,于1000‑1500g/min的转速下离心3‑10min;移去上清液,加入1‑2ml的新鲜MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用培养基,用移液枪上下吹打40‑50次,然后均匀的加入到盛有7‑9ml的...

【技术特征摘要】
1.一种MDA-MB-231乳腺癌细胞的复苏方法,其特征在于:包括以下步骤:将冻存的MDA-MB-231乳腺癌细胞冻存管从液氮或者-80℃冰箱中取出,在取出后1min内于37℃摇晃至含有MDA-MB-231乳腺癌细胞专用冻存液的MDA-MB-231乳腺癌细胞液完全融化,将MDA-MB-231乳腺癌细胞液加入到盛有2-3ml新鲜MDA-MB-231乳腺癌细胞专用培养基的离心管中,用移液枪上下吹打20-30次,于1000-1500g/min的转速下离心3-10min;移去上清液,加入1-2ml的新鲜MDA-MB-231乳腺癌细胞专用培养基,用移液枪上下吹打40-50次,然后均匀的加入到盛有7-9ml的新鲜MDA-MB-231乳腺癌细胞专用培养基的细胞培养皿中,于37℃,5%CO2培养箱中培养;所述MDA-MB-231乳腺癌细胞专用冻存液以重量组分计,包括以下组分:二甲基亚砜5-15份、羟甲基淀粉2-5份、海藻糖3-12份、维生素E0.5-3份、25%山梨醇1-5份、丙二醇0.8-1.6份、(S)-(-)-1-(4-氟异喹啉-5-基)磺酰基-2-甲基-1,4-二氮环庚烷0.5-2份和基础培养基80-90份。2.根据权利要求1所述的MDA-MB-231乳腺癌细胞的复苏方法,其特征在于:所述MDA-MB-231乳腺癌细胞专用培养基包括70-90%的基础培养基以及10-30%的胎牛血清。3.根据权利要求1或2所述的MDA-MB-231乳腺癌细胞的复苏方法,其特征在于:所述基础培养基以重量组分计,包括以下组分:葡萄糖82-88份、碳酸氢钠12-25份、丙酮酸钠10-16份、脂肪酸白蛋白6-12份、氯化钾35-45份、无水硫酸镁6-10份、氯化钠70-78份、无水磷酸二氢钠10-14份、叶酸0.3-0...

【专利技术属性】
技术研发人员:曹先艳王文峰施亮
申请(专利权)人:太仓东浔生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏,32

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