抗流感病毒剂及抗流感病毒剂的筛选方法技术

本发明专利技术提供一种将以人为代表的宿主细胞的生物分子作为靶标的抗流感病毒剂、以及筛选该抗流感病毒剂的候选分子的筛选方法。即，本发明专利技术是一种抗流感病毒剂，其特征在于，其具有抑制对蛋白质进行编码的基因的表达或功能的作用，所述蛋白质对宿主细胞内的流感病毒的vRNA或NP蛋白质进入流感病毒样颗粒中具有抑制作用，所述基因是选自由JAK1基因等所组成的组中的一种以上。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗流感病毒剂及抗流感病毒剂的筛选方法
本专利技术涉及一种将以人为代表的宿主细胞的生物分子作为靶标的抗流感病毒剂、以及对该抗流感病毒剂的候选分子进行筛选的方法。本申请基于2014年9月22日提出的日本申请特愿2014-192752号要求优先权，在此援引其内容。
技术介绍
流感病毒每年都引发疫病，有时会引发导致几百万人伤亡的大流行流感(Pandemic)。因此，要求开发更有效的抗流感病毒剂。作为抗流感病毒剂的靶分子，优选相比于病毒蛋白质，有助于病毒的感染、复制的宿主细胞的生物分子。这是因为，对宿主细胞的生物分子而言，相比于病毒蛋白，难以产生因药剂的选择压力而导致的变异。近年来，通过6个全基因组筛选，鉴定了被认为在流感病毒的生命周期中发挥着某种作用的总计为1449个人类基因(包含110个果蝇(Drosophila)基因的人类同源基因。)(参见非专利文献1～6。)。各全基因组筛选的结果分别是仅有一部分一致，但推测是因为实验条件不同而造成的。现有技术文献非专利文献非专利文献1：Brass，etal.，Cell，2009，vol.139，p.1243～1254；非专利文献2：Hao，etal.，Nature，2008，vol.454，p.890～893；非专利文献3：Karlas，etal.，Nature，2010，vol.463，p.818～822；非专利文献4：Konig，etal.，Nature，2010，vol.463，p.813～817；非专利文献5：Shapira，etal.，Cell，2009，vol.139，p.1255～1267；非专利文献6：Sui，etal.，Virology，2009，vol.387，p.473～481；非专利文献7：Neumann，etal.，ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmerica，1999，vol.96，p.9345～9350；非专利文献8：Tobita，etal.，Medicalmicrobiologyandimmunology，1975，vol.162，p.9～14；非专利文献9：Ozawaetal.,JournalofGeneralVirology，2011，vol.92，p.2879～2888；非专利文献10：Octavianietal.，JournalofVirology，2010，vol.84，p.10918～10922；非专利文献11：Kawakamietal.，JournalofVirologicalMethods，2011，vol.173，p.1～6；非专利文献12：Wishartetal.，NucleicAcidsResearch，2006，vol.34，p.D668～672；非专利文献13：Pattersonetal.，JournalofGeneralVirology，1979，vol.43，p.223～229；非专利文献14：Widjajaetal.，JournalofVirology，2010，vol.84，p.9625～9631；非专利文献15：Nodaetal.，Nature，2006，vol.439，p.490～492。
技术实现思路
专利技术所要解决的问题通过几个全基因组筛选，与流感病毒的复制等有关的宿主细胞的蛋白质被确定。然而，这些蛋白质如何影响流感感染症还尚未明确，是否能成为新的抗流感病毒剂的候选分子还不明确。本专利技术的主要目的在于提供一种抗流感病毒剂，该抗流感病毒剂以作为以人为代表的宿主细胞内的生物分子的、参与流感病毒的生命周期的蛋白质为靶标，本专利技术的目的还在于提供一种新的抗流感病毒剂的候选分子的筛选方法。解决问题的技术方案本专利技术人等进行了精心的研究，其结果是，通过利用来自人胚肾的HEK293细胞的细胞溶解液的免疫沉降法，对与流感病毒蛋白质具有相互作用的1292个人类蛋白质进行确定，然后，利用RNA干涉，从这些人类蛋白质中，确定出抑制其表达量时不会显著损害宿主细胞的增殖性、而使流感病毒的增殖被显著抑制的蛋白质，从而完成了本专利技术。即，本专利技术的抗流感病毒剂以及抗流感病毒剂的筛选方法为下述[1]～[10]。[1]一种抗流感病毒剂，其特征在于，具有抑制对蛋白质进行编码的基因的表达的作用、或者抑制所述蛋白质的功能的作用，所述蛋白质参与宿主细胞内的流感病毒的vRNA或NP蛋白质向流感病毒样颗粒中的进入，所述基因是选自由JAK1基因、CHERP基因、DDX21基因、DNAJC11基因、EEF1A2基因、HNRNPK基因、ITM2B基因、MRCL3基因、MYH10基因、NDUFS8基因、PSMD13基因、RPL26基因、SDF2L1基因、SDF4基因、SFRS2B基因、SNRPC基因、SQSTM1基因、TAF15基因、TOMM40基因、TRM2B基因、USP9X基因、BASP1基因、THOC2基因、PPP6C基因、TESC基因以及PCDHB12基因所组成的组中的一种以上。[2]如所述[1]中的抗流感病毒剂，所述基因为JAK1基因或USP9X基因。[3]如所述[1]中的抗流感病毒剂，所述抗流感病毒剂是选自由鲁索利替尼(Ruxolitinib)、托法替尼(Tofacitinib)、托法替尼(Tofacitinib)(CP-690550)柠檬酸盐(Citrate)、酪氨酸磷酸化抑制剂(Tyrphostin)B42(AG-490)、巴瑞克替尼(Baricitinib)(LY3009104、INCB028050)、AT9283、莫米洛替尼(Momelotinib)、CEP33779、NVP-BSK805、ZM39923、非哥替尼(Filgotinib)、JANEX-1、NVP-BSK805、SB1317以及WP1130所组成的组中的一种以上。[4]一种抗流感病毒剂，其特征在于，具有抑制对蛋白质进行编码的基因的表达的作用、或者抑制所述蛋白质的功能的作用，所述蛋白质参与宿主细胞内的流感病毒的复制或转录，所述基因是选自由CCDC56基因、CLTC基因、CYC1基因、NIBP基因、ZC3H15基因、C14orf173基因、ANP32B基因、BAG3基因、BRD8基因、CCDC135基因、DDX55基因、DPM3基因、EEF2基因、IGF2BP2基因、KRT14基因以及S100A4基因所组成的组中的一种以上。[5]一种抗流感病毒剂，其特征在于，具有抑制对蛋白质进行编码的基因的表达的作用、或者抑制所述蛋白质的功能的作用，所述蛋白质参与宿主细胞内的流感病毒样颗粒的形成，所述基因是选自由GBF1基因、ASCC3L1基因、BRD8基因、C19orf43基因、DDX55基因、DKFZp564K142基因、DPM3基因、EEF2基因、FAM73B基因、FLJ20303基因、NCLN基因、C14orf173基因、LRPPRC基因以及RCN1基因所组成的组中的一种以上。[6]如所述[5]中的抗流感病毒剂，所述基因为GBF1基因。[7]如所述[5]中的抗流感病毒剂，所述抗流感病毒剂为GolgicideA。[8]一种抗流感病毒剂的筛选方法，其是对抗流感病毒剂的候选化合物进行筛选的方法，其特征本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗流感病毒剂，其特征在于，具有抑制对蛋白质进行编码的基因的表达的作用、或者抑制所述蛋白质的功能的作用，所述蛋白质参与宿主细胞内的流感病毒的vRNA或NP蛋白质向流感病毒样颗粒中的进入，所述基因是选自由JAK1基因、CHERP基因、DDX21基因、DNAJC11基因、EEF1A2基因、HNRNPK基因、ITM2B基因、MRCL3基因、MYH10基因、NDUFS8基因、PSMD13基因、RPL26基因、SDF2L1基因、SDF4基因、SFRS2B基因、SNRPC基因、SQSTM1基因、TAF15基因、TOMM40基因、TRM2B基因、USP9X基因、BASP1基因、THOC2基因、PPP6C基因、TESC基因以及PCDHB12基因所组成的组中的一种以上。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.09.22 JP 2014-1927521.一种抗流感病毒剂，其特征在于，具有抑制对蛋白质进行编码的基因的表达的作用、或者抑制所述蛋白质的功能的作用，所述蛋白质参与宿主细胞内的流感病毒的vRNA或NP蛋白质向流感病毒样颗粒中的进入，所述基因是选自由JAK1基因、CHERP基因、DDX21基因、DNAJC11基因、EEF1A2基因、HNRNPK基因、ITM2B基因、MRCL3基因、MYH10基因、NDUFS8基因、PSMD13基因、RPL26基因、SDF2L1基因、SDF4基因、SFRS2B基因、SNRPC基因、SQSTM1基因、TAF15基因、TOMM40基因、TRM2B基因、USP9X基因、BASP1基因、THOC2基因、PPP6C基因、TESC基因以及PCDHB12基因所组成的组中的一种以上。2.如权利要求1所述的抗流感病毒剂，其中，所述基因是JAK1基因或USP9X基因。3.如权利要求1所述的抗流感病毒剂，其中，所述抗流感病毒剂是选自由鲁索利替尼、托法替尼、托法替尼(CP-690550)柠檬酸盐、酪氨酸磷酸化抑制剂B42(AG-490)、巴瑞克替尼(LY3009104、INCB028050)、AT9283、莫米洛替尼、CEP33779、NVP-BSK805、ZM39923、非哥替尼、JANEX-1、NVP-BSK805、SB1317以及WP1130所组成的组中的一种以上。4.一种抗流感病毒剂，其特征在于，具有抑制对蛋白质进行编码的基因的表达的作用、或者抑制所述蛋白质的功能的作用，所述蛋白质参与宿主细胞内的流感病毒的复制或转录，所述基因是选自由CCDC56基因、CLTC基因、CYC1基因、NIBP基因、ZC3H15基因、C14orf173基因、ANP32B基因、BAG3基因、BRD8基因、CCDC135基因、DDX55基因、DPM3基因、EEF2基因、IGF2BP2基因、KRT14基因以及S100A4基因所组成的组中的一种以上。5.一种抗流感病毒剂，其特征在于，具有抑制对蛋白质进行编码的基因的表达的作用、或者抑制所述蛋白质的功能的作用，所述蛋白质参与宿主细胞内的流感病毒样颗粒的形成，所述基因是选自由GBF1基因、ASCC3L1基因、BRD8基因、C19orf43基因、DDX55基因、DKFZp564K142基因、DPM3基因、EEF2基因、...

【专利技术属性】
技术研发人员：河冈义裕，渡边登喜子，川上英良，渡边真治，
申请(专利权)人：国立研究开发法人科学技术振兴机构，
类型：发明
国别省市：日本,JP