A method for synthesizing 6 6-Benzylamino adenine artificial antigen, which belongs to the technical field of bio chemical industry. The invention takes 6 chloropurine and 4 (An Jiaji) benzoic acid substituted products containing carboxyl 6 BA as a hapten. The carbon two imide method hapten 6 BA conjugated with carrier protein BSA were characterized by UV spectrophotometry, and the determination of conjugate coupling ratio. The present invention successfully synthesized 6 6-Benzylamino adenine 6 BA artificial antigen BSA, synthesis procedure is simple, safe and effective, can be used for immune analysis, provides the necessary artificial antigen for future research.
【技术实现步骤摘要】
一种6-苄氨基腺嘌呤人工抗原的合成方法
本专利技术涉及一种6-苄氨基腺嘌呤人工抗原的合成方法,属于生物化工
技术介绍
6-苄氨基腺嘌呤(6-Benzylaminopurine,6-BA)是一种人工合成的植物生长激素,主要作为促长剂和保鲜剂使用,能够促进与调节植物生长发育以及蔬菜、水果的保鲜和储存。6-BA是第一个人工合成的细胞分裂素,主要成份是嘌呤类生物碱和一些无机物,在细胞分裂素中具有较高活性。6-BA作为植物促长剂和果蔬保鲜剂的主要成分,已在国内外进入应用阶段。作为植物促长剂使用,可以提高种子发芽率,促进幼苗生长,最终提高产率,常被用于促进豆芽的生长,提高烟叶的产量等。在作物生长过程中,6-BA能够起到将氨基酸生长素、无机盐等向植物的茎、根等部位输运的作用,改善其生长。另外6-BA还能够通过抑制植物内的叶绿素、核酸、蛋白质分解、抑制呼吸等方式对作物防衰保鲜,因此6-BA适用于各种绿叶蔬菜(如青椒、黄瓜、豆角等)贮藏前使用。6-苄氨基腺嘌呤已被广泛应用于农业、果树栽培和园艺等领域。因此6-BA在市售水果和蔬菜中一般都有一定的残留,而人体摄入6-BA过多会刺激食道、胃黏膜,造成食道、胃黏膜损伤,出现恶心、呕吐等现象。国家标准GB2760-1996将6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)作为允许使用的食品添加剂,同时也规定了其最高允许使用限量(0.01g/kg)和最高允许残留量(0.20mg/kg)。然而,目前一方面国内外至今尚未建立6-苄氨基腺嘌呤进出口产品质量的检测标准及其测定方法,这给6-BA的生产使用和进出口贸易以及食品卫生监督与监测工作带来很大的阻 ...
【技术保护点】
一种6‑苄氨基腺嘌呤人工抗原的合成方法,其特征在于采用由6‑氯嘌呤和4‑(氨甲基)苯甲酸取代得到的产物作为半抗原,以下简称为6‑BA,再用碳二亚胺法将半抗原6‑BA与载体蛋白偶联,即得到6‑苄氨基腺嘌呤的人工抗原;步骤为:(1)半抗原6‑BA的合成:合成路线如下:
【技术特征摘要】
1.一种6-苄氨基腺嘌呤人工抗原的合成方法,其特征在于采用由6-氯嘌呤和4-(氨甲基)苯甲酸取代得到的产物作为半抗原,以下简称为6-BA,再用碳二亚胺法将半抗原6-BA与载体蛋白偶联,即得到6-苄氨基腺嘌呤的人工抗原;步骤为:(1)半抗原6-BA的合成:合成路线如下:称取化合物16-氯嘌呤2.00g和三乙胺2.60g,溶解于20mL的叔丁醇中,在N2的保护下,向该溶液中加入4-(氨甲基)苯甲酸1.96g,回流72h;冷却至室温,过滤,获得2.10g黄色固体,即化合物2;称取化合物21.70g,加入20mL甲醇溶解,在0℃条件下,向该溶解液中逐滴加入二氯亚砜0.85mL,然后加热至室温,搅拌过夜;将反应液减压浓缩,并通过硅胶柱纯化,最终获得白色固体108mg,即化合物3;用3mL6MHCl溶液溶解300mg化合物3,在80℃条件下搅拌过夜,减压浓缩除去溶剂,获得白色固体140mg,即半抗原6-BA;(2)完全抗原6-BA-BSA的制备:采用碳二亚胺法将步骤(1)获得的半抗原6-BA与牛血清白蛋白BSA偶联,得到偶联物完全抗原6-BA-BS...
【专利技术属性】
技术研发人员:胥传来,李月,匡华,徐丽广,马伟,刘丽强,吴晓玲,宋珊珊,胡拥明,
申请(专利权)人:江南大学,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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