疏水性半抗原分析物的精确测定测量制造技术

公开了用于测定怀疑含有疏水性半抗原分析物的未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度的方法，其中所述未知样品怀疑含有干扰物质。对未知样品进行第一测定方法以获得未知样品中的疏水性半抗原分析物的测量浓度。对未知样品进行第二测定方法以获得未知样品中的干扰物质的浓度。应用利用步骤(a)中获得的疏水性半抗原分析物的测量浓度和干扰物质的测量浓度的预先确定的校正公式，以测定未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度。

Accurate determination of hydrophobic hapten analytes

A method is disclosed for determining the actual concentration of a hydrophobic hapten analyte suspected in a sample containing a hydrophobic hapten analyte, wherein the unknown sample is suspected of containing interfering substances. A first determination method for an unknown sample is carried out to obtain the measured concentration of a hydrophobic hapten analyte in an unknown sample. Second unknown samples were used to obtain the concentration of interfering substances in unknown samples. Application of step (a) to obtain hydrophobic hapten concentrations measurement and analysis of measurement of concentration and interfering substances previously determined correction formula, to the actual concentration determination of the analyte in the unknown sample of hydrophobic hapten.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】疏水性半抗原分析物的精确测定测量本申请根据35USC§119(e)主张2014年12月17日提交的美国临时申请号62/093,105的权益。上面引用的专利申请的全部内容在此通过引用明确并入本文。背景本专利技术涉及用于测定怀疑含有分析物的样品中分析物的浓度的方法。更具体地，本专利技术涉及减少干扰物质对上述测定样品中分析物的浓度的方法期间进行的测量的影响。疏水性化合物诸如，例如药物，维生素诸如例如维生素D和维生素B12，以及半抗原激素，通常存在于脂蛋白(其替代分析物标记物是胆固醇)的疏水核心中，胆固醇存在于所有脂蛋白，包括低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、中密度脂蛋白(IDL)、高密度脂蛋白(HDL)和乳糜微粒。如上所述，维生素D是一种此疏水性化合物。通过UV光形成维生素D后，其通过血液中的脂蛋白和维生素D结合蛋白(VDBP)转运。在不使用有机溶剂诸如例如醇提取维生素D的维生素D的测定中，使用合适的释放剂从VDBP释放维生素D。然而，脂蛋白核心中的维生素D分子留在脂蛋白的核心中，并且对于大部分未被触及。提取测定法是费力的，并且如上所提及，涉及对样品使用有机溶剂。因此，维生素D或其他疏水性化合物的大多数免疫测定法受样品中的一种或多种干扰物质(诸如例如胆固醇和脂蛋白)负面影响，因为未从干扰物质(诸如例如脂蛋白的核心)释放的维生素D分子不是免疫测定法中使用的抗体可及的。样品中维生素D的实际量可能无法准确测定，并且在免疫测定法中观察到的维生素D的量可能被错误地升高或抑制。评价生物样品中的维生素D水平是重要的，因为维生素D缺乏与哺乳动物中的许多疾病相关。持续需要开发快速和准确的诊断方法来测量取自患者的样品中疏水性半抗原分析物的水平。所述方法应当是完全可自动化的，并且是准确的，甚至当对具有各种干扰物质的样品进行时也是如此。测定方法应当提供样品中疏水性半抗原分析物的量的精确测量，同时尽可能降低由样品中存在的干扰物质导致的不准确性。概述根据本文所述的原理的一些实例涉及测定怀疑含有疏水性半抗原分析物的未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度的方法，其中所述未知样品怀疑含有干扰物质。对未知样品进行第一测定方法以获得未知样品中的疏水性半抗原分析物的测量浓度。对未知样品进行第二测定方法以获得未知样品中的干扰物质的浓度。应用利用步骤(a)中获得的疏水性半抗原分析物的测量浓度和干扰物质的测量浓度的预先确定的校正公式，以测定未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度。校正公式通过包括以下的方法预先确定：(i)使用第一测定方法测量至少两种不同样品的疏水性半抗原分析物的浓度，且使用参考方法测量至少两种不同样品的疏水性半抗原分析物的浓度，其中所述至少两种不同样品还包含干扰物质，(ii)确定第一测定方法和参考方法之间的偏差，其中所述偏差是每种不同样品的通过参考方法和第一测定方法测定的疏水性半抗原分析物的浓度之间的差异，(iii)测量所述至少两种不同样品各自的干扰物质的浓度，且(iv)通过使用所述至少两种不同样品各自中的偏差和干扰物质的浓度进行回归分析来确定校正公式。根据本文所述的原理的一些实例涉及测定怀疑含有维生素D分析物的未知样品中的维生素D分析物的实际浓度的方法，其中所述未知样品怀疑含有胆固醇。对未知样品进行第一测定方法以获得未知样品中的维生素D分析物的测量浓度。对未知样品进行第二测定方法以获得胆固醇的浓度。应用利用步骤(a)中获得的维生素D分析物的测量浓度和胆固醇的测量浓度的预先确定的校正公式，以测定未知样品中的维生素D分析物的实际浓度。校正公式通过包括以下的方法预先确定：(i)使用第一测定方法测量至少两种不同样品的维生素D分析物的浓度，且使用参考方法测量至少两种不同样品各自的维生素D分析物的浓度，其中所述样品还包含胆固醇，(ii)确定第一测定方法和参考方法之间的偏差，其中所述偏差是至少两种不同样品各自的通过参考方法和测定方法测定的维生素D分析物的浓度之间的差异，(iii)测量所述至少两种不同样品各自中的胆固醇的浓度，且(iv)通过使用所述至少两种不同样品各自中的偏差和胆固醇的浓度进行回归分析来确定校正公式。附图简述本文提供的附图不是按比例的，并且为了便于理解根据本文所述的原理的某些实例的目的而提供，并且通过说明而非限制所附权利要求的范围的方式来提供。图1是描绘针对样品集合的每个成员的胆固醇浓度绘制的偏差(通过从相同样品集合上的维生素D的免疫测定结果减去样品集合上的维生素D的液相色谱-质谱(LCMS)测定的结果而获得)的图。图2是描绘针对样品集合的每个成员的胆固醇浓度绘制的图1的偏差(基于获得的校正公式校正)的图。图3是描绘针对通过参考方法测量的维生素D的浓度绘制的通过免疫测定测量的维生素D的浓度(不应用校正公式)的图。图4是描绘针对通过参考方法测量的维生素D的浓度绘制的通过免疫测定测量的维生素D的浓度(应用校正公式)的图。具体实施方案的详述总体讨论根据本文所述的原理的方法的实例提供了取自宿主的样品中的疏水性半抗原分析物的精确测量，其中所述样品含有一种或多种干扰物质，其影响精确地检测疏水性半抗原分析物的能力。在根据本文所述的原理的方法的实例中，通过使用测定方法测量未知样品的一部分中疏水性半抗原分析物的浓度和使用另一种通常不同的测定方法测量未知样品的另一部分中干扰物质的浓度和应用利用上述测量值两者的预先确定的校正公式来校正疏水性半抗原分析物的测量浓度，以获得未知样品中疏水性半抗原分析物的精确测量值。在一些实例中，干扰物质的浓度的测量作为测试组(其还包括疏水性半抗原分析物的测量)的一部分进行。校正公式通过包括以下的方法预先确定：(i)使用第一测定方法测量至少两种不同样品的疏水性半抗原分析物的浓度，且使用参考方法测量两种不同样品各自的疏水性半抗原分析物的浓度，其中所述样品还包含干扰物质，(ii)确定第一测定方法和参考方法之间的偏差，其中所述偏差是两种不同样品各自的通过参考方法和第一测定方法测定的疏水性半抗原分析物的浓度之间的差异，(iii)测量所述两种不同样品各自中的干扰物质的浓度，且(iv)通过使用所述至少两种不同样品各自的偏差和干扰物质的浓度进行回归分析来确定校正公式。本专利技术人发现使用如上所讨论的校正公式导致疏水性半抗原分析物的更准确的确定，而无论在校正公式不存在的情况下干扰物质引起测定测量值是过高还是过低。短语“疏水性半抗原分析物”是指这样的分析物，其具有小于约2,500、或小于约2,000、或小于约1,500、或小于约1,000、或小于约500的分子量，并且在例如约100至约2,500、或约300至约2,500、或约300至约2,000、或约300至约1,500、或约300至约1,000、或约500至约2,500、或约500至约2,000、或约500至约1,500、或约500至约1,000的分子量范围内。疏水性半抗原分析物是脂溶性的，这意味着疏水性半抗原分析物可溶于例如脂肪、油和脂质中的一种或多种。在一些实例中，所述疏水性半抗原分析物包括但不限于例如维生素、滥用药物、治疗药物和类固醇激素。维生素包括但不限于例如维生素D、维生素B12、维生素E和维生素K。类固醇激素包括，通过说明而不是限制的方式，例如孕激素、雌激本文档来自技高网...

【技术保护点】
测定怀疑含有疏水性半抗原分析物的未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度的方法，其中所述未知样品怀疑含有干扰物质，所述方法包括：(a)对未知样品进行第一测定方法以获得所述未知样品中的疏水性半抗原分析物的测量浓度和对所述未知样品进行第二测定方法以获得所述未知样品中的干扰物质的浓度；和(b)应用利用步骤(a)中获得的所述疏水性半抗原分析物的测量浓度和所述干扰物质的测量浓度的预先确定的校正公式，以测定所述未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度，其中所述校正公式通过包括以下的方法预先确定：(i)使用所述第一测定方法测量至少两种不同样品的疏水性半抗原分析物的浓度和使用参考方法测量至少两种不同样品的疏水性半抗原分析物的浓度，其中所述样品还包含所述干扰物质，(ii)确定第一测定方法和参考方法之间的偏差，其中所述偏差是每种不同样品的通过参考方法和第一测定方法测定的疏水性半抗原分析物的浓度之间的差异；(iii)测量所述至少两种不同样品的干扰物质的浓度，和(iv)通过使用所述至少两种不同样品各自的偏差和干扰物质的浓度进行回归分析来确定校正公式。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.12.17 US 62/0931051.测定怀疑含有疏水性半抗原分析物的未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度的方法，其中所述未知样品怀疑含有干扰物质，所述方法包括：(a)对未知样品进行第一测定方法以获得所述未知样品中的疏水性半抗原分析物的测量浓度和对所述未知样品进行第二测定方法以获得所述未知样品中的干扰物质的浓度；和(b)应用利用步骤(a)中获得的所述疏水性半抗原分析物的测量浓度和所述干扰物质的测量浓度的预先确定的校正公式，以测定所述未知样品中的疏水性半抗原分析物的实际浓度，其中所述校正公式通过包括以下的方法预先确定：(i)使用所述第一测定方法测量至少两种不同样品的疏水性半抗原分析物的浓度和使用参考方法测量至少两种不同样品的疏水性半抗原分析物的浓度，其中所述样品还包含所述干扰物质，(ii)确定第一测定方法和参考方法之间的偏差，其中所述偏差是每种不同样品的通过参考方法和第一测定方法测定的疏水性半抗原分析物的浓度之间的差异；(iii)测量所述至少两种不同样品的干扰物质的浓度，和(iv)通过使用所述至少两种不同样品各自的偏差和干扰物质的浓度进行回归分析来确定校正公式。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一测定方法包括：(i)向包含所述样品的介质中添加用于测定所述样品中疏水性半抗原分析物的测量浓度的试剂，其中所述试剂包含至少一种疏水性半抗原分析物的结合配偶体，和(ii)在使所述疏水性半抗原分析物与所述疏水性半抗原分析物的结合配偶体结合的条件下孵育所述介质。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一测定方法是免疫测定法。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述疏水性半抗原分析物选自脂溶性维生素、类固醇激素、治疗药物和滥用药物。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述疏水性半抗原分析物是维生素D。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述样品是机体排泄物、机体抽吸物、机体切割物或机体提取物。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述参考方法选自质谱法、液相色谱法、电泳、微流控、显微镜检查、光谱学、化学测定法和免疫测定法及其两种或更多种的组合。8.根据权利要求1所述的方法，其中所述回归分析包括形成回归线且从回归线开发校正公式。9.根据权利要求1所述的方法，其中所述回归分析包括形成回归线和使用回归线的斜率和截距来形成以下校正公式：[An]=[mAn]+(ax[mIS]+b)其中：[An]是未知样品中疏水性半抗原分析物的实际浓度，[mAn]是未知样品中疏水性半抗原分析物的测量浓度，[mIS]是未知样品中干扰物质的测量浓度，a是回归线的斜率，且b是回归线的截距。10.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一测定方法包括：在测定介质中将所述样品与(i)能够结合疏水性半抗原分析物以形成复合物的疏水性半抗原分析物的抗体和(ii)产生与疏水性半抗原分析物复合物的量相关的信号的信号产生系统的成员组合，其中所述信号产生系统的成员与所述抗体或疏水性半抗原分析物类似物结合，所述疏水性半抗原分析物类似物与所述样品...

【专利技术属性】
技术研发人员：I巴哈，魏铁全，
申请(专利权)人：西门子医疗保健诊断公司，
类型：发明
国别省市：美国,US