【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及诊断测试领域，更特别涉及定量固定化在固体载体上的官能团的方法。
技术介绍
1、在医学和临床化学领域中，通过利用特异性结合对成员之间的相互作用进行生理活性物质或被分析物的许多研究和测定。例如，患者样品中的目标被分析物本身可以是特异性结合对的一个成员，其可以通过使用固定化在固体载体上的特异性结合对的相应成员检测。在这种情况下，例如，固定化的结合对成员可以是用于检测样品中的目标抗体的抗原。已经为这些应用开发出各种固体载体材料并且需要各种结合技术将特异性结合对成员固定化在固体载体上。
2、例如，顺磁粒子(pmp)是已知的固体载体材料，其可以用官能团如胺官能团官能化。在一些情况下，可以选择这些官能团以与键合在结合对成员上的连接基(例如戊二醛)键合。该结合对成员可能对样品中的目标被分析物(其通常是如上文提到的结合对的第二成员)有选择性。在将该结合对成员固定化在固体载体上时，可能必须确保适当量的官能团可供直接或间接连接该结合对成员。例如，太少的可用官能团可能导致在加入结合对成员时太少的连接位点。这可能导致固体载体不能准确测定在特定浓度下，特别是在目标被分析物的可检测范围内的较高浓度下的目标被分析物的量。另一方面，提供更高浓度的用于固定化特异性结合成员的官能团可能显著提高生产成本而没有任何额外益处。
3、因此，需要测定和/或确认直接或间接存在于固体载体上的官能团数以将特异性结合对成员优化固定化到固体载体上。尽管存在定量测定溶液中的官能团量的已知方法，但此类方法通常不适合固体载体，因为在此类定量方法中形成的有
技术实现思路
1、根据本专利技术的一个方面，提供定量固定化在固体载体上的官能团的量的方法。在某些方面中，该方法能够测定在固体载体产品的制造过程中待布置在固体载体上的官能团的最佳数量。由此可以消除和/或减少浪费，并可以改进固体载体的性能。例如，通过定量固体载体上可用的官能团数，可以保证足够的官能团可供直接或间接连接特异性结合对的第一成员。此后，可以制造具有特异性结合对成员的最佳载量的类似固体载体。在某些实施方案中，本文所述的方法因此能够在直接或间接连接在固体载体上提供的特异性结合对的一个成员之前定量可用官能团。
2、本文所用的术语“大约”是指指定值的±10％的值。
3、本文所用的术语“附加”、“结合”、“固定化”、“连接”等被理解为不限于共价键合并且可包括两个或更多个分子之间的任何类型的吸引、亲合、构象选择、诱导契合或键合。
4、本文所用的短语“有效量”是指适合带来预期结果的材料量。
5、本文所用的术语“样品”包括具有或疑似具有目标被分析物的任何样品并且可以是生物或非生物样品。
6、本文所用的术语“对象”是指任何人类或非人类哺乳动物。
7、在下列说明书中结合附图解释本专利技术的方面。
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1.定量固定化在包含一种或多种顺磁粒子的固体载体上的目标官能团的方法，该方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种顺磁粒子上的目标官能团通过将所述官能团添加到所述一种或多种顺磁粒子上的反应固定化。
3.根据权利要求1所述的方法，其中在键合到所述一种或多种顺磁粒子上的连接剂上提供所述目标官能团。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述醛类官能团通过将醛类官能团添加到所述一种或多种顺磁粒子上存在的氨基上的反应固定化在所述一种或多种顺磁粒子上。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述醛类官能团通过戊二醛与所述一种或多种顺磁粒子上的氨基之间的反应固定化在所述一种或多种顺磁粒子上。
6.根据权利要求1至5任一项所述的方法，其进一步包括，在步骤(h)之前：
7.根据权利要求1至5任一项所述的方法，其中所述第一结合对成员的有效量为化学计算量。
8.根据权利要求1至7任一项所述的方法，其中所述第一结合对成员是抗原、抗体、酶、底物或多核苷酸。
9.根据权利要求1至5任一项所述的方法，其
10.定量固定化在包含一种或多种顺磁粒子的固体载体上的目标官能团的方法，该方法包括：
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述一种或多种顺磁粒子上的目标官能团通过将所述官能团添加到所述一种或多种顺磁粒子上的反应固定化。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述固定化氨基官能团由氨基硅烷化合物与所述一种或多种顺磁粒子之间的反应提供。
13.根据权利要求10所述的方法，其中所述选择性化合物包含丙醛。
14.根据权利要求10至13任一项所述的方法，其进一步包括，在步骤(h)之前：
15.根据权利要求10至13任一项所述的方法，其中所述第一结合对成员的有效量为化学计算量。
16.根据权利要求10至15任一项所述的方法，其中所述第一结合对成员是抗原、抗体、酶、底物或多核苷酸。
17.根据权利要求10至13任一项所述的方法，其中使所述目标官能团与一定量的选择性化合物接触包括使所述目标官能团与一定量的选择性化合物反应。
18.用于实施根据权利要求1至17任一项所述的方法的试剂盒。
19.根据权利要求18中所述的试剂盒，其包含选择性结合到目标官能团上的选择性化合物；和选择性结合到所述选择性化合物上的指示剂。
20.根据权利要求18或19所述的试剂盒，其进一步包含包装或用于实施根据权利要求1至17任一项所述的方法的说明书。
...【技术特征摘要】
1.定量固定化在包含一种或多种顺磁粒子的固体载体上的目标官能团的方法，该方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种顺磁粒子上的目标官能团通过将所述官能团添加到所述一种或多种顺磁粒子上的反应固定化。
3.根据权利要求1所述的方法，其中在键合到所述一种或多种顺磁粒子上的连接剂上提供所述目标官能团。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述醛类官能团通过将醛类官能团添加到所述一种或多种顺磁粒子上存在的氨基上的反应固定化在所述一种或多种顺磁粒子上。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述醛类官能团通过戊二醛与所述一种或多种顺磁粒子上的氨基之间的反应固定化在所述一种或多种顺磁粒子上。
6.根据权利要求1至5任一项所述的方法，其进一步包括，在步骤(h)之前：
7.根据权利要求1至5任一项所述的方法，其中所述第一结合对成员的有效量为化学计算量。
8.根据权利要求1至7任一项所述的方法，其中所述第一结合对成员是抗原、抗体、酶、底物或多核苷酸。
9.根据权利要求1至5任一项所述的方法，其中使所述目标官能团与一定量的选择性化合物接触包括使所述目标官能团与一定量的选择性化合物反应。
10.定量固定化在包含一种或多种顺磁粒子的固体载体上的目标官能团的方法，该...
【专利技术属性】
技术研发人员：S·林，C·里默，R·斯皮尔斯，
申请(专利权)人：西门子医疗保健诊断公司，
类型：发明
国别省市：
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