对维生素D差向异构体特异性的结合配偶体制造技术

针对式(I)化合物(其中Z是免疫原性载体)产生抗体。这些抗体能够特异性结合相应的抗体。所述抗体对维生素D的差向异构体是特异性的。根据本文所述的原理的抗体可用于尽可能降低或消除维生素D分析物的非差向异构形式的测定法中的3‑差向异构体交叉反应性。利用针对作为式(I)化合物(其中Z是免疫原性载体)的免疫原制备的抗体作为阻断剂可以基本上避免由3‑差向异构体维生素D与维生素D分析物的抗体的交叉反应性引起的总非差向异构维生素D分析物的过度估计。

【技术实现步骤摘要】
对维生素D差向异构体特异性的结合配偶体本申请是申请日为2015年6月22日，申请号为201580034567.3，专利技术名称为“对维生素D差向异构体特异性的结合配偶体”的专利技术专利申请的分案申请。本申请根据35USC§119(e)主张2014年6月27日提交的美国临时申请号62/018,012的权益。上面引用的专利申请的全部内容在此通过引用明确并入本文。
本专利技术涉及用于确定怀疑含有维生素D分析物(包括维生素D异构体)及其代谢物的样品中其存在和/或量的组合物、方法和试剂盒。更具体地，本专利技术涉及对维生素D的差向异构体特异性的结合配偶体诸如，例如抗体。
技术介绍
许多小分子化合物或半抗原，诸如例如药物和维生素，以同分异构形式存在，其中只有一种形式是活性的。为了获得分析物的活性形式的准确测量，必须解决该分析物的非活性同分异构体的存在。分析物的两种同分异构形式(即活性形式和非活性形式)的测量值可导致可能对个体不利(取决于分析物的活性形式的功能)的不准确性。准确地评价生物样品中一对同分异构分析物的每种的水平是重要的，尤其当仅一种同分异构体是活性的，并且包括非活性同分异构体的量的测量值扭曲了样品中分析物的水平。例如，测量生物样品中的维生素D水平是重要的，因为维生素D缺乏与哺乳动物中许多病症相关。在婴儿中，例如，包括3-差向异构体的量的维生素D测量值可导致婴儿中维生素D水平的不准确评价，这进而可导致缺乏合适的补充。测量维生素D的活性形式是重要的，使得婴儿可以接受适当的维生素D疗法(如果必要)。术语“维生素D”是指一类脂溶性开环甾类化合物。在人类中，维生素D是独特的，因为它可作为胆钙化甾醇(维生素D3)或麦角钙化甾醇(维生素D2)被摄取，以及因为机体也可以在日照充足时(由胆甾醇)合成维生素D。由于此后一特性，一些人认为维生素D是非必要膳食维生素，尽管大多数人认为它是必要营养素。维生素D在钙离子体内平衡的正性调节中具有重要的生理作用。维生素D3是由动物合成的维生素形式。其如同维生素D2一样也是添加至乳制品和某些食品的常见补充剂。膳食和内在合成的维生素D3两者都必须经历代谢活化来生成生物活性代谢物。在人类中，维生素D3活化的初始步骤主要在肝脏中发生并涉及羟基化以形成中间代谢物25-羟基胆钙化甾醇。钙二醇是维生素D3在循环系统中的主要形式。维生素D2也经历类似的代谢活化，成为25-羟基维生素D2。这些化合物共同地被称作25-羟基维生素D(缩写为25(OH)D)，并且它们是在血清中测量以确定维生素D状态的主要代谢物；25(OH)D及其差向异构体两者都为需要被转化成1,25(OH)D以发挥生物功能的前激素。1,25(OH)D的生物活性与3-差向-1,25(OH)D的生物活性的比较是复杂的。维生素D化合物25-羟基维生素D3和25-羟基维生素D2在3-位是差向异构的，其中所述差向异构体分别被命名为25-羟基维生素D3和3-差向-25-羟基维生素D3和25-羟基维生素D2和3-差向-25-羟基维生素D2。只有这些差向异构化合物的每种的一种差向异构体，即分别25-羟基维生素D3和25-羟基维生素D2是活性的。25-羟基维生素D3和25-羟基维生素D2的差向异构体的结构在图1中阐述。评价生物样品中的维生素D水平是重要的，因为维生素D缺乏与哺乳动物中的许多疾病相关。需要用于准确和灵敏测定样品中的维生素D和维生素D的差向异构形式及其代谢物的浓度的试剂和方法。
技术实现思路
根据本文所述的原理的一些实例涉及针对式I化合物制备的结合配偶体诸如，例如抗体：(R1)p-(L)q-Z，其中或H，其中至少一个R1不是H，Y是O、S、CR或NR4，X是-O-(CH2)n-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-(CH2)x-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-NH(CH2)y-C(O)-、-NR3-C(O)-，R独立地是H或烷基，R2独立地是H或烷基，R3、R4、R5和R6独立地是H或烷基，或者R4和R5可以一起形成键，或者R5和R6可以一起形成键，R11是H、烷基或酰基，n是1至10的整数，w是0至10的整数，x是1至10的整数，y是1至10的整数，p是1至10的整数，L是连接基团，q是0或1，且Z是聚(氨基酸)免疫原性载体或非聚(氨基酸)免疫原性载体。根据本文所述的原理的一些实例涉及针对式II化合物产生的抗体：NHR1’-(CH2)r’-NR1’’-((CH2)r’-NR1’’’)s’-(CH2)r’-NR7’-Z’，其中R1’、R1’’或R1’’’各自独立地选自和H，其中R1’、R1’’或R1’’’中的至少一个不是H，n’是1至10的整数，r’独立地是1至10的整数，s’是1至10的整数，R7’是H或烷基，R11’是H、烷基或酰基，且Z’是聚(氨基酸)免疫原性载体或非聚(氨基酸)免疫原性载体；或针对上述化合物中的两种或更多种的混合物产生的抗体。根据本文所述的原理的一些实例涉及对3-差向-25-羟基维生素D3特异性且不在任何可检测程度上结合非-差向-维生素D化合物的抗体。附图说明本文提供的附图不是按比例的，并且为了便于理解根据本文所述的原理的某些实例的目的而提供，并且通过说明而非限制所附权利要求的范围的方式来提供。图1是25-羟基维生素D3和25-羟基维生素D2的差向异构形式的化学式的描绘。图2是按照根据本文所述的原理的实施例的化合物的合成的示意图。图3是按照根据本文所述的原理的实施例的化合物的合成的示意图。图4是按照根据本文所述的原理的实施例的化合物的合成的示意图。图5是按照根据本文所述的原理的实施例的化合物的合成的示意图。图6是按照根据本文所述的原理的实施例的化合物的合成的示意图。图7是按照根据本文所述的原理的实施例的化合物的合成的示意图。图8是按照根据本文所述的原理的实施例的化合物的合成的示意图。图9说明使用添加和不添加抗-3-差向异构体-VD抗体的试剂产生的标准曲线的比较。图10是用于使用抗-3-差向异构体-VD抗体测定样品中的3-差向-25(OH)D的免疫测定的标准曲线。具体实施方案化合物如上所提及，根据本文所述的原理的一些实例涉及针对式I化合物产生的结合配偶体诸如，例如抗体：(R1)p-(L)q-Z，其中或H，其中至少一个R1不是H，Y是O、S、CR或NR4，X是-O-(CH2)n-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-或-NR3-C(O)-；例如，在一些实例中，当Y是NR4时，X是-O-(CH2)n-C(O)-，例如当Y是O或S时，X是-(CH2)w-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-(CH2)x本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.针对下式的化合物制备的结合配偶体：/n(R

【技术特征摘要】
20140627 US 62/0180121.针对下式的化合物制备的结合配偶体：
(R1)p-(L)q-Z，其中

或H，其中至少一个R1不是H，
Y是O、S、CR或NR4，
X是-O-(CH2)n-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-(CH2)x-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-NH(CH2)y-C(O)-或-NR3-C(O)-，
R独立地是H或烷基，
R2独立地是H或烷基，
R3、R4、R5和R6独立地是H或烷基，或者R4和R5可以一起形成键，或者R5和R6可以一起形成键，或者R和R5可以一起形成键，
R11是H、烷基或酰基，
n是0至10的整数，
w是1至10的整数，
x是1至10的整数，
y是1至10的整数，
p是1至10的整数，
L是连接基团，
q是0或1，且
Z是免疫原性载体；
或针对所述化合物中的两种或更多种的混合物产生的结合配偶体。


2.根据权利要求1所述的结合配偶体，其中在所述化合物中，

或H，其中至少一个R1不是H。


3.根据权利要求1所述的结合配偶体，其中在所述化合物中，

或H，其中至少一个R1不是H。


4.根据权利要求1所述的结合配偶体，其中在所述化合物中，
(R1)p-(L)q-是NHR1-(CH2)r-NR1-((CH2)r-NR1)s-(CH2)r-NR7-，其中
R1独立地是

或H，其中至少一个R1不是H，
r独立地是1至10的整数，
s是1至10的整数，且
R7是H或烷基。


5.根据权利要求4所述的结合配偶体，其中在所述化合物中，r是2，s是1，R7是H，且一个R1是

。


6.根据权利要求4所述的结合配偶体，其中在所述化合物中，r是2，s是1，R7是H，且两个R1是

。


7.根据权利要求4所述的结合配偶体，其中在所述化合物中，r是2，s是1，R7是H，且三个R1是

。


8.针对下式的化合物产生的抗体：
NHR1’-(CH2)r’-NR1’’-((CH2)r’-NR1’’’)s’-(CH2)...

【专利技术属性】
技术研发人员：M沙马，T马里瓦，Y斯米尔诺夫，WD贝兹克，滕铸，魏铁全，
申请(专利权)人：西门子医疗保健诊断公司，
类型：发明
国别省市：美国;US