一种以苍耳为原料经微生物发酵制备杀虫剂的方法技术

本发明专利技术提供了一种制备生物源杀虫剂的技术。其工艺特点是以苍耳为原料，利用保存于中国典型培养物保藏中心的，保藏编号为：CCTCCNO：M2013283的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)H47和市售短小芽孢杆菌及市售苏云金杆菌混合发酵。原料适当打碎后加菌种100mL，加水10L，25℃—30℃发酵3‑12d，过滤后获得成品。本发明专利技术制备方法及过程中无污染安全可靠，发酵时间周期短，工艺环节少，简单易操作，可节省投资和运行费用。与传统化学药剂相比，其具绿色安全，环境友好等优势，且促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用，拥有广阔的应用前景。

Method for preparing insecticide by using Xanthium sibiricum as raw material by microorganism fermentation

The present invention provides a technique for preparing a biological pesticide. The process is characterized by the use of Xanthium as raw materials stored in the Chinese type culture collection center, the preservation number is: Bacillus amyloliquefaciens CCTCCNO:M2013283 (Bacillus amyloliquefaciens) and Bacillus thuringiensis mixed fermentation of commercially available H47 and sold short shoots. The appropriate raw materials after the break and strain 100mL, 10L water, 25 C and 30 C 3 12D fermentation, filtering to obtain the product. The preparation method of the invention has the advantages of no pollution, safety and reliability, short fermentation time period, less technical process, simple and easy operation, and can save investment and operation cost. Compared with the traditional chemical agents, it has the advantages of green, safe and friendly environment, and the growth promoting bacteria itself has good insecticidal, disease control and growth promoting effects, and has broad application prospects.

【技术实现步骤摘要】
一种以苍耳为原料经微生物发酵制备杀虫剂的方法
本专利技术涉及到解一株淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)H47和短小芽孢杆菌及苏云金杆菌微生物发酵苍耳制备植物源杀虫剂的生产方法，属于微生物和发酵

技术介绍
苍耳(XanthiumsibiricumPatrinexWidder)(原变种)一年生草本，高20-90cm。根纺锤状，分枝或不分枝。茎直立不枝或少有分枝，下部圆柱形，径4-10mm，上部有纵沟，被灰白色糙伏毛。叶三角状卵形或心形，长4-9cm，宽5-10cm，近全缘，或有3-5不明显浅裂，顶端尖或钝，基部稍心形或截形，与叶柄连接处成相等的楔形，边缘有不规则的粗锯齿，有三基出脉，侧脉弧形，直达叶缘，脉上密被糙伏毛，上面绿色，下面苍白色，被糙伏毛；叶柄长3-11cm。雄性的头状花序球形，径4-6mm，有或无花序梗，总苞片长圆状披针形，长1-1.5mm，被短柔毛，花托柱状，托片倒披针形，长约2mm，顶端尖，有微毛，有多数的雄花，花冠钟形，管部上端有5宽裂片；花药长圆状线形；雌性的头状花序椭圆形，外层总苞片小，披针形，长约3mm，被短柔毛，内层总苞片结合成囊状，宽卵形或椭圆形，绿色，淡黄绿色或有时带红褐色，在瘦果成熟时变坚硬，连同喙部长12-15mm，宽4-7mm，外面有疏生的具钩状的刺，刺极细而直，基部微增粗或几不增粗，长1-1.5mm，基部被柔毛，常有腺点，或全部无毛；喙坚硬，锥形，上端略呈镰刀状，长2.5mm，常不等长，少有结合而成1个喙。瘦果2，倒卵形。花期7-8月，果期9-10月。含苍耳甙(xanthostrumarin)。叶含苍耳醇(xanthanol)、异苍耳醇(jsoxanthanol)、苍耳酯(xanthumin)等。果实含苍耳甙、脂肪油、树脂、生物碱、维生素C。苍耳甙(Strumaroside)，即B-谷甾醇葡萄糖甙)、黄质宁(Xanthinin)、苍耳明(Xanthumin，是黄质宁的立体异构体)、8-(△2-异戊烯基)-5，7，3，4-四羟基黄酮[8-(△2-Isopen-tenyl)-5，7，3，4-Tetrahydroxy-flavone]，以及咖啡酸和1，4-二咖啡酰奎宁酸等次生代谢产物，具有一定的杀虫效果，尤其是对蝇蛆类和桃蚜有较好的杀灭作用。植物源杀虫剂具有安全、高效、低毒、低残留等特点，符合害虫绿色防治的要求，将成为研究者的新宠。利用合适的植物促生菌发酵苍耳，不仅有利于生理活性物质的提取，还不易造成活性物质的失活，促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用。有利于改善植物生长和增强杀虫效果，有利于环境保护和苍耳植物本身的有效利用。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述缺陷，本专利技术利用苍耳植物为原料，用2013年6月24日保存于中国典型培养物保藏中心的，保藏编号为：CCTCCNO：M2013283的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)H47(该菌株以下简称：解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283)和市售短小芽孢杆菌及市售苏云金杆菌发酵制备植物源杀虫剂，有利于改善植物生长和增强杀虫效果，有利于环境保护。专利技术的发酵技术方案：1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/L计为：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。按一定比例混合做种子。2)发酵液准备：选用质量优良的苍耳，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。4)发酵液实消：将步骤2所得苍耳放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10L，按相关说明书进行实消灭菌。5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有苍耳的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。本专利技术的有益效果：本专利技术提供了发酵苍耳制得一种生物源杀虫剂的方法。本专利技术制备方法及过程中无污染安全可靠，发酵时间周期短，工艺环节少，简单易操作，可节省投资和运行费用。与传统化学药剂相比，其具绿色安全，环境友好等优势，且促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用，拥有广阔的应用前景。具体实施方法：下面结合实施例对本专利技术进行进一步描述。以下实施例仅为本专利技术的几个具体实施例，但本专利技术的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本专利技术进行非实质性的改动，均应属于侵犯本专利技术保护范围的行为。实施例11)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/L计为：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。按2:2:1混合做种子。2)发酵液准备：选用质量优良的苍耳，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。4)发酵液实消：将步骤2所得苍耳放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10L，按相关说明书进行实消灭菌。5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有苍耳的发酵罐中，25℃条件下培养6天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。实施例21)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/L计为：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。按1:2:1混合做种子。2)发酵液准备：选用质量优良的苍耳，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。4)发酵液实消：将步骤2所得苍耳放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10L，按相关说明书进行实消灭菌。5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有苍耳的发酵罐中，27℃条件下培养6天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。实施例31)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/L计为：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。按1:2:2混合做种子。2)发酵液准备：选用质量优本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种发酵苍耳制备生物源杀虫剂的方法。其特征是以苍耳为原料，添加菌种发酵制备杀虫剂，该方法包括以下步骤：1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/L计为：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl 10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。按一定比例混合做种子。2)发酵液准备：选用质量优良的苍耳，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。4)发酵液实消：将步骤2所得苍耳放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10L，按相关说明书进行实消灭菌。5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有苍耳的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。

【技术特征摘要】
1.一种发酵苍耳制备生物源杀虫剂的方法。其特征是以苍耳为原料，添加菌种发酵制备杀虫剂，该方法包括以下步骤：1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/L计为：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。按一定比例混合做种子。2)发酵液准备：选用质量优良的苍耳，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。4)发酵液实消：将步骤2所得苍耳放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10L，按相关说明书进行实消灭菌。5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有苍耳的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖祥儒，窦欣，田乔鹏，蔡宇杰，管政兵，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32