血清淀粉样蛋白A和C‑反应蛋白二合一测定试剂盒及制法制造技术

本发明专利技术是一种血清淀粉样蛋白A和C‑反应蛋白二合一测定剂盒，设有试纸卡，其特征在于所述试纸卡由下至上依次设有：PVC板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中结合垫上吸附有稀土Eu

Determination of serum amyloid A protein and C protein in reaction kit and preparation method

The invention is a kind of serum amyloid A and C reactive Protein Determination Kit Combo test card, is provided, which is characterized in that the test card followed by the bottom is provided with a PVC plate, a sample pad, combination pad, nitrocellulose membrane and absorbent pad, which combined pad adsorbed rare earth Eu

【技术实现步骤摘要】
血清淀粉样蛋白A和C-反应蛋白二合一测定试剂盒及制法
：本专利技术涉及医学免疫学中荧光免疫层析
，具体地说是一种能够快速准确的同时对血清、血浆和全血样品中的血清淀粉样蛋白A、C-反应蛋白I两个感染炎症相关指标进行定量分析的血清淀粉样蛋白A和C-反应蛋白二合一测定试剂盒及制法。
技术介绍
：血清淀粉样蛋白A(SAA)属于人体急性期蛋白，在血液中低水平存在，当人体被细菌或者病毒等感染后，发生炎症或者活动性病变、组织损伤后快速升高。在炎症或感染急性期可迅速升高，并在疾病的恢复期迅速下降。研究显示，在细菌、真菌、病毒感染、动脉粥样硬化、心血管疾病、急性移植排斥反应等疾病中均可检测到血清中SAA升高。C反应蛋白(C-reactionprotein，CRP)，是在机体受到感染或组织损伤时血浆中一类急剧上升的蛋白质，主要由肝细胞合成。蛋白可以与肺炎球菌细胞壁C-多糖结合，因此称为CRP。CRP具有多种生物学功能，参与多种自身生理及病理生理过程，CRP可以激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，从而清除入侵机体的病原微生物和损伤，坏死，凋亡的组织细胞，在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种血清淀粉样蛋白A和C‑反应蛋白二合一测定剂盒，设有试纸卡，其特征在于所述试纸卡由下至上依次设有：PVC板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中结合垫上吸附有稀土Eu

【技术特征摘要】
1.一种血清淀粉样蛋白A和C-反应蛋白二合一测定剂盒，设有试纸卡，其特征在于所述试纸卡由下至上依次设有：PVC板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中结合垫上吸附有稀土Eu3+荧光微球分别标记的抗血清淀粉样蛋白A，抗C-反应蛋白两种单克隆抗体-微球偶联复合物，所述稀土荧光微球的直径为100-250nm，稀土荧光微球含稀土镧系元素Eu3+，在基态下稳定，在337nm的激发光源作用下发射出波长615nm的荧光；所述单克隆抗体为纯化后混合的单克隆抗体，分别均来源于针对2-6个不同的血清淀粉样蛋白A、C-反应蛋白等抗原表位的单克隆抗体细胞株。2.根据权利要求1所述的一种血清淀粉样蛋白A和C-反应蛋白二合一测定剂盒，其特征在于所述结合垫的稀土荧光微球的直径是120-150nm；所述稀土荧光微球掺杂有稀土镧系元素Eu3+，结合垫上稀土荧光微球标记的两种抗体均来源于针对2个不同抗原表位的单克隆细胞细胞株。3.根据权利要求2所述的一种血清淀粉样蛋白A和C-反应蛋白二合一测定剂盒，其特征在于所述稀土荧光微球含稀土镧系元素Eu3+；。4.根据权利要求1所述的血清淀粉样蛋白A和C-反应蛋白二合一测定剂盒，其特征在于所述结合垫采用如下步骤制得：将玻璃纤维膜浸泡于150mMTris-HCL处理液中(含1.0％TritonX-100，2.5％BSA，pH7.4)，4℃浸泡4小时，然后取出37℃烘箱烘干4小时，备用，将玻璃纤维膜放在Bio-DotXYZ3050三维喷点平台上，用Bio-JetQuanti300非接触式微定量喷头将稀土荧光微球标记的血清淀粉样蛋白A和C-反应蛋白两种偶联复合物混匀后喷到玻璃纤维膜上，37℃烘干1小时后制得。5.根据权利要求4所述的一种血清淀粉样蛋白A和C-反应蛋白二合一测定剂盒，其特征在于结合垫上的所述稀土荧光微球标记的血清淀粉样蛋白A和C-反应蛋白二合一测定剂盒中的两种单克隆抗体采用如下步骤制得：步骤1：单克隆抗体细胞株的获得：分别用血清淀粉样蛋白A和C-反应蛋白纯品分别免疫小鼠，采用标准的单克隆抗体制备方法制备特异性高亲和力的单克隆抗体细胞株，对所获得的单抗细胞株进行配对筛选，根据配对结果和亲和力数据优选出用于试剂盒的单抗细胞株；步骤2：单克隆抗体的制备：采用标准的腹水生产工艺制备并纯化抗血清淀粉样蛋白A抗体和抗C-反应蛋白抗体两种鼠源单克隆抗体，分装后保存于-20℃备用；步骤3：稀...

【专利技术属性】
技术研发人员：王有志，王鹏浩，李红江，
申请(专利权)人：威海纽普生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37