一种促进蘘荷离体快速繁殖的方法技术

本发明专利技术公开了一种促进蘘荷离体快速繁殖的培养基套盒，所述培养基套盒包括：以MS培养基为基础培养基，添加1.0～3.0mg/L的BA、0.01～0.02mg/L的TDZ、0.04～0.06mg/L的NAA、25～35g/L蔗糖以及6.5～7.5g/L琼脂而成的增殖培养基。此外，本发明专利技术还公开了一种使用所述培养基套盒促进蘘荷离体快速繁殖的方法。在优化的条件下，通过所述方法进行蘘荷的培养，其增殖倍数可达10～15倍，30d后生根率达100％，移栽成活率100％。

A method for promoting in vitro Rapid Propagation of Zingiber mioga

The invention discloses a method for promoting mioga ginger in vitro rapid propagation medium kit, the kit includes: medium as basic medium MS, multiplication medium adding 1 ~ 3.0mg/L BA, 0.01 ~ 0.02mg/L, 0.04 ~ TDZ 0.06mg/L NAA, 25 ~ 35g/L and 6.5 sucrose a ~ 7.5g/L agar. In addition, the invention also discloses a method for using the medium Kit Method to promote the in vitro Rapid Propagation of Zingiber mioga. Under the optimized conditions, the cultivation of Zingiber mioga by the method, the proliferation rate of up to 10 ~ 15 times, 30d rooting rate was 100%, the survival rate of transplanting was 100%.

【技术实现步骤摘要】
一种促进蘘荷离体快速繁殖的方法
本专利技术涉及一种植物组织培养的方法，尤其涉及一种促进蘘荷离体快速繁殖的方法。
技术介绍
蘘荷(Zingibermioga(Thunberg)Roscoe)，属姜科姜属多年生草本植物，别名苴蓴、阳藿、蘘草、野姜，有紫红花和白花两种类型。蘘荷具有很高的食用价值和药用价值，主要食用其嫩花序、嫩芽、花轴和地下茎等部位，其中每100g嫩茎和花轴含蛋白质约12.4g、脂肪2.2g、纤维素28.1g、维生素C和维生素A共约95.85mg，还含有铁、锌、硒等多种微量元素；蘘荷根茎性温，味辛，温中理气、祛风止痛，可消肿、活血、散淤；花序可治咳嗽，配生香榧治小儿百日咳有显效。近年来，蘘荷的作为珍稀蔬菜供不应求，深受国内外消费者青睐。蘘荷在生产上多采用地下茎分株繁殖，但连续繁殖2～3年后，根茎逐渐衰退，产量降低，病虫害侵染严重，需更新繁殖。对此，部分学者开展了蘘荷脱毒苗组织培养快速繁殖的研究。目前，按照增殖时所使用的外植体的种类进行划分，蘘荷的增殖方法主要包括两种：(1)以茎尖为外植体；以及(2)以带芽的根茎为外植体。对于以茎尖为外植体的蘘荷的增殖方法，例如：万志刚等(2004)，采用根茎上的休眠芽，剥取茎尖，通过调节6-BA与NAA的浓度实现萌芽(MS+6-BA1.0mg.L-1+NAA0.2mg.L-1)、增殖(MS+6-BA1.5mg.L-1+NAA0.2mg.L-1)与生根(1/2MS+6-BA1.0mg.L-1+NAA0.5mg.L-1)的整个过程。试验中未说明增殖倍数，生根培养20天时生根率达95％-98％，每株生根5-8条，移栽湿度在80％以上，成活率达90％。石拥军等(2006)，取萌动的根状茎芽，剥取茎尖，培养基MS+BA4.0mg/L+IAA0.1mg/L上诱导无菌苗，增殖培养基：MS+KT0.6mg/L+NAA0.1mg/L、MS+KT0.8mg/L+IAA0.1mg/L以25天为周期，增殖倍数可达5～6倍，由1/2MS+IBA0.1mg/L生根效果最好，25天后生根率达100％，并且根系粗壮发达。对于以带芽的根茎为外植体的蘘荷的增殖方法，例如：朱素琴等(2004)，利用根状茎催芽，萌动芽生长培养基：(1)MS+6-BA2mg·L-1。不定芽增殖培养基：(4)MS+6-BA5mg·L-1+KT5mg·L-1，30d左右增殖系数达6-10倍；在不含激素的MS基本培养基顺利生根；移栽至空气相对湿度为70％时，成活率达90％。陆军等(2012)以单芽茎段为外植体，在暗条件下，以MS+NAA0.2mg·L-1诱导初代，在MS+BA5.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1培养基上增殖，培养三周后的增殖倍数为5.9；在生根培养基1/2MS+BA0.2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1上，每芽生根数平均为4.5条。从以上例子可以看出，尽管目前已经有多种方法可以进行蘘荷的增殖，但是发展出增殖率好、根质量好、培养周期短的新的方法仍然是必要的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种促进蘘荷离体快速繁殖的方法。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种促进蘘荷离体快速繁殖的培养基套盒，所述培养基套盒包括：以MS培养基为基础培养基，添加1.0～3.0mg/L的BA、0.01～0.02mg/L的TDZ、0.04～0.06mg/L的NAA、25～35g/L蔗糖以及6.5～7.5g/L琼脂而成的增殖培养基。BA，即6-苄基腺嘌呤，是一种广泛使用的添加于植物生长培养基的细胞分裂素，具有抑制植物叶内叶绿素、核酸、蛋白质的分解，保绿防老；将氨基酸、生长素、无机盐等向处理部位调运等多种效能，广泛用在农业、果树和园艺作物从发芽到收获的各个阶段。TDZ，即噻苯隆，是一种高效的细胞分裂素，用于组织培养能更好的促进植物的芽分化。NAA，即萘乙酸，是一种广谱型植物生长调节剂，能促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根。本专利技术在MS培养基的配方的基础上，通过添加特定含量的BA、TDZ、NAA制成培养基后，能显著提高蘘荷离体的繁殖能力，同时实现生根，生根率可达100％。作为本专利技术所述促进蘘荷离体快速繁殖的培养基套盒的优选实施方式，所述BA在所述培养基中的含量为2.0mg/L，所述TDZ在所述培养基中的含量为0.01mg/L，所述NAA在所述培养基中的含量为0.05mg/L。作为本专利技术所述促进蘘荷离体快速繁殖的培养基套盒的优选实施方式，所述蔗糖在所述培养基中的含量为30g/L，所述琼脂在所述培养基中的含量为7g/L。作为本专利技术所述促进蘘荷离体快速繁殖的培养基套盒的优选实施方式，所述培养基套盒还包括诱导培养基，所述诱导培养基是以MS培养基为基础培养基，添加4.0mg/L的BA、0.1～0.2mg/L的TDZ、0.9～1.0mg/L的NAA、25～35g/L蔗糖以及6.5～7.5g/L琼脂而成的。作为本专利技术所述促进蘘荷离体快速繁殖的培养基套盒的更优选的实施方式，所述诱导培养基中，所述BA在所述培养基中的含量为4.0mg/L，所述TDZ在所述培养基中的含量为0.1mg/L，所述NAA在所述培养基中的含量为1.0mg/L。作为本专利技术所述促进蘘荷离体快速繁殖的培养基套盒的优选实施方式，所述诱导培养基中，所述蔗糖在所述培养基中的含量为30g/L，所述琼脂在所述培养基中的含量为7g/L。作为本专利技术所述促进蘘荷离体快速繁殖的培养基套盒的优选实施方式，所述培养基套盒还包含基质，所述基质包括黄泥、泥炭和沙子，其中，所述黄泥、泥炭和沙子的重量比为3：2：1。本专利技术培养基套盒的配制方法没有特别限定，优选地但不限于，本专利技术培养基套盒采用如下方法配制而成：(1)配制MS培养基；(2)配制诱导培养基：在步骤(1)所制备的MS培养基的基础上添加BA、TDZ、NAA、蔗糖以及琼脂；(3)配制增殖培养基：在步骤(1)所制备的MS培养基的基础上添加BA、TDZ、NAA、蔗糖以及琼脂；(4)配制基质：按照黄泥：泥炭：沙子＝3：2：1(重量比)的比例进行混合。一种采用上述培养基套盒促进蘘荷离体快速繁殖的方法。作为促进蘘荷离体快速繁殖的方法的优选实施方式，其中，所述方法包括对蘘荷幼苗进行增殖培养；或者所述方法包括对蘘荷幼苗进行诱导培养和增殖培养；或者所述方法包括对蘘荷幼苗进行诱导培养和增殖培养，然后移栽到基质培养成完整植株。作为促进蘘荷离体快速繁殖的方法的优选实施方式，其中，所述诱导培养和所述增殖培养的温度为24～26℃。作为促进蘘荷离体快速繁殖的方法的优选实施方式，其中，所述诱导培养和所述增殖培养的光照时间为10～14h/d，光照强度为2500～3500lx。作为促进蘘荷离体快速繁殖的方法的更优选的实施方式，所述方法包括以下步骤：(1)选取蘘荷刚萌发的幼苗作为外植体；(2)在无菌条件下，对幼苗进行消毒处理后，接种在所述诱导培养基上诱导无菌幼苗；(3)将步骤(2)诱导后的无菌幼苗剪切为带不小于一个顶芽的茎段，接种于所述增殖培养基上，进行增殖；(4)将步骤(3)中获得的植株根部的培养基清洗干净，移栽于所述基质上。作为促进蘘荷离体快速繁殖的方法的更优选的实施方式，其中，在所述步骤(2)中，所述消毒处理过程包括：加入体积百分比为70～本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种促进蘘荷离体快速繁殖的培养基套盒，其特征在于，所述培养基套盒包括：以MS培养基为基础培养基，添加1.0～3.0mg/L的BA、0.01～0.02mg/L的TDZ、0.04～0.06mg/L的NAA、25～35g/L蔗糖以及6.5～7.5g/L琼脂而成的增殖培养基。

【技术特征摘要】
1.一种促进蘘荷离体快速繁殖的培养基套盒，其特征在于，所述培养基套盒包括：以MS培养基为基础培养基，添加1.0～3.0mg/L的BA、0.01～0.02mg/L的TDZ、0.04～0.06mg/L的NAA、25～35g/L蔗糖以及6.5～7.5g/L琼脂而成的增殖培养基。2.根据权利要求1所述的培养基套盒，其特征在于，所述BA在所述培养基中的含量为2.0mg/L，所述TDZ在所述培养基中的含量为0.01mg/L，所述NAA在所述培养基中的含量为0.05mg/L。3.根据权利要求2所述的培养基套盒，其特征在于，所述蔗糖在所述培养基中的含量为30g/L，所述琼脂在所述培养基中的含量为7g/L。4.根据权利要求1所述的培养基套盒，其特征在于，所述培养基套盒还包括诱导培养基，所述诱导培养基是以MS培养基为基础培养基，添加4.0mg/L的BA、0.1～0.2mg/L的TDZ、0.9～1.0mg/L的NAA、25～35g/L蔗糖以及6.5～7.5g/L琼脂而成的。...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡秀，
申请(专利权)人：仲恺农业工程学院，
类型：发明
国别省市：广东,44