本发明专利技术公开了一种红星茵芋离体快速繁殖的方法，其步骤：（1）外植体选择和消毒，以红星茵芋成熟种子为外植体，用70%酒精消毒后，再用浓度为0.1%HgCl2消毒，用无菌水冲洗；（2）种子萌发，将消毒好的种子接入萌发培养基中，经过培养，种子萌发长出子叶与真叶；（3）丛芽诱导与增殖，切取带真叶的顶芽，接种到增殖培养基上，进行继代培养，使丛芽不断增殖；（4）生根培养，将扩繁得到的试管苗，接种到生根培养基中，幼苗经过培养分化出白色不定根；（5）驯化移栽。该方法简便易行，繁殖系数大，生产成本低，周期短，平均繁殖系数达4.5，生根率90％，移栽成活率95％，操作简便，繁殖系数大，为红星茵芋种苗产业化生产奠定了基础。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，其步骤：（1）外植体选择和消毒，以红星茵芋成熟种子为外植体，用70%酒精消毒后，再用浓度为0.1%HgCl2消毒，用无菌水冲洗；（2）种子萌发，将消毒好的种子接入萌发培养基中，经过培养，种子萌发长出子叶与真叶；（3）丛芽诱导与增殖，切取带真叶的顶芽，接种到增殖培养基上，进行继代培养，使丛芽不断增殖；（4）生根培养，将扩繁得到的试管苗，接种到生根培养基中，幼苗经过培养分化出白色不定根；（5）驯化移栽。该方法简便易行，繁殖系数大，生产成本低，周期短，平均繁殖系数达4.5，生根率90％，移栽成活率95％，操作简便，繁殖系数大，为红星茵芋种苗产业化生产奠定了基础。【专利说明】
本专利技术涉及植物生物
，更具体涉及。
技术介绍
红星茵芋（Skimmia japonica Rubella)，又名红玉珠，属芸香科茵芋属植物，是近 年颇受欢迎的高档观赏花卉之一。红星茵芋叶片翠绿光亮，初夏的红褐色花蕾玲珑可爱，花 香浓郁；秋冬季节红星满枝，鲜艳欲滴，挂果期可长达半年以上，是观叶、观花、观果俱佳的 优良花卉品种(吴棣飞，年宵观果佳卉一红星菌芋。中国花卉盆景，2007,（2) :5-5)。 红星茵芋可播种和扦插进行繁殖，采用种子繁殖，后代会出现分离，不能保持母株 的优良特性，而且从播种至开花所需周期较长，现在生产上很少采用。扦插繁殖成活率不到 20%，而且需要大量的母本，远远不能满足生产需求，而且长期营养繁殖易出现品种退化现 象。若从荷兰进口，高IOcm小苗每株10元以上(孟艳琼，李仁杰，伊兴凯，梅俊，李静雅，红 星茵芋离体花梗腋芽诱导及丛生芽增殖研究。中国农学通报，2007,23 (11):81-85)，种苗 价格昂贵，导致企业生产成本增加。采用植物组织培养技术，工厂化生产红星茵芋种苗，不 仅可以克服播种和扦插带来的品种混杂、种性退化等问题，而且可以不受自然气候的影响 全年生长优质种苗，为红星茵芋的育种研究提供材料和技术支持，对推动红星茵芋产业的 快速发展具有重要意义。 目前，关于红星茵芋的组培快繁仅有一篇报道，孟艳琼等（2007)采用红星茵芋的 花梗为外植体，在MS+2, 4-DO. 3mg/L+IAA0. 2mg/L+BA3. 0mg/L+KT2.Omg/L培养基诱导花梗 腋芽萌发，诱导率可达91. 1%。在MS+NAAO. 8mg/L+BA3. 0mg/L+KT2.Omg/L上继代增殖，增殖 系数可达8. 73 (孟艳琼，李仁杰，伊兴凯，梅俊，李静雅，红星茵芋离体花梗腋芽诱导及丛生 芽增殖研究。中国农学通报，2007, 23 (11) :81-85)。由于红星茵芋开花受时间限制，采用 花梗取材有限，且实验中没有进行生根培养方面的试验，在实际工厂育苗中受到限制。
技术实现思路
本专利技术的目的是在于提供了，该方法简便易 行，繁殖系数大，生产成本低，周期短，平均繁殖系数达4. 5,繁殖周期20?25d，生根率90 % 左右，移栽成活率95%。采用种子无菌萌发的芽苗，在人为可控条件下进行组培苗的工厂化 生产，不受自然条件的影响，操作简便，繁殖系数高，生产成本低，周期短，为红星茵芋种苗 产业化生产奠定了基础。 为了达到上述的目的，本专利技术采用以下技术措施： (1)外植体选择和消毒： 以红星茵芋成熟种子为外植体，流水下冲洗30min，将其用70% (体积比）酒精消 毒后，再用浓度为〇. 1% (质量体积比）氯化汞（HgCl2)消毒8?lOmin，然后用无菌水冲洗4 次。 (2)种子萌发： 将消毒好的种子接入萌发培养基中，在温度为24 - 26°C、湿度为35 - 45%，光照 强度3000?5000 ii mol HT2s-1,每天光照14?16h，经过25?30d培养，种子萌发长出子 叶，经过15?20d后，长出1?2片真叶。 所述的种子萌发培养基包括MS基本培养基+0. 5mg/L GA3+蔗糖30g/L，PH值为 5. 8 ?6. 0〇 (3)丛芽诱导与增殖： 切取1?2片真叶及以上的顶芽，接种到丛芽诱导培养基上，在温度为24 - 26°C、 湿度为35 - 45%，光照强度3000?5000 ii mol IiT2S'每天光照14?16h，经过25?30d培 养，获得丛生芽。挑选正常发育的丛生茎芽，每隔20?25d切割成1-2个茎芽进行继代培 养，平均每次继代1瓶可转接4-5瓶，使丛芽不断增殖。 所述的丛芽诱导和增殖培养基包括MS基本培养基+1. 0?I. 5mg/L6-BA+0. 1? 0? 3mg/L NAA+0. 5mg/L GA3+ 蔗糖 30g/L，PH 值为 5. 8 ?6. 0。 (4)生根培养： 将株高3?5cm长的试管苗，接种到生根培养基中，在温度为24 - 26°C、湿度为 35 - 45%，光照强度3000?5000 ii mol HT2s-1,每天光照14-16h，经过14 一 16d幼苗就会分 化出4?6条白色不定根。 所述的生根培养基包括1/2MS+0. 5?I. Omg/L IBA+蔗糖30g/L，PH值为5. 8? 6. 0〇 (5)驯化移栽： 在温室内，生根培养25 - 30d后，将生长健壮，具有3条以上新根的红星茵芋组培 苗进行驯化移栽，移栽用的混合基质配方为由泥炭：珍珠岩：蛭石=3:1:1 (V/V)。移栽后， 用喷雾器喷水，使根系和基质紧密接触，然后遮阴一周后移入全光照下。温室条件为20°C? 25°C，光照 14 ?16h，光照强度为 2000 y mol IiT2S' 本专利技术以种子无菌萌发的顶芽为外植体，建立红星茵芋组培快繁体系，增值率较 高（4?5倍)，增殖稳定，根系健壮，移栽成活率较高，在红星茵芋种苗工厂化繁育中具有重 要的应用价值。 本专利技术与现有技术相比，具有以下优点和效果： 1、本专利技术与现有技术相比，种子取材简单方便，数量大，容易萌发。 2、本专利技术得到丛芽繁殖率高，每继代一次扩大4?5倍。 3、本专利技术建立红星茵芋组培快繁技术，为后续红星茵芋遗传育种和转基因工作打 下良好基础。 【专利附图】【附图说明】 图1为一种红星茵芋优良盆栽植株示意图。 红色果实去皮后的成熟种子用于实验，白色箭头所指为红色果实。 图2为一种种子萌发长出子叶不意图。 图3为一种种子萌发长出真叶后不意图。 幼苗长出真叶，用于增殖的顶芽。 图4为一种顶芽增殖后的丛生芽示意图。 图5为一种试管苗生根培养示意图。 图6为一种正常生根的试管苗示意图。 图7为一种生根移栽后正常生长的红星茵芋幼苗示意图。 具体实施方法 为了更好地理解本专利技术，下面结合具体实施例和附图来进一步说明本专利技术的实 质,但本专利技术的内容并不局限于此。 实施例1 : -种红星茵芋离体快速繁殖的方法，其步骤是： 1、培养基配制： I. 1基本培养基配制： 所述的培养基为MS，分别取大量元素母液100ml;MS微量元素母液IOml;MS有机 母液IOml;MS铁盐IOml ;肌醇IOml ;母液成分如下表1 : 表IMS本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种红星茵芋离体快速繁殖的方法，其步骤是：（1）外植体选择和消毒：以红星茵芋成熟种子为外植体，流水下冲洗30min，将其用70%体积比酒精消毒后，再用浓度为0.1%质量体积比氯化汞消毒8～10min，然后用无菌水冲洗4 次；（2）种子萌发：将消毒的种子接入萌发培养基中，在温度为24－26℃、湿度为35－45%，光照强度3000～5000μmol m‑2 s‑1，每天光照14～16h，经过25～30d 培养，种子萌发长出子叶，经过15～20d后，长出1～2片真叶；所述的种子萌发培养基包括MS 基本培养基+ 0.5mg/L GA3 +蔗糖30g/L，PH值为5.8～6.0；（3）丛芽诱导与增殖：切取1～2片真叶的顶芽，接种到丛芽诱导培养基上，在温度为24－26℃、湿度为35－45%，光照强度3000～5000μmol m‑2 s‑1，每天光照14～16h，经过25～30d 培养，获得丛生芽，挑选丛生茎芽，每隔20～25d 切割成1‑2个茎芽进行继代培养，平均每次继代1瓶转接4‑5瓶，使丛芽不断增殖；所述的丛芽诱导和增殖培养基包括MS 基本培养基+1.0～1.5mg/L 6‑BA +0.1～0.3 mg/L NAA +0.5mg/L GA3 +蔗糖30g/L，PH值为5.8～6.0；（4）生根培养：将株高3～5cm 长的试管苗，接种到生根培养基中，在温度为24－26℃、湿度为35－45%，光照强度3000～5000μmol m‑2 s‑1，每天光照14‑16h，经过14－16d幼苗就会分化出4～6条白色不定根；所述的生根培养基包括1/2MS+0.5～1.0mg/L IBA +蔗糖30g/L，PH值为5.8～6.0；（5）驯化移栽：在温室内，生根培养25－30d 后，将3条以上新根的红星茵芋组培苗进行驯化移栽，移栽用的混合基质配方为由泥炭：珍珠岩：蛭石=3:1：1V/V，移栽后，用喷雾器喷水，使根系和基质接触，然后遮阴一周后移入全光照下，温室条件为20℃～25℃，光照14～16h，光照强度为2000μmol m‑2 s‑1。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李其友，阳永学，曾红霞，肖康飞，祝菊红，程维舜，张娜，杨皓琼，毕秋荣，
申请(专利权)人：武汉市农业科学研究所，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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