The invention belongs to the technical field of plant culture, in particular to a method for tissue culture and rapid propagation of long stem Polygonatum sibiricum. A method of culturing filipes tissue and rapid propagation, the method comprises the following steps: (1) filipes bud disinfection and inoculation; (2) bud induction; (3) proliferation of adventitious bud; rooting of regenerated plants (4); (5) transplanting. The method of the invention is already reported in the literature, can shorten the treatment time, reduce the former explants low contamination rate, shorten regeneration time, thus obtained faster filipes regeneration, is conducive to industrial production. By adopting the method of the invention, the induction rate of adventitious buds of the shoots with long stem, yellow and fine shoots is as high as 90%, the number of adventitious buds is 8.4, the multiplication rate of adventitious buds is up to 7.7, and the survival rate of plant transplanting can reach more than 95%.
【技术实现步骤摘要】
一种长梗黄精组织培养与快速繁殖的方法
本专利技术属于植物培养
，具体涉及长梗黄精组织培养与快速繁殖的方法。
技术介绍
长梗黄精(PolygonatumfilipesMerr.)，为百合科黄精属多年生草本植物，分布于江苏、安徽、浙江、江西、湖南、福建、广东(北部)，生于林下、灌丛或草坡的阴湿肥沃土壤中，因其根状茎在当地以黄精入药而大量种植，同时也可食用。目前在生产中长梗黄精的繁殖采用种子和根状茎，主要以根状茎为主，存在着繁殖系数低、繁殖周期长的缺点，因此建立长梗黄精的组培快繁体系，是实现其产业化生产的又一有效途径。目前对于百合科黄精属开展的组织培养主要集中于长梗黄精和黄精，采用的外植体主要为根状茎或由根状茎产生的芽。由于根状茎生长于地下，表面带有很多杂菌，且还存在内生菌，故其污染率的控制相对较难，此外消毒后需要较长时间才能诱导出不定芽。基本上所有黄精属植物组织培养的报道采用的最佳基本培养基均是不同浓度的MS培养基，其中诱导生根前的过程主要采用MS培养基，也有采用1/2MS进行不定芽诱导的报道；诱导生根时主要采用1/2MS培养基，也有采用MS培养基的和1/3MS...
【技术保护点】
一种长梗黄精组织培养与快速繁殖的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：1）长梗黄精花蕾的消毒和接种于当年5月取尚未开花的长梗黄精的花蕾，放入冰箱4℃低温冷藏0‑48 h，取出后加入适量的洗洁精溶液浸泡2 min，用流水冲洗0.5‑1.0 h后，在超净台里将茎段转入70%的酒精溶液中浸泡1 min，用无菌水冲洗3次，浸入滴加有5滴吐温‑80，质量分数为0.1%的 HgCl
【技术特征摘要】
1.一种长梗黄精组织培养与快速繁殖的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：1）长梗黄精花蕾的消毒和接种于当年5月取尚未开花的长梗黄精的花蕾，放入冰箱4℃低温冷藏0-48h，取出后加入适量的洗洁精溶液浸泡2min，用流水冲洗0.5-1.0h后，在超净台里将茎段转入70%的酒精溶液中浸泡1min，用无菌水冲洗3次，浸入滴加有5滴吐温-80，质量分数为0.1%的HgCl2溶液内浸泡消毒9-10min，然后用无菌水充分浸洗3次，得到消毒完的外植体材料；2）丛生芽的诱导将上一步得到的外植体材料放到无菌滤纸上，切去头尾，去除雄蕊和雌蕊，将花瓣切成2cm2大小，接于添加TDZ0-2.0mg/L，NAA0-1.0mg/L，AC0-2.0g/L的MS基本培养基中，该培养基中的蔗糖添加量为30g/L，琼脂添加量为8.0g/L，pH为5.8-6.0，培养基曾于121℃下灭菌20min；接好花瓣的培养基置先于黑暗中培养0-7d，培养温度为28±2℃；随后转入光照培养，培养条件为：培养温度为28±2℃，光照时间为14h光/10h暗，光照强度30-40μmol/(m2·s)；3）不定芽的增殖将上一步诱导获得的不定芽丛切成2-3个不定芽的芽块，接种到添加有TDZ0-2.0mg/L，6-BA0-5.0mg/L，CH0-1.0mg/L，AC0-2.0g/L的MS基本培养基中进行培养，培养条件为：培养温度为28±2℃，光照时间为14h光/10h暗，光照强度30-40μmol/(m2·s)；4）再生植株的生根培养切取叶片嫩绿、生长旺盛且叶片3-4枚的不定芽，插入添加有6-BA0-4.0，NAA0-2.0mg/L，香蕉泥0-150g/L的12.5%-100%浓度的MS基本培养基中生根，培养...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙骏威，赵进，周荣鑫，
申请(专利权)人：中国计量大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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