基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物及制备方法技术

本发明专利技术公开了基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物及制备方法，所述基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物的制备方法包括：按照质量比1∶1取胡椒和荜拔药材，粉碎后采用二氧化碳超临界设备萃取；将萃取后剩余的药渣加入多功能提取罐，加10倍量70％的乙醇回流提取3次；将提取液过滤后浓缩，加3倍量的二氯甲烷萃取3次，用旋转蒸发仪浓缩成流浸膏后放入鼓风干燥箱中烘干既得活性部位。本发明专利技术降低了胡椒和荜拔组合物自身的刺激性，对永久性脑缺血大鼠的神经功能症状都有不同程度的改善，结果充分证实所制备的有效部位毒性较低且具有良好的神经保护作用。

Pepper and Piper longum the active site drug for the treatment of cerebral ischemia and preparation method based on

The invention discloses a drug for the treatment of cerebral ischemia active site and preparation method of pepper and Piper longum on the preparation process of medicine for treating cerebral ischemia active site of pepper and Piper longum based include: according to the mass ratio of 1: 1 pepper and Piper longum herbs, crushed by supercritical carbon dioxide extraction equipment; will the residue remaining after the extraction with multifunctional extraction tank, adding 10 times amount of 70% ethanol reflux extraction 3 times; the extract was filtered and concentrated, 3 times with 3 times the amount of dichloromethane, both active site drying drying box put into extract concentrated by rotary evaporation instrument. The invention reduces irritation of pepper and Piper longum composition itself, neurological symptoms on permanent cerebral ischemia rats have different degrees of improvement, the results fully confirm the neuroprotective effect of effective parts of the preparation of low toxicity and good.

【技术实现步骤摘要】
基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物及制备方法
本专利技术属于药学
，尤其涉及基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物及制备方法。
技术介绍
胡椒和荜拔是回族药学典籍中治疗脑卒中方剂中出现频率最高，用药量较大的药对。临床医学研究证明很多含有这个药物组合的回药方剂对脑卒中病人神经功能损伤都有很好的治疗作用。回药脑卒中治疗方剂特点是药材种类繁多，无明确的君臣佐使之分，这给回药脑卒中方剂的现代化开发利用带来很大的困扰。文献整理研究表明，胡椒和荜拔药物组合物可能是脑卒中方剂中的核心药物(类似于中药中的君药)。目前对这一理论的支撑研究鲜见。随着现代药学学科的快速发展，有了很多新的研究方法和手段，对脑卒中方剂中主要药物的活性部位的确定非常有必要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物及制备方法，旨在明确胡椒和荜拔药物组合物中发挥脑卒中治疗作用的有效部位，提供有效部位的制备方法，同时确定此有效部位在200mg/kg的剂量下对永久性脑缺血大鼠神经功能损伤有明显的恢复作用。本专利技术是这样实现的，基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物的制备方法，所述基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物的制备方法包括：按照质量比1∶1取胡椒和荜拔药材，粉碎后采用二氧化碳超临界设备萃取，萃取至不出油为止；将萃取后剩余的药渣加入多功能提取罐，乙醇回流提取3次；将提取液过滤后浓缩至无醇味，加3倍量的二氯甲烷萃取3次，用旋转蒸发仪浓缩成流浸膏后放入鼓风干燥箱中烘干既得活性部位。进一步，所述萃取压力：300bar；萃取温度：55℃；分离釜压力：80bar；分离温度50℃。进一步，所述10倍量70％的乙醇回流提取3次，每次2h，提取加热温度为90℃。本专利技术提供的基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物及制备方法，采用二氧化碳超临界技术去除刺激性较大的极低极性的部位，同时通过二氯甲烷萃取使有效部位不包含糖及其他大极性杂质。在小鼠急性毒性实验中，制备的活性部位在1.5g/kg的剂量下未发生动物的死亡及其他毒性特征，降低了胡椒和荜拔组合物自身的刺激性；除Longa评分外，此活性部位对永久性脑缺血大鼠的其他神经功能症状都有不同程度的改善。结果充分证实所制备的有效部位毒性较低且具有良好的神经保护作用。附图说明图1是本专利技术实施例提供的基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物的制备方法流程图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。下面结合附图对本专利技术的应用原理作详细的描述。本专利技术实施例的基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物按照质量比包括：胡椒和荜拔＝1∶1。如图1所示，本专利技术实施例的基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物的制备方法包括以下步骤：S101：按照质量比1∶1取胡椒和荜拔药材，粉碎后采用二氧化碳超临界设备萃取，萃取压力：300bar；萃取温度：55℃；分离釜压力：80bar；分离温度50℃；萃取至不出油为止；S102：将萃取后剩余的药渣加入多功能提取罐，加10倍量70％的乙醇回流提取3次，每次2h，提取加热温度为90℃；S103：将提取液过滤后浓缩至无醇味，加3倍量的二氯甲烷萃取3次，用旋转蒸发仪浓缩成流浸膏后放入鼓风干燥箱中65℃烘干既得活性部位。下面结合实验对本专利技术的应用效果作详细的说明。1通过以下的实验对本专利技术的应用效果作详细的说明1.1永久性大鼠脑缺血模型(PMCAO)的建立大鼠采用7％水合氯醛(0.5mL/100g体重)麻醉后，仰卧固定。剪开皮肤，钝性分离肌肉，暴露并分离右侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)。结扎ECA与CCA近心端，用动脉夹夹闭ICA远心端，于ECA与ICA分叉处作一切口，缓慢插入头部光滑的尼龙线(头部直径为0.26mm)，插入深度为17-18mm左右，实现右侧大脑中动脉阻塞导致脑缺血。结扎切口处，剪掉血管外的尼龙线，逐层缝合肌肉皮肤。假手术组尼龙线插入深度为5mm，其余处理同模型组，动物苏醒前用37℃的保温毯维持体温，苏醒后立即转入室温下饲养。1.2动物分组及剔除待实验动物清醒后，进行Longa神经功能评分，神经功能评分标准为：a.无神经功能损伤症状，动物正常活动评0分；b.将动物尾巴提起后，左前肢屈曲1分；c.将动物放置平板上，向左侧转圈2分；d.将动物放置平板上，用手轻推向左侧倾倒3分；e.动物左侧偏瘫，不能自发行走意识朦胧或丧失4分。将评分为2的动物纳入实验，所有死亡以及术后存活时间未达到取材时间要求的大鼠，均不列入。将大鼠随机分组为模型组，假手术组(每组10只大鼠)；脑缺血4h后给药，1次/d，给药14天。1.3神经功能评分1.3.1神经功能缺损评分分别于pMCAO后3d、6d、9d、12d、14d，按照Longa5级评分法对动物进行评分。1.3.2姿势反射实验分别于pMCAO后3d、6d、9d、12d、14d，按照Longa5级评分法对动物进行评分。O分：提鼠尾离开地面约1m，观察前肢屈曲情况，正常大鼠双前肢对称伸向地面。1分：如手术对侧前肢出现腕屈曲、肘屈曲、肩内旋或既有腕、肘的屈曲又有肩内旋者，与任何数量的一致的前肢屈曲并没有其他异常大鼠。2分：将动物置于平地面上，分别推双肩向对侧移动，正常或轻度功能失调的老鼠在两个方向上都不平等地滑动。严重功能障碍的大鼠持续减少，侧推向健侧阻力。3分：大鼠有不停地向左侧转圈者。1.3.3身体摆动测试提升鼠尾距地面1m处，分别在第3d、6d、9d、12d和14d对其进行评分。评分标准：0分：躯干左右摇摆；1分：不对称摇摆＜30℃；2分：不对称摇摆＞30℃；1.3.4横木行走试验横木长120cm，宽2.0或2.5cm，距地面80cm水平悬空放置。横木一端连接一个暗盒，以适当噪音刺激大鼠通过横木。术前训练7d，分别于pMCAO后3d、6d、9d、12d、14d为观察时间点进行检测。评分标准：6分：顺利通过；5分：通过，但损伤的后肢滑落1次；4分：滑落超过1次但不到总步数50％；3分：滑落次数超过总步数50％；2分：试图通过横木，但从横木上摔下；1分：能静卧在横木上但无法移动；0分：不能静卧在横木上，直接从横木上摔下；1.3.5前肢抓握力测试抓握力量测试评价大鼠脑缺血后前肢抓握力量的大小。测试者提住鼠尾，将大鼠置于拉力仪测试区域。当测试者拉住鼠尾向后拉拽大鼠时，大鼠试图以前肢抓握横杆不放以免从横杆滑脱。继续拖拽大鼠，直至大鼠滑脱，读取使大鼠滑脱的最大拉力值。分别于pMCAO后3d、6d、9d、12d、14d为观察时间点进行检测。1.4统计方法用SPSS17.0统计软件one-wayANOVA法检验，如果方差齐，采用LSD检验，如果方差不齐，采用Tamhane’sT2检验，P＜0.05为有统计学意义。2数据支持2.1急性毒性实验结果在小鼠急性毒性实验中，制备的有效部位在1.5g/kg的剂量下未发生动物的死亡及其他毒性特征，可以认为有效部位安全无毒。2.2活性部位对pMCAO大鼠的神经保护作用除Longa评分外，活性部位对永久性脑缺血大鼠的其他神经功能症状都有不同程度的改善本文档来自技高网...

【技术保护点】
基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物的制备方法，其特征在于，所述基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物的制备方法包括：按照质量比1∶1取胡椒和荜拔药材，粉碎后采用二氧化碳超临界设备萃取，萃取至不出油为止；将萃取后剩余的药渣加入多功能提取罐中，加10倍量70％的乙醇回流提取3次；将提取液过滤后浓缩至无醇味，加3倍量的二氯甲烷萃取3次，用旋转蒸发仪浓缩成流浸膏后放入鼓风干燥箱中烘干既得活性部位。

【技术特征摘要】
1.基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物的制备方法，其特征在于，所述基于胡椒和荜拔的治疗脑缺血活性部位药物的制备方法包括：按照质量比1∶1取胡椒和荜拔药材，粉碎后采用二氧化碳超临界设备萃取，萃取至不出油为止；将萃取后剩余的药渣加入多功能提取罐中，加10倍量70％的乙醇回流提取3次；将提取液过滤后浓缩至无醇味，加3倍量的二氯甲烷萃取3次，用旋转蒸发仪浓缩成流浸膏后放入鼓风干燥箱中烘干既得活性部位。2.如权利要求1所述的基于胡椒和荜拔的治...

【专利技术属性】
技术研发人员：张万年，付雪艳，张元斌，余建强，王兵，赵启鹏，马学琴，张立明，赵云生，白长财，吴秀丽，
申请(专利权)人：宁夏医科大学，
类型：发明
国别省市：宁夏,64