一种大鼠局部皮肤压疮模型的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种大鼠局部皮肤压疮模型的制备方法及其应用，主要是采用缺血-再灌注循环损伤法建立大鼠局部皮肤压疮模型；通过选取实验备用的大鼠并进行实验前的准备工作、然后称量和麻醉、并经过模型的制备和临床指标的检测评估模型建立情况。本发明专利技术利用大鼠局部皮肤进行制备动物压疮模型，为临床对褥疮疾的用药提供了研究的载体，为研发有效的治疗药物奠定了基础。

Method for preparing local skin pressure sore model of rats and application thereof

The invention discloses a preparation method and application of a rat model of local skin ulcer, mainly by ischemia-reperfusion injury cycle in rats was established by selecting the local skin ulcer model; experimental rats and alternate preparation before the experiment, and then set up and weighing and anesthesia, after testing the evaluation model model preparation and clinical indicators. The invention uses the local skin of the rat to prepare the animal bedsore model, and provides a carrier for the clinical study of the bedsore disease, and lays the foundation for the research and development of an effective therapeutic drug.

【技术实现步骤摘要】
一种大鼠局部皮肤压疮模型的制备方法及其应用
本专利技术涉及动物模型
，更具体的说是涉及一种大鼠皮肤压疮模型的制备方法及其应用。
技术介绍
创伤愈合在医学领域中是古老而重要的课题之一。皮肤作为一种特殊的器官，是人类与外界接触的第一道屏障，在创伤愈合中起着不容忽视的作用。皮肤损伤是一种临床上常见病，由急、慢性损伤引起。急性损伤主要是由各种外伤所致，包括：手术创面、烧伤、冻伤、火器伤等：慢性损伤则常见于压伤即褥疮溃疡、代谢性疾病如糖尿病足溃疡、放化疗术后皮肤慢性溃疡等。压疮即压力性溃疡，较早被称为褥疮，是由于身体局部组织长期受压，血液循环障碍、组织营养缺乏，导致皮肤失去正常功能而引起的组织缺损和坏死。压疮的形成是多种因素共同作用的结果，但是缺血-再灌注循环损伤是慢性皮肤损伤(压疮、糖尿病溃疡等)的主要诱因。压疮的形成是一个长期、复杂的过程，关于人压疮的活体研究还处于“婴儿期”，通过以病人为主要研究对象的实验所获得的信息仍相当匮乏。动物模型的研究能有效模拟临床环境，人为掌握多重影响因素，从而获得接近临床的压疮模型用于其病理生理机制以及防治措施的实验研究。因此，如何提供一种动物压疮模型可以为临床褥疮疾病的用药的提供载体是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种大鼠局部皮肤压疮模型的制备方法及其应用，不仅提供了一种动物压疮模型的制备方法，而且为临床上治疗褥疮疾病的用药提供了载体，更为研发出有效的治疗药物奠定了基础。为了实现上述目的，本专利技术提供如下的技术方案：一种大鼠局部皮肤压疮模型的制备方法，包括：大鼠局部皮肤压疮模型是采用缺血-再灌注循环损伤法制备的，具体包括如下步骤：(1)准备工作：选取实验备用的大鼠，并将备用大鼠在实验前禁食12h，可以自由饮水。(2)称量和麻醉：称量大鼠的体重，然后首日首次注射戊巴比妥钠麻醉大鼠，剂量为50mg/kg大鼠，采用腹腔注射；并在之后维持麻醉状态，同时按40mg/kg大鼠剂量酌情补充麻醉。(3)模型的制备：待大鼠完全麻醉后，使大鼠俯卧，将大鼠左下肢股骨大转子至胫骨前区皮肤持续负重6h，然后将负重的创面皮肤剪开，使其形成直径1.0cm的缺损面，并在缺损面上持续三天负重，每次负重持续6h。(4)临床指标检测：通过大鼠局部表层变化情况的观察和病理组织学检查来评估模型建立情况；大鼠局部表层变化情况具体包括：每日观察压疮皮肤表层变化、创面自愈状况、创面自愈程度统计分析；病理组织学检查具体包括：处死大鼠后取新生皮肤，并用福尔马林固定，采用石蜡切片以及HE染色，观察皮肤的改变和附件情况。优选的，在上述一种大鼠局部皮肤压疮模型制备方法中，所述大鼠选用体重在280-320g，雌雄各半的SD大鼠，并饲养在SPF洁净级动物房内，室温20-24℃，相对湿度50-60％，同时可以自动调控昼夜各12h，颗粒饲养喂养，自由饮水。优选的，在上述一种大鼠局部皮肤压疮模型制备方法中，所述大鼠负重物是指接触皮肤表面的压疮面直径约1.0cm，总重量在1.37-1.39kg的物体。优选的，在上述一种大鼠局部皮肤压疮模型制备方法中，所述临床指标检测是指损伤部位新生皮肤及下层肌肉组织病理学检查，包括皮下纤维组织增生、肌肉变性、萎缩、纤维细胞、毛细血管增生、炎细胞浸润。优选的，所述的一种大鼠局部皮肤压疮模型在筛选治疗褥疮疾病药物中的应用，为临床治疗褥疮疾病的用药提供载体。经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术主要是采用缺血-再灌注循环损伤法建立大鼠局部皮肤压疮模型；通过选取实验备用的大鼠并进行实验前的准备工作、然后称量和麻醉、并经过模型的制备和临床指标的检测评估模型建立情况。本专利技术利用大鼠局部皮肤进行制备动物压疮模型，为临床对褥疮疾的用药提供了研究的载体，为研发有效的治疗药物奠定了基础。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。图1附图为不同性别的大鼠创面自愈指数：模型建立后，每间隔两天，检测创面的愈合速度，所有数据以均数±标准差表示。图2附图为大鼠创面变化情况观察：随时间推移，肉眼观察表层创面皮肤变化。图3附图是病理检查模型建立3周后创面皮肤和里层肌肉的病理改变情况图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术实施例公开了一种大鼠局部皮肤压疮模型的制备方法及其应用，不仅提供了一种动物压疮模型的制备方法，而且为临床上治疗褥疮疾病的用药提供了载体，更为研发出有效的治疗药物奠定了基础。本专利技术提供的一种大鼠局部皮肤压疮模型的制备方法，采用大鼠局部皮肤压疮模型是采用缺血-再灌注循环损伤法制备的，具体包括如下步骤：(1)准备工作：选取实验备用的大鼠，并将备用大鼠在实验前禁食12h，可以自由饮水。(2)称量和麻醉：称量大鼠的体重，然后首日首次注射戊巴比妥钠麻醉大鼠，剂量为50mg/kg大鼠，采用腹腔注射；并在之后维持麻醉状态，同时按40mg/kg大鼠剂量酌情补充麻醉。(3)模型的制备：待大鼠完全麻醉后，使大鼠俯卧，将大鼠左下肢股骨大转子至胫骨前区皮肤持续负重6h，然后将负重的创面皮肤剪开，使其形成直径1.0cm的缺损面，并在缺损面上持续三天负重，每次负重持续6h。(4)临床指标检测：通过大鼠局部表层变化情况的观察和病理组织学检查来评估模型建立情况；大鼠局部表层变化情况具体包括：每日观察压疮皮肤表层变化、创面自愈状况、创面自愈程度统计分析；病理组织学检查具体包括：处死大鼠后取新生皮肤，并用福尔马林固定，采用石蜡切片以及HE染色，观察皮肤的改变和附件情况。为了进一步优化上述技术方案，大鼠选用体重在280-320g，雌雄各半的SD大鼠，并饲养在SPF洁净级动物房内，室温20-24℃，相对湿度50-60％，同时可以自动调控昼夜各12h，颗粒饲养喂养，自由饮水。为了进一步优化上述技术方案，大鼠负重物是指接触皮肤表面的压疮面直径约1.0cm，总重量在1.37-1.39kg的物体。为了进一步优化上述技术方案，临床指标检测是指损伤部位新生皮肤及下层肌肉组织病理学检查，包括皮下纤维组织增生、肌肉变性、萎缩、纤维细胞、毛细血管增生、炎细胞浸润。为了进一步优化上述技术方案，一种大鼠局部皮肤压疮模型在筛选治疗褥疮疾病药物中的应用，为临床治疗褥疮疾病的用药提供载体。本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对于实施例公开的装置而言，由于其与实施例公开的方法相对应，所以描述的比较简单，相关之处参见方法部分说明即可。对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本专利技术。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大鼠局部皮肤压疮模型的制备方法，其特征在于，大鼠局部皮肤压疮模型是采用缺血‑再灌注循环损伤法制备的，具体包括如下步骤：(1)准备工作：选取实验备用的大鼠，并将备用大鼠在实验前禁食12h，可以自由饮水。(2)称量和麻醉：称量大鼠的体重，然后首日首次注射戊巴比妥钠麻醉大鼠，剂量为50mg/kg大鼠，采用腹腔注射；并在之后维持麻醉状态，同时按40mg/kg大鼠剂量酌情补充麻醉。(3)模型的制备：待大鼠完全麻醉后，使大鼠俯卧，将大鼠左下肢股骨大转子至胫骨前区皮肤持续负重6h，然后将负重的创面皮肤剪开，使其形成直径1.0cm的缺损面，并在缺损面上持续三天负重，每次负重持续6h。(4)临床指标检测：通过大鼠局部表层变化情况的观察和病理组织学检查来评估模型建立情况；大鼠局部表层变化情况具体包括：每日观察压疮皮肤表层变化、创面自愈状况、创面自愈程度统计分析；病理组织学检查具体包括：处死大鼠后取新生皮肤，并用福尔马林固定，采用石蜡切片以及HE染色，观察皮肤的改变和附件情况。

【技术特征摘要】
1.一种大鼠局部皮肤压疮模型的制备方法，其特征在于，大鼠局部皮肤压疮模型是采用缺血-再灌注循环损伤法制备的，具体包括如下步骤：(1)准备工作：选取实验备用的大鼠，并将备用大鼠在实验前禁食12h，可以自由饮水。(2)称量和麻醉：称量大鼠的体重，然后首日首次注射戊巴比妥钠麻醉大鼠，剂量为50mg/kg大鼠，采用腹腔注射；并在之后维持麻醉状态，同时按40mg/kg大鼠剂量酌情补充麻醉。(3)模型的制备：待大鼠完全麻醉后，使大鼠俯卧，将大鼠左下肢股骨大转子至胫骨前区皮肤持续负重6h，然后将负重的创面皮肤剪开，使其形成直径1.0cm的缺损面，并在缺损面上持续三天负重，每次负重持续6h。(4)临床指标检测：通过大鼠局部表层变化情况的观察和病理组织学检查来评估模型建立情况；大鼠局部表层变化情况具体包括：每日观察压疮皮肤表层变化、创面自愈状况、创面自愈程度统计分析；病理组织学检查具体包括：处死大鼠后取新生皮肤，并用福尔马林固定，采用石蜡切片以及H...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩忠朝，梁璐，
申请(专利权)人：天津昂赛细胞基因工程有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12