一种防止RNA降解的样品保存液以及保存方法技术

本发明专利技术涉及一种防止RNA降解的样品保存液，其包含0.1‑0.5M的柠檬酸钠，质量体积比50‑100％的硫酸铵，质量体积比30‑50％的柠檬酸和质量体积比30‑50％的硫酸钠；还涉及一种保存生物样品的方法，其包括将取得的新鲜的生物样品立即浸泡于权利要求1所述的样品保存液中并于低温下储存的步骤。使用本发明专利技术的样品保存液和方法可防止样品中的RNA在短期或长期保存过程中发生降解，保持样品中的RNA的完整性，为病理或科研的分析提供良好的分析材料。

Sample preservation solution for preventing RNA degradation and storage method

The invention relates to a method for preventing the degradation of RNA preservation solution samples, sodium citrate containing 0.1 0.5M, the quality volume ratio of ammonium sulfate 50 100%, the quality volume ratio of citric acid and 30 mass to volume ratio of 50% sodium sulfate 30 50%; to a method of preservation of biological samples, preservation in the low temperature storage step solution and fresh biological samples including the immediately immersed in claim 1 of the sample. Sample preservation and use of the method of the invention can prevent the sample degradation of RNA occurs in the short or long term preservation process, to maintain the integrity of the RNA in the sample analysis, provide good materials for scientific research or pathological analysis.

【技术实现步骤摘要】
一种防止RNA降解的样品保存液以及保存方法
本专利技术涉及分子生物学试剂领域，更特别地，涉及一种防止RNA降解的样品保存液，以及一种保存生物样品的方法。
技术介绍
生物样品保存是病理学和科学研究中的不可或缺的一环，不同的检测目的需要不同的保存环境。RNA的检测已经逐渐成为针对病理样品和科研样品的重要检测指标之一。因此，生物样品的保存除了要注意保留生物样品的形态、蛋白质和基因组之外，防止RNA的降解也成为的必要条件之一。由于生物体内以及环境中广泛存在RNA酶，这些酶很容易降解样品中的RNA，因此需要一种新的防止RNA降解的样品保存液。
技术实现思路
为解决以上问题，本专利技术提供了一种防止RNA降解的样品保存液，其包含0.1-0.5M的柠檬酸钠，质量体积比50-100％的硫酸铵，质量体积比30-50％的柠檬酸和质量体积比30-50％的硫酸钠，以上所述质量体积比为每100毫升溶剂中所含的溶质的克数。本专利技术还提供了一种保存生物样品的方法，其包括将取得的新鲜的生物样品立即浸泡于权利要求1所述的样品保存液中并于低温下储存的步骤。进一步地，所述生物样品为组织样品，所述组织样品与所述样品保存液的量的比为每1g样品5-10ml样品保存液。优选地，所述组织样品中的每个组织块的大小不超过1×1×1cm。进一步地，所述生物样品为培养的细胞或微生物，所述培养的细胞或微生物样品与所述样品保存液的量的比为每1ml样品5-10ml样品保存液。优选地，储存时间短于一周时，储存温度不高于25℃。优选地，储存时间为7-30天时，储存温度为不高于4℃。优选地，储存时间长于30天时，储存温度为不高于-20℃。使用本专利技术的样品保存液和方法可防止样品中的RNA在短期或长期保存过程中发生降解，保持样品中的RNA的完整性，为病理或科研的分析提供良好的分析材料。附图说明图1为本专利技术的样品保存液和市售的RNAlater于18-25℃储存7天后的小鼠心脏组织和皮肤组织提取的总RNA的琼脂糖凝胶电泳图，其中泳道1和3分别为本专利技术的样品保存液保存的心脏组织和皮肤组织，泳道2和4分别为市售的RNAlater保存的心脏组织和皮肤组织；图2为本专利技术的样品保存液和市售的RNAlater于18-25℃储存7天后的小鼠肾组织提取的总RNA的琼脂糖凝胶电泳图，泳道1为本专利技术的样品保存液保存的肾组织，泳道2为市售的RNAlater保存的肾组织。具体实施方式以下结合实例对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。1.样品保存液所述样品保存液包含0.1-0.5M的柠檬酸钠，质量体积比50-100％的硫酸铵，质量体积比30-50％的柠檬酸和质量体积比30-50％的硫酸钠。2.样品保存方法该样品保存液适用于新鲜动植物组织和培养细胞、菌体，但不适用于保存冷冻样品。保存步骤如下：1)将新鲜组织样本切割为不超过黄豆大小的块；培养细胞、菌体可不进行处理；2)将处理后的样本按照1g(1ml)样本加入5～10ml样本保存液的比例完全浸入样本保存液中；3)将保存的样本储存于适当的环境下，保存时间与使用环境关系如表1所示。表1储存时间与储存温度的关系储存温度储存时间37℃1天25℃1周4℃1个月-20℃长期提取核酸时，用消毒镊子将组织从样本保存液中取出，直接进行核酸的提取；保存的细胞取出后离心去上清，然后进行核酸的提取。3.本专利技术的样品保存液与市售的RNAlater的效果比较将新鲜的小鼠心脏组织和皮肤组织分别保存于本专利技术的样品保存液和市售的RNAlater中，于18-25℃中储存7天，然后用TRIzol提取RNA；将新鲜的小鼠肾脏组织分别保存于本专利技术的样品保存液和市售的RNAlater中，于4℃中储存30天，然后用TRIzol提取RNA，提取的RNA最终溶于相同体积的溶液中。用分光光度计检测RNA浓度及纯度(260/280)，计算RNA提取量，并用琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性。从分光光度计检测结果可知，室温(18℃-25℃)放置7天后，相同体积下，用RNAkeeper试剂保存的样品提取的RNA浓度比用RNAlater试剂保存的样品提取的RNA浓度高，RNA纯度两者一致。通过计算可知，用RNAkeeper试剂保存的样品提取的RNA量明显高于用RNAlater试剂保存的样品提取的RNA量(表2)。从琼脂糖凝胶电泳图上可知，两种试剂保存的样品提取的RNA都很完整(图1)。4℃放置30天后，相同体积下，用RNAkeeper试剂保存的样品提取的RNA浓度比用RNAlater试剂保存的样品提取的RNA浓度高，RNA纯度两者一致。通过计算可知，用RNAkeeper试剂保存的样品提取的RNA量明显高于用RNAlater试剂保存的样品提取的RNA量(表2)。用RNAkeeper试剂保存的样品提取的RNA完整性优于用RNAlater试剂保存的样品提取的RNA(图2)。表2本专利技术的样品保存液和市售的RNAlater的保存效果比较以上所述仅为本专利技术的较佳实施例，并不用以限制本专利技术，凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种防止RNA降解的样品保存液，其特征在于，包含0.1‑0.5M的柠檬酸钠，质量体积比50‑100％的硫酸铵，质量体积比30‑50％的柠檬酸和质量体积比30‑50％的硫酸钠。

【技术特征摘要】
1.一种防止RNA降解的样品保存液，其特征在于，包含0.1-0.5M的柠檬酸钠，质量体积比50-100％的硫酸铵，质量体积比30-50％的柠檬酸和质量体积比30-50％的硫酸钠。2.一种保存生物样品的方法，其特征在于，包括将取得的新鲜的生物样品立即浸泡于权利要求1所述的样品保存液中并储存的步骤。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述生物样品为组织样品，所述组织样品与所述样品保存液的量的比为每1g样品对应5-10ml样品保存液。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述组织样品中的每个组织块的大小不超过1×1×1cm。5.根据权利要求2所述的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：王华林，张涛，
申请(专利权)人：湖北新纵科病毒疾病工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42