The invention belongs to the field of marine biotechnology, in particular to a method of seven grouper sperm is stable, highly efficient cryopreservation. The semen of seven band grouper and antifreeze liquid according to the volume ratio of 5:1-10:1 mixing ratio, mixing after step balance processing, three step program after cooling into liquid nitrogen (-196 C), packing and storing; antifreeze liquid is composed of diluent, antifreeze, additives of three parts. The high-quality frozen essence obtained by the method of efficient freeze preservation of the seven grouper fish of the invention has important significance for artificial breeding, genetic conservation, genetic diversity and sustainable breeding of the seven grouper.
【技术实现步骤摘要】
一种七带石斑鱼精子超低温保存的方法
本专利技术属海洋生物
，具体地说是一种七带石斑鱼精子稳定、高效超低温冷冻保存的方法。
技术介绍
七带石斑鱼(Epinephelusseptemfasciatus)，鲈形目(Perciformes),鲈亚目、鮨科(Serranidae),石斑鱼亚科(Epinephelinae),石斑鱼属(Epinephelus)，俗称：七带斑、石斑、子鱼、真脂、过鱼，主要分布于黄海与东海沿岸，是唯一分布在黄海区域的石斑鱼品种。七带石斑鱼属于大型石斑鱼，具有生长快、耐低温、适应能力强、营养物质丰富、肉质鲜美等优点，深受广大消费者的喜爱，具有较大的经济价值和市场潜力。七带石斑鱼的研究是从2002年开始的，主要集中在人工繁育技术、胚胎发育、肌肉营养、疾病等方面，七带石斑鱼苗种规模化繁育技术和人工养殖方面的研究性工作报道较少。石斑鱼是雌性先熟，雄性后熟并具有性逆转(Sexreversal)特性，雄性亲鱼获得较难，优质精子难以获得，是石斑鱼苗种规模化生产受到限制的一个重要因素。集中批量保存优质七带石斑鱼精液，在需要时解冻进行人工授精获得受精卵，从而克...
【技术保护点】
一种七带石斑鱼精子超低温保存的方法，其特征在于：将七带石斑鱼的精液与抗冻液按体积比5:1‑10:1的比例混合，混合后经过一步平衡，三步降温处理后投入到液氮(‑196℃)，分装保存；抗冻液由稀释液、二甲基亚砜(DMSO)、蔗糖三部分组成；其中，稀释液为NaCl 7.5g/L，MgSO
【技术特征摘要】
1.一种七带石斑鱼精子超低温保存的方法，其特征在于：将七带石斑鱼的精液与抗冻液按体积比5:1-10:1的比例混合，混合后经过一步平衡，三步降温处理后投入到液氮(-196℃)，分装保存；抗冻液由稀释液、二甲基亚砜(DMSO)、蔗糖三部分组成；其中，稀释液为NaCl7.5g/L，MgSO4·7H2O0.1g/L，Na2HPO4·2H2O0.1g/L，NaHCO30.4g/L；12-15％DMSO(二甲基亚砜)；添加剂：蔗糖30-35g/L。2.按权利要求1所述的七带石斑鱼精子超低温保存的方法，其特征在于：所述七带石斑鱼的精液与抗冻液在碎冰中(0℃)轻轻震荡、充分混匀10-30s，，在0-4℃平衡0.5-1min，然后以-10--12℃/min降温至...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘清华，李军，官曙光，王学颖，徐世宏，
申请(专利权)人：中国科学院海洋研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37
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