【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，涉及植物愈伤组织的保存，具体涉及一种新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar.et Kir.)愈伤组织超低温保存的方法,通过低大气压力对新疆雪莲愈伤组织进行预处理，明显提高于愈伤组织超低温保存后组织的复活率，为新疆雪莲种质保存提供技术依据。
技术介绍
新疆雪莲属菊科(Compositae)菜蓟族(Trib.Cynareae Less.)凤毛菊属(Saussurea sp.)多年生草本植物,是一种名贵的高原药用植物。新疆雪莲具有散寒除湿、强筋助阳、抗炎镇痛、收缩子宫等功能，可治疗妇女小腹冷痛、阳痿、抗衰老及抑制癌细胞增生等作用。新疆雪莲主要分布在海拔2400~4100m的高山冰溃石、流石滩石隙及高山草甸悬崖峭壁上，其生境的土壤极为贫瘠，再加上恶劣的高原环境，其生长速度缓慢，从种子发芽到开花结籽需3至5年时间。因此，野生的新疆雪莲资源非常有限，再加上近年来对雪莲的大规模、无计划的采挖，更是造成了该植物资源的急剧减少。1988年新疆雪莲的资源总量还有2830多万株，而现在可采集量仅为300万株，在《中国珍稀濒...
【技术保护点】
一种新疆雪莲愈伤组织超低温保存的方法，其特征在于，按以下步骤进行：步骤一，新疆雪莲愈伤组织的获得：取新疆雪莲种子，用浓度为0.1%的升汞进行表面灭菌，再转接到MS培养基上进行萌发；将萌发后长出的子叶作为外植体，切割成0.3cm2大小，然后接到含2.5mg/L a‑萘乙酸和0.5mg/L6‑苄氨基腺嘌呤的MS培养基上进行培养，培养温度25℃±2℃，光照强度为3000Lux，光周期16小时；培养35天后获得新疆雪莲愈伤组织；步骤二，新疆雪莲愈伤组织的继代：将步骤一诱导出的新疆雪莲愈伤组织转接到含有a‑萘乙酸：2.5mg/L、6‑苄氨基腺嘌呤：0.5mg/L的MS培养基上进行培养...
【技术特征摘要】
1.一种新疆雪莲愈伤组织超低温保存的方法，其特征在于，按以下步骤进行: 步骤一，新疆雪莲愈伤组织的获得: 取新疆雪莲种子，用浓度为0.1%的升汞进行表面灭菌，再转接到MS培养基上进行萌发；将萌发后长出的子叶作为外植体，切割成0.3cm2大小，然后接到含2.5mg/L a-萘乙酸和0.5mg/L6-苄氨基腺嘌呤的MS培养基上进行培养，培养温度25 V ±2°C，光照强度为3000LUX，光周期16小时；培养35天后获得新疆雪莲愈伤组织； 步骤二，新疆雪莲愈伤组织的继代: 将步骤一诱导出的新疆雪莲愈伤组织转接到含有a-萘乙酸:2.5mg/L、6-苄氨基腺嘌呤:0.5mg/L的MS培养基上进行培养，培养温度25°C ±2°C，光照强度为4000Lux，光周期16小时；培养25天后可用于低大气压力预培养； 步骤三，新疆雪莲愈伤组织的低大气压力预培养: 将培养25天的新疆雪莲愈伤组织转移到低大气压力下培养预培养4-8天，然后直接作为超低温保存的材料； 步骤四，新疆雪莲愈伤组织的超低温保存: 将经过低大气压力预培养的新疆雪莲愈伤组织在室温下无菌转移到60%的玻璃化溶液中处理30分钟，再在0°C下无菌转移到浓度为100%的玻璃化溶液中处理45分钟，再用100%的玻璃化溶液洗涤，...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭斌，尉亚辉，何玮，祁昊楠，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61
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