一种以凋亡信号调节激酶1N端二聚化为靶点筛选用于治疗脂肪性肝炎药物的方法技术

本发明专利技术公开了凋亡信号调节激酶1（ASK1）的用途，以凋亡信号调节激酶1 N端二聚化为靶点筛选预防、缓解和/或治疗脂肪性肝炎的药物。本发明专利技术还公开了以凋亡信号调节激酶1 N端二聚化为靶点筛选预防、缓解和/或治疗脂肪性肝炎的药物的方法。本发明专利技术首次公开了ASK1的N端二聚化对于ASK1的磷酸化激活以及ASK1‑JNK信号通路具有重要意义，对于肝脏细胞脂肪变性具有重要的调控作用，可促进肝脏脂肪变性的发展。以ASK1的N端二聚化为靶点，通过检测候选物质是否抑制ASK1的N端二聚化，可以筛选新型预防、缓解和/或治疗脂肪性肝炎的药物。

【技术实现步骤摘要】
一种以凋亡信号调节激酶1N端二聚化为靶点筛选用于治疗脂肪性肝炎药物的方法
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术涉及一种以凋亡信号调节激酶1(ASK1,Apoptosissignal-regulatedkinase1)N端二聚化为靶点的筛选模型的建立，并将筛选得到的ASK1N端二聚化抑制剂应用于制备预防、缓解和/或治疗脂肪性肝炎疾病的药物中。
技术介绍
凋亡信号调节激酶1(ASK1,Apoptosissignal-regulatedkinase1)是有丝分裂原激活的蛋白激酶激酶激酶(MAPKKK)家族成员之一。ASK1蛋白包含1375个氨基酸残基，分子量约为160kDa[1]。ASK1的蛋白结构分为5部分，其中N端的46-277号氨基酸为硫氧还蛋白(Trx)结合区，297-324号氨基酸为N端卷曲螺旋结构域，384-655号氨基酸为TRAF结合区，687-945号氨基酸为ASK1的激酶结构域，而1239-1295号氨基酸则为C端卷曲螺旋结构域[2]。在正常状态下，ASK1通过C端的卷曲螺旋结构域进行同源寡聚反应，形成分子量约为1500-2000kDa的高分子量复合体，同时T本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种凋亡信号调节激酶1的用途，其特征在于，以凋亡信号调节激酶1 N端二聚化为靶点筛选预防、缓解和/或治疗脂肪性肝炎的药物。

【技术特征摘要】
1.一种凋亡信号调节激酶1的用途，其特征在于，以凋亡信号调节激酶1N端二聚化为靶点筛选预防、缓解和/或治疗脂肪性肝炎的药物。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的药物能够抑制凋亡信号调节激酶1N端二聚化。3.一种以凋亡信号调节激酶1N端二聚化为靶点筛选预防、缓解和/或治疗脂肪性肝炎的药物的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：（a）将含有凋亡信号调节激酶1N端的体系和候选物质进行接触；所述的含有凋亡信号调节激酶1N端的体系是含有凋亡信号调节激酶1N端的细胞，或是含含有凋亡信号调节激酶1N端的溶液；（b）观察候选物质对于凋亡信号调节激酶1N端二聚化的影响；其中，若所述候选物质可抑制凋亡信号调节激酶1N端二聚化，则表明该候选物质是预防、缓解和/或治疗脂肪性肝炎的潜在物质。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤（a）包括：在测试组中，将候选物质加入到含有凋亡信号调节激酶1N端的体系中；和/或步骤（b）包括：检测测试组的体系中凋亡信号调节激酶1N端的二聚化作用，并与对照组比较，其中所述的对照组是不添加所述候选物质的含有凋亡信号调节激酶1N端的体系；其中，如果测试组中检测结果显示凋亡信号调节激酶1N端二聚化受抑制，就表明该候选物质是预防、缓解和/或治疗脂肪性肝炎的潜在物质。5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤（a）包括：（1）选用CheckMate™哺乳动物双杂交系统，分别将编码凋亡信号调节激酶1N端1-678号氨基酸的DNA连接至编码DNA结合结构域的pBIND载体以及转录激活结构域的pACT载体中，并将两种载体转染至动物细胞中，构建凋亡信号调节激酶1N端二聚化哺乳动物双杂交筛选系统；若凋亡信号调节激酶1的N端正常二聚化，则当上述细胞继续转染入pG5luc载体后，萤火虫荧光素酶报告基因高水平表达；若凋亡信号调节激酶1的N端二聚化被抑制，则pG5luc载体上的萤火虫荧光素酶报告基因不表达；通过Dual-Luciferase双荧光素酶报告基因检测系统可分析凋亡信号调节激酶1的N端二聚化情况；其中，编码凋亡信号调节激酶1N端1-678号氨基酸的氨基酸序列如SEQNO：1所示，核苷酸序列如SEQNO：2所示；（2）将候选短肽的核苷酸片段分别连接至psi-Flag载体中，将候选短肽质粒psi-flag-Peptides与pG5luc质粒同时转染上述已构建的用于凋亡信号调节激酶1N端二聚化筛选的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李红良，王丕晓，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42