泛激酶活化与信号通路的评估制造技术

技术编号:7147771 阅读:257 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供了用于测定信号转导途径信号蛋白的方法和试剂。本领域需要一种能准确检测信号转导抑制剂在患者体内效率的测试方法,也需要其它检测和监控一些与信号转导途径信号蛋白的异常活化有关的疾病或紊乱的方法。本发明专利技术提供了一种高灵敏度的分析方法,该方法还可用于难以在其体内获得大量样品的患者群体例如新生儿。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术的一些实施方式涉及信号转导途径中信号蛋白激活状态的测定方法。在至 少一些实施方式中,提供了监测患者体内信号转导抑制剂效率的方法。本专利技术更进一步地 提供了高灵敏度的测试方法,该方法可用于难以获得大量细胞样品的患者群体,例如新生 儿等。本专利技术的一些实施方式涉及识别新的信号转导途径蛋白抑制剂的方法。本专利技术的一 些实施方式涉及检测患者样本中脓毒症的方法。还提供了实践本专利技术方法的试剂盒。许多疾病具有细胞信号途径被破坏而导致包括癌细胞不受控制地生长和增殖以 及异常发炎过程等病变的特征。此类缺损可以包括脂类激酶(参与催化磷酸基团向脂质转 移的一类酶)的活性变化。这些磷酸化的脂质依次募集下游蛋白质,从而把上游信号介质 例如受体酪氨酸激酶和抗原受体等产生的信号放大。例如,蛋白激酶Akt由磷脂募集至质 膜并被激活。一旦被激活,Akt就在正常组织和癌变组织的存活中起到关键的作用。磷脂酰肌醇3-激酶(PUKs)是一类在很多细胞表面受体的下游信号通路中起着 关键作用的脂类激酶家族,控制着生长、增殖以及细胞存活。活性的PDKs由两个亚单位组 成,一个分子量为85或者55kD的调节本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定在含有白细胞的样品中信号转导途径信号蛋白的激活状态的方法,包括:a)将含有白细胞的样品暴露于泛激酶激活剂,以激活该样品的白细胞中的至少一种信号转导途径中的可激活蛋白;b)用保存剂保存激活后的样品;c)将所述样品中被保存白细胞的胞内表位解掩蔽;d)使被保存的白细胞中解掩蔽的胞内表位与多个经荧光标记的捕捉分子相接触,所述多个捕捉分子包括至少两种不同的捕捉分子和至少一种对照捕捉分子,所述至少两种不同的捕捉分子能结合至所述样品中被保存、被激活的白细胞中至少两个不同的解掩蔽的胞内表位的激活态,其中所述对照捕捉分子可结合至位于被保存的白细胞上未被泛激酶激活剂激活的表位上;e)检测由于所述捕捉分...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:戴维·赫德利
申请(专利权)人:贝克曼考尔特公司
类型:发明
国别省市:US

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