卡他莫拉氏菌的交叉保护表位和其使用方法技术

本发明专利技术涉及施用于对卡他莫拉氏菌敏感的宿主的免疫原性组合物。更具体地，本发明专利技术涉及卡他莫拉氏菌ＣｏｐＢ蛋白质的交叉反应表位序列的鉴定。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般涉及微生物学、临床细菌学和免疫学领域。更具体地，本专利技术涉及鉴定卡他莫拉氏菌(Moraxella catarrhalis)的CopB蛋白质的新的交叉反应性表位序列。
技术介绍
卡他莫拉氏菌，以及流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)和肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是中耳炎(OM)的三种主要的细菌病因。在儿童中，中耳炎是访问儿科医生的最主要的原因，具有渗出液的中耳炎可以导致迟至青少年的发育问题(Bennett等人，2001)。据估计卡他莫拉氏菌占所有中耳炎病例的高达23％(Murphy，1996)。此外，卡他莫拉氏菌通常与年长的成年人中呼吸道感染，尤其慢性阻塞性肺病的恶化有关(Sethi和Murphy，2001)。从而，用于防止卡他莫拉氏菌感染的免疫原性组合物将非常有益于这些群体的健康。实际上，1989Consensus Report总结，由于中耳炎在婴儿和儿童，以及所有年龄组的某些群体中发生，中耳炎的预防是重要的卫生保健目标(匿名，″Consensus″，Pediatr.Infect.Dis.J.，8594-597，1989)。估计中耳炎的总的经济负担为每年至少2.5亿美元。在Consensus Report中将疫苗确定为防止中耳炎的最希望的方法。卡他莫拉氏菌的CopB蛋白质是用于包括在免疫原性组合物中的若干有希望的候选抗原之一。该80kDa的完整外部膜蛋白介导铁获取并且对于该细菌体内的生存是必需的(Helminen等人，1993a)。已经报导copB基因存在于所检查的每种分离物(Bootsma等人，2000)中并且从分离物到分离物相对良好地保守(Sethi等人，1997；Helminen等人，1993b)。CopB蛋白质与奈瑟氏菌属的FetA蛋白质(以前称作FrpB蛋白质)具有同源性，FetA蛋白质作为肠杆菌素铁载体的受体(Aebi等人，1996；Campagnari等人，1994；Carson等人，1999)。将CopB考虑为潜在的候选抗原的主要原因是CopB特异的单克隆抗体(Mab)10F3显示出依赖补体的杀细菌活性(Aebi等人，1998)，并且在肺的移地发育攻击模型中，用10F3对小鼠的被动免疫促进了细菌清除(Helminen等人，1993b)。与CopB血清学有关的唯一出版的信息来自对Mab反应性的研究。Helminen等人表明Mab 10F3识别与70％的卡他莫拉氏菌分离物(Helminen等人，1993b)。Sethi等人使用不同的Mab组(Sethi等人，1997)报导了类似的反应性模式，并且来自相同实验室的报导表明CopB可能具有免疫显性表位(Ameen等人，1998)。作图揭示MAb 10F3的表位结构域在CopB蛋白质的氨基酸残基295和302之间发生，并且10F3阳性分离物035E表位和10F3阴性分离物TTA24表位之间有单个氨基酸差异(Aebi等人，1998；国际申请WO 98/06851)。如上面陈述，正在研究卡他莫拉氏菌的CopB外部膜蛋白作为候选免疫原。有效免疫原需要引起针对群体中发生的多数，甚至全部卡他莫拉氏菌株系的交叉保护。因此，本领域中强烈希望鉴定一种或多种CopB表位，其赋予针对高浓度卡他莫拉氏菌株系的保护(例如，交叉保护)。预计这种CopB交叉反应表位将具有治疗用途，用作免疫原性组合物以施用于对卡他莫拉氏菌感染敏感的宿主。专利技术概述本专利技术广义的涉及用于施用于对卡他莫拉氏菌感染敏感的宿主的免疫原性组合物。更具体地，本专利技术涉及鉴定卡他莫拉氏菌的CopB蛋白质的交叉反应性表位序列。具体地，本专利技术利用了所发现的两种新的卡他莫拉氏菌CopB血清组血清组III，其具有SEQ ID NO3的CopB表位结构域；和血清组IV，其具有SEQ ID NO4的CopB表位结构域。在某些实施方案中，本专利技术涉及含有卡他莫拉氏菌多肽片段的免疫原性组合物，其中所述片段含有SEQ ID NO1、SEQ ID NO2和SEQ ID NO3的氨基酸序列。在另一实施方案中，本专利技术提供了含有卡他莫拉氏菌多肽片段的免疫原性组合物，其中所述片段含有SEQID NO1、SEQ ID NO2和SEQ ID NO4的氨基酸序列。在再一实施方案中，本专利技术提供了含有卡他莫拉氏菌多肽片段的免疫原性组合物，其中所述片段含有SEQ ID NO1、SEQ ID NO2、SEQ ID NO3和SEQ ID NO4的氨基酸序列。在一个实施方案中，将该片段进一步限定为CopB表位。在另一实施方案中，本专利技术提供了含有卡他莫拉氏菌多肽片段的免疫原性组合物，其中所述片段含有SEQ ID NO3和/或SEQ ID NO4的氨基酸序列。在某些其他实施方案中，将SEQID NO3定义为卡他莫拉氏菌的分离物430345、卡他莫拉氏菌分离物046E或者卡他莫拉氏菌分离物56的CopB多肽内所含有的氨基酸序列。在其他实施方案中，将SEQ ID NO4定义为卡他莫拉氏菌分离物4608.1的CopB多肽内所含的氨基酸序列。在某些其他实施方案中，所述片段与载体蛋白质共价结合(缀合)并且可以含有一种或多种佐剂。在优选实施方案中，所述免疫原性组合物当以免疫原性量施用于哺乳动物宿主时，保护该宿主抵抗75％以上的卡他莫拉氏菌株系。在一个实施方案中，本专利技术涉及含有至少三种卡他莫拉氏菌多肽的免疫原性组合物，其中第一种多肽含有至少SEQ ID NO1的氨基酸序列，第二种多肽含有至少SEQ ID NO2的氨基酸序列，第三种多肽含有至少SEQ ID NO3的氨基酸序列。在某些实施方案中，该免疫原性组合物还含有含有至少SEQ ID NO4的氨基酸序列的第四种多肽。在另一实施方案中，本专利技术涉及含有三种卡他莫拉氏菌多肽的免疫原性组合物，其中第一种多肽含有至少SEQ ID NO1的氨基酸序列，第二种多肽含有至少SEQ ID NO2的氨基酸序列，第三种多肽含有至少SEQ ID NO4的氨基酸序列。在其他实施方案中，本专利技术涉及含有至少两种卡他莫拉氏菌多肽的免疫原性组合物，其中第一种多肽含有至少SEQ ID NO3的氨基酸序列，第二种多肽含有至少SEQ ID NO4的氨基酸序列。在其他实施方案中，本专利技术涉及含有包含SEQ ID NO3的氨基酸序列的卡他莫拉氏菌多肽的免疫原性组合物。在其他实施方案中，本专利技术涉及含有包含SEQ ID NO4的氨基酸序列的卡他莫拉氏菌多肽的免疫原性组合物。在其他实施方案中，所述免疫原性组合物还含有第四种多肽，其含有至少SEQ ID NO3的氨基酸序列。在其他实施方案中，还将所述多肽进一步定义为Cop B多肽。在优选实施方案中，将SEQ ID NO3进一步定义为卡他莫拉氏菌的分离物430:345、卡他莫拉氏菌分离物046E或者卡他莫拉氏菌分离物56的CopB多肽内所含有的氨基酸序列。在其他实施方案中，将SEQ ID NO4进一步定义为卡他莫拉氏菌分离物4608.1的CopB多肽内所含的氨基酸序列。在其他其他实施方案中，所述多肽与载体蛋白质共价结合并且可以还含有一种或多种佐剂。在某些实施方案中，所述免疫原性组合物当以免疫原性量施用于哺乳动物宿主时，保护该宿主抵抗75％以上的卡本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有卡他莫拉氏菌多肽片段的免疫原性组合物，其中该片段含有ＳＥＱＩＤＮＯ：１、ＳＥＱＩＤＮＯ：２和ＳＥＱＩＤＮＯ：３的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘迨芳，JC麦克迈克尔，SM贝克，LD弗莱彻尔，
申请(专利权)人：惠氏控股公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]