本发明专利技术涉及用于抗医院内感染的免疫的多糖-葡萄球菌表面粘附素载体蛋白缀合物。该缀合物具有来自医院病原体的多糖抗原(或者是其具有一个或多个抗原表位的寡糖片段)，该抗原与葡萄球菌表面粘附素载体蛋白相缀合，该缀合物用于能同时诱发抗多糖抗原和抗葡萄球菌表面粘附素载体蛋白的抗体应答的免疫原性组合物。这种免疫原性组合物用于对由金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌或其他医院病原体引起的疾病进行免疫。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种免疫原性多糖-蛋白缀合物，所述缀合物包含来自医院病原体的多糖抗原(或者是其具有一个或多个抗原表位的寡糖片段)和葡萄球菌表面粘附素载体蛋白。本专利技术还涉及含有所述多糖-蛋白缀合物的免疫原性组合物及其用途。
技术介绍
据估计，美国每年有4000万人进入医院，其中约有200万人会罹患医院内感染(Anonyomous 1997)。医院内感染每年导致88，000人死亡，死亡率约为4. 4 %。据估算，美国每年用于医院内感染的花费为45亿美元(Weinstein 1998)。这种估算不包括在每年3100万次的门诊手术(国家卫生统计中心网站，National Center for Health Statistics' website) ,150万疗养院居住者、长期护理机构以及接受流动医疗处置的人中发生的感染。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)，特别是表皮葡萄球菌，是导致大多数医院内感染的革兰氏阳性医院机会病原体。葡萄球菌感染占全部医院内感染的近25% (约 500，000) (Haley, Culver et al. 1985) (Boyce 1997)。在有些医院中高达的入院者会罹患金黄色葡萄球菌感染(Storch and Rajagopalan 1986)。葡萄球菌(金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌)造成约47%的医院内血液感染、的手术部位感染(SSI)以及 17%的医院内肺炎(Anonyomous 1997)。金黄色葡萄球菌和CoNS的医院内感染病人的死亡率差别显著，从 5%到 68%不等(Nada，Ichiyama et al. 1996) ； (Thylefors，Harbarth et al. 1998)。葡萄球菌感染的范围多种多样，从皮肤感染诸如脓疱病、疖子、伤口感染以及植入装置引起的感染，到严重的危及生命的感染诸如骨髓炎、心内膜炎以及具有转移并发症的菌血症。这种多样性使得设计有效的针对葡萄球菌的免疫原性组合物成为真正的挑战。耐药医院内细菌的显著增加使得这种设计变得更加困难。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌造成医院内感染病人死亡的约40% (Boyce 1997)。近来，万古霉素中度耐药金黄色葡萄球菌 (VISA)的出现引起了人们对其传播的更多关注。因而对医院内感染有效的免疫原性组合物的需求正在急速上升。荚膜多糖荚膜多糖(CP)参与许多细菌病原体包括流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和B族链球菌的毒力，这已经得到了很好的证实。具荚膜细菌能够抵抗白细胞的吞噬作用，并因此能够感染血液和组织。由于抗荚膜多糖的抗体可以中和细菌荚膜的抗吞噬作用(Karakawa，Sutton et al. 1988 ；Thakker, Park et al. 1998)，因此在开发预防人类感染葡萄球菌的免疫原性组合物时，葡萄球菌的荚膜成为一个主要的靶点。在12种已知的金黄色葡萄球菌荚膜的血清型中，5型(CPO和8型(CP8)占所有临 f^^MW^i^l 85-90% (Arbeit, Karakawa et al. 1984 ；Karakawa, Fournier et al. 1985 ； Essawi, Na' was et al. 1998 ；Na' was, Hawwari et al. 1998)。绝大部分耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离株表达CP5 (Sompolinsky，Samra et al. 1985)。抗CP5和CP8的抗体能在体外诱导人类多形核嗜中性粒细胞的类型特异性调理吞噬作用并对动物给予保护 (Karakawa, Sutton et al. 1988 ；Fattom，Sarwar et al. 1996)0绝大部分细菌荚膜多糖在动物或人体内是弱免疫原。但是，如果纯化的多糖与蛋白载体分子缀合，它们即获得免疫原性和T细胞依赖性。一些实验室已经合成了含有与蛋白质共价连接的CP5和CP8的免疫原性缀合物。这些缀合物在小鼠和人体内具有极高的免疫原性并可诱导产生抗体，抗体调理被荚膜包被的金黄色葡萄球菌使其更适于吞噬作用 (Fattom，Schneerson et al. 1993 ；Gilbert et al. 1994 ；Reynaud-Rondier et al. 1991)。 含有与铜绿假单胞菌重组外毒素A相缀合的CP5的单价免疫原性组合物具有免疫原性，并且在健康的成年人和晚期肾病患者体内具有良好的耐受性(Welch et al. 1996)。在正在接受血液透析的晚期肾病患者上进行的双盲试验中，使用由CP5和CP8共价连接于铜绿假单胞菌重组外毒素A所组成的二价缀合物疫苗，在大约40周后患者对金黄色葡萄球菌所致的菌血症具有了部分免疫力。此后，随着抗体水平的下降保护力降低(Shinefield et al. 2002)。试验结果显示，需要对免疫原性组合物进行改进以有助于更完全的保护。另一种类型的细胞外多糖，是指多糖粘附素(PS/A ； (To jo，Yamashita et al. 1988))、聚-N-琥珀酰 β_1_6 葡萄糖胺(PNSG ； (McKenney, Pouliot et al. 1999)), 聚-N-乙酰葡萄糖胺表面多糖(PNAG ； (Maira-Litran，Kropec et al. 2002))，或者多糖细胞间粘附素(PIA(Mack，Fischer et al. 1996))。金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌均能表达这类多糖。PIA或者PS/A都是线型β-1，6-连接的葡糖胺聚糖。用PS/A(PNSG，PNAG) 对小鼠进行免疫后，能够降低肾脏的定植菌群并保护小鼠在受到金黄色葡萄球菌攻击后免于死亡，这种金黄色葡萄球菌在体外极少产生PS/A(PNSG，PNAG) (McKenney, Pouliot et al. 1999)。PIA在与血管内导管相关感染的发病机制中发挥重要的作用(Rupp，Ulphani et al. 1999 ；Rupp, Ulphani et al. 1999 ；Rupp and Fey 2001 ；Rupp, Fey et al. 2001)。PIA 除了促进单个表皮葡萄球菌细胞之间的粘附外，还与红细胞结合，充当红细胞凝集素O^ey， Ulphani et al. 1999)。giHiMMfe^m葡萄球菌表达多种表面粘附素(称为识别粘附的基质分子的微生物表面成分)， 包括例如纤连蛋白结合蛋白、纤维蛋白原结合蛋白、胶原蛋白结合蛋白和玻连蛋白结合蛋白。这些粘附素能够特异性地识别并结合细胞外基质(ECM)组分，例如纤连蛋白、纤维蛋白原、胶原蛋白和玻连蛋白。这些由金黄色葡萄球菌表达的大量的多种粘附因子参与致病性，它们能够通过各种途径粘附于许多组织并使之感染。抗葡萄球菌粘附素的抗体通过阻止细菌侵入哺乳动物宿主的组织或者通过促进调理吞噬作用，从而减少疾病的发生。用小量金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A (以融合蛋白形式)免疫大鼠，能够中等程度地保护其免于感染实验性心内膜炎。为诱导生成抗纤连蛋白结合蛋白A的抗体而设计了类似的免疫原性组合物，并在金黄色葡萄球菌所致的小鼠乳腺炎模型上进行了测试。免疫小鼠中发生的严重乳腺炎例数少于对照组小鼠，并且免疫小鼠中从乳腺回本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种免疫原性多糖－蛋白缀合物，该缀合物包括：至少一种来源于医院病原体的多糖抗原以及至少一种葡萄球菌表面粘附素载体蛋白，其中所述缀合物产生抗多糖抗原和葡萄球菌表面粘附素载体蛋白的特异性抗体。
【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：V·帕夫利亚克，S·M·巴克，S·P·皮莱，J·M·帕蒂，B·D·普拉特，
申请(专利权)人：惠氏控股公司，抑制技术公司，
类型：发明
国别省市：US
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